染色质免疫沉淀技术在人巨细胞病毒即刻早期蛋白研究中的应用

染色质免疫沉淀(ChIP)技术是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最好方法,该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。在研究人巨细胞病毒及其他病毒的基因调控和病毒蛋白与宿主细胞DNA相互作用方面,该技术亦有很好的应用前景。利用该技术研究表明,人巨细胞病毒IE1-72和IE2-86蛋白对组蛋白乙酰化的影响可能是调控病毒转录的重要机制之一。     

022 人肿瘤坏死因子-α突变蛋白与活性部位分析

利用基因工程技术，可以得到大量的hTNF-α突变蛋白，它们是研究hTNF-α活性部位结构与功能关系的有力工具，国外许多学者就此方面做了大量的实验研究。本文就影响hTNF-α功能的活性区域和主要氨基酸残基以及N端、C端和二硫键与hTNF-α生物活性的关系做一综述。     

CD54和LFA-1的相互作用在6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的JurkatT细胞的黏附性增强中的作用

目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)的黏附性增强中的作用。方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强，用细胞与细胞间黏附分子-1-人IgG的Fc片段(ICAM-1-Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试验研究CD54-LFA-1的作用，用单克隆抗体MEM-148检测As细胞LFA-1亲和力的变化，用单克隆抗体NKI-L16检测AS细胞LFA-1亲合力的变化，用鬼笔环肽染色细胞骨架，用Jurkat-Raji细胞间的作用作模型研究6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对T和B细胞间黏附的影响，用ConA结合试验检测细胞中蛋白质N-糖基化的变化。结果(1)AS细胞间的黏附性增强主要与CD54及CD11a表达的增强相关，也与LFA-1亲和力的增高相关；(2)AS细胞的细胞骨架发生重排；(3)As细胞与Raji细胞间的黏附也增强；(4)ConA与AS细胞的结合增强。结论CD54和LFA-1的相互作用在AS Jurkat T细胞的黏附性增强中起重要作用。细胞骨架重排也可能起作用。As细胞的蛋白质发生了N-糖基化修饰。     

抗SARS-CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库的构建

目的 :利用抗SARS冠状病毒IgG抗体阳性的SARS康复患者外周血淋巴细胞 ,构建人源Fab段抗体文库。方法 :制备外周血淋巴细胞总RNA ,逆转录成cDNA。以其为模板 ,利用针对家族特异性Ig基因的引物扩增重链Fd段和轻链基因 ,并重组到噬菌粒载体pComb3中 ,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL 1Blue,酶切鉴定抗体库的重组率 ,并测定噬菌体抗体库的库容量。结果 :构建了源于SARS康复患者血清中抗Fab段的抗体文库 ,轻链、重链Fd段基因的重组率分别为91%和 75 % ,库容量为 7.2 3× 10 7。结论 :成功地构建了抗SARS CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库     

经腹B超误诊宫外孕21例分析

目的 分析经腹B超误诊宫外孕的原因,探讨减少误诊、漏诊的方法。材料与方法 与手术和病理检查对照分析21例宫外孕误诊的结果。结果 21例中误为炎性包块4块、卵巢恶性肿瘤1例,卵巢囊肿蒂扭转1例,卵巢囊肿并感染2例,输卵管增粗盆腔炎2例,巢实性占位3例,卵巢囊性病变1例,宫内孕不完全流产1例,宫内孕2例。未发现异常图像3例,出血性输卵管炎误诊为宫外孕1例。结论 经腹B超诊断宫外孕应常规检测尿HCG并结合临床病史综合判断,对可疑病人有条件可行彩色多普勒或经阴道超声(TVS)检查。     

微分电位溶出法连续测定人发中锌铜

锌、铜是人体十分重要的必需微量元素 ,锌对机体免疫系统和防御机能具有重大作用。铜具有酶和激素的生物催化作用 ,为多种金属酶的组成成分。锌、铜的生理功能和营养作用越来越引起人们的重视。用于人发微量元素测定的方法很多 ,而微分电位溶出法灵敏度高 ,分辨率、峰形、重现性好 ,分析过程自动化程度高。而且有仪器装置简单、价格低等优点。1　材料与方法1 1　仪器 :ＤＰＳＡ - 3型微分电位溶出仪 ,山东电讯七厂。甘汞电极、玻碳电极、锥电极、ＷＦＸ -ＩＣ型原子吸收分光光度计 ,北京第二光学仪器厂。1 2　试剂 :锌、铜标准溶液 :将购买…     

人乳头瘤病毒11型E6基因完整开放阅读框架的克隆和鉴定

目的 为构建人乳头瘤病毒11型（HPV11）DNA疫苗,从尖锐湿疣病变组织中克隆疫苗靶基因E6。方法 利用改良提取染色体外游离DNA的方法制备模板DNA,采用聚合酶链反应（PCR）技术进行基因克隆。结果 从病变组织中扩增出了全长人乳头瘤病毒11型E6基因完整开放阅读框架,并插入中介载体T-easy中构建重组质粒,转化JM109扩增后经酶切、PCR及测序分析,证实克隆成功。结论 该实验的成功为下一步制备HPV11的治疗性疫苗奠定基础 。     

人胚小分子物质对小免疫功能调节作用的研究

本研究了人胚小分子物质（人胚素）对小鼠免疫功能的影响。结果表明，人胚素可明显升高小鼠外周血白细胞总数，提高小鼠游泳耐力及持续时间；能明显升高小鼠免疫球蛋白ＩｇＧ水平，增高小鼠淋巴细胞转化率，增强小鼠迟发性反应程度；对于体液免疫功能及细胞免疫功能均有促进作用；是一种新的作用面较广的免疫调节剂。     

建立人微小病毒B19的PCR检测方法

人微小病毒Ｂ１９是微小病毒科中唯一能感染人的病毒。能够提供Ｂ１９抗原的病毒体外培养系统尚未建成，因此限制了血清学实验的开发和普及。为此作者建立起Ｂ１９病毒的ＰＣＲ检测方法。设计引物在表达外壳蛋白ＶＰ１基因区，扩增长度为４００ｂｐ。