抗成长型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的：制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体，并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法：采用来自墨西哥株（Mexican strain)的戊型肝炎病毒重组蛋白（p166Mex)免疫Balb/c小鼠，取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，经酶联免疫吸附试验（ELISA）法筛选阳性克隆，并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株（Burma strain)和美国株（USA strain)的重组蛋白（p166Bur,p166US)进行交叉反应测定。结果：最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株。即D8G10,E5E12,D4A3,B7E6。其中D8G10，E5E12和B7E6细胞株的培养上清液，还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论：利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体，初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白（p166Bur,p166US,p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

间苯二酚显色法测定重组人红细胞生成素原液中唾液酸含量

重组人红细胞生成素(Recombinant Human Erythropoietin，简称rhEPO)是应用基因工程技术。从含有人红细胞生成素基因的中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)培养液中提取而得到的。它是含有165个氨基酸的糖蛋白，分子量为34KD左右，具有与正常人体内存的天然红细胞生成素相同的生理功能，可促进骨髓红细胞的分化和增殖。唾液酸英文又称saili acid(缩写为SA)，是神经氨酸衍生物之通称。N-乙酰神经氨酸系唾液酸(N-酰基神经氨酸)在自然界分布最广的，     

重组人生长激素治疗肝硬化低蛋白血症疗效观察

重组人生长激素 (ｒ ｈＧＨ)具有促进蛋白合成、抑制蛋白分解、改善负氮平衡的作用 ,最早用于治疗垂体性侏儒症 ,近年来应用范围已扩展至营养不良及低蛋白血症的治疗。为了进一步评价ｒ ｈＧＨ对肝硬化低蛋白血症的疗效 ,我院从 2 0 0 1年 4月到 2 0 0 1年 12月应用瑞士Ｓｅｒｏｎｏ公司生产的重组人生长激素 (商品名 :ｓａｉ ｚｅｎ)治疗肝硬化低蛋白血症 ,并和传统的人血清白蛋白 (ＨＳＡ)输注方案比较。现将观察结果报告如下。1　对象与方法1.1　病例选择　 32例均为乙肝后肝硬化住院患者 ,其中男 2 6例、女 6例 ;年龄 2 5～ 63岁。符合 …     

重组活化的Ⅶ因子的临床应用

重组活化的Ⅶ因子（rFⅦa）是一种新的止血药物，最近已应用于治疗伴抑制物的血友病出血。近几年来，该药亦应用于非血友病出血的治疗，包括先天性Ⅶ因子（FⅦ）缺乏、血小板数量和质量异常、肝功能衰竭、肝移植、重大手术及创伤。作为“通用的止血药”，rFⅦa在临床上已取得一定的疗效。     

CA的治疗和护理

目的 探讨对CA的最佳治疗方案及有效护理措施.方法 采取二氧化碳激光联合重组人白介素100万u局部疣体基地部注射和20万u臀部皮下注射治疗CA,根据病人实际情况给予一般性病护理措施、支持性心理治疗和健康教育.结果 675例CA患者386例一次性治愈,137例二次治愈,71例三次治愈,27例三次以上治愈,54例失访,总治愈率为92.0%,三个月后复发106例,复发率为17.1%.结论 采用本法治疗CA是一种简便、安全、不留疤痕、行之有效的方法.     

Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究

目的:获得高质量及充足的Fas重组蛋白。方法:采用PCR构建表达重组质粒,亲和层析纯化Fas重组蛋白,ELISA检测其免疫学功能。结果:①PCR扩增获得目的片段约 470 bp。②Sanger双脱氧链终止法测序表明,该 DNA序列仅 174位由A→G突变,属于同义突变,与已知的Fas膜外区氨基酸完全一致。③重组质粒经IPTG诱导有一蛋白得以表达,其目的融合蛋白占细菌总蛋白的17. 4%,分子量约为 34．3 kD。④经 Factor Xa切割 Fas融合蛋白,纯化获得 Fas重组蛋白,Western印迹出现特异性Fas蛋白带,分子量为21．3kD,与预测结果相吻合。⑤ELISA检测 Fas重组蛋白,具有抗体的免疫学活性。结论:成功地表达并纯化了Fas重组蛋白,解决了Fas不易获得的难题,为研究Fas提供了良好的实验材料。     

赛强,格拉诺赛特与惠尔血治疗实体瘤化疗后中性粒细胞减少的疗效比较

目的：比较赛强,格拉诺赛特与惠尔血3种重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗实体瘤化疗后中性粒细胞减少的疗效。方法：对实体瘤化疗后白细胞减少病人用rhG-CSF来治疗,A组用国产药赛强,男性47例次,女性33例次,年龄(41±17)a。B组用进口药格拉诺赛特,男性48例,女性32例次,年龄(41±17)a。C组用进口药惠尔血,男性49例,女性31例次,年龄(41±17)a。剂量均为150～300μg,4次/d,10～14d为一个疗程。结果赛强、格拉诺赛特与惠尔血的总有效率分别为97.0%.98.5%,98.5%。中性粒细胞恢复正常所需要的时间分别为(7.2±3)d、(7±3)d及(7±3)d,感染发热的发生率(T>38℃),三组分别为19%、18%及18%,三组差异无显著意义(P>0.05)。结论：赛强,格拉诺赛特与惠尔血均能缩短化疗后的骨髓抑制期,促进中性粒细胞的恢复,减少严重感染的发生率,三者的疗效,安全性基本相似。但国产赛强价格低,更适合我国国情,从减轻病人的经济负担及为发展我国医药事业考虑,建议使用国产赛强。     

顺式串联双拷贝DuIFN—γ基因的真核表达

目的：以鸭γ－干扰素（DuIFN-γ)基因为目的基因,研究同一启动子调控下,不同拷贝数的目的基因的表达状况。方法：采用基因重组技术构建含DuIFN-γcDNA单拷贝和双拷贝重组质粒并转入真核细胞COS－7中进行表达。DuIFN-γ活性采用Griess试剂检测。结果：双拷贝重组质粒和单拷贝重组质粒50％最大活性稀释度分别为1：320和1：160。双拷贝重组质粒转染上清稀释10240倍后,仍保留DuIFN-γ活性,而单拷贝重组质粒转染上清经1280倍稀释后,即丧失活性。结论：在同一启动子作用下,顺式插入双拷贝目的基因可明显增强目的基因在真核细胞中的表达量。