健康人群吸烟、DNA损伤与DNA修复基因多态研究

DNA修复基因在防止机体受致癌剂作用过程中起重要作用,但尚不清楚特定的遗传变异对修复表现型和癌症风险的影响。通过测定308位属于欧洲发展规划组织(EPIC)的意大利人的DNA加合物水平及调查3种DNA损伤修复基因的多态性:XRCCl—Arg399Gln(外显子10)。XRCC3-Thr241Met(外显子7)和XPD—Lys751Gln(外显子23)。通过用DNA-32P一末端标记阵列测DNA加合物水平。用PCR—RFLP测其基因型。XRCC3-241Met基因型与较高的DNA加合物水平显著相关,而XRCCl-399Gln型和XPD-751Gln型仅在从不吸烟者中才与较高的DNA加合物水平相关。XRCC3-241Met纯合子平均DNA加合物水平为11.44±1.48(±SE),Thr/Met杂合子为7.69±0.88,而Thr/Thr纯合子为6.94±1.11(F=3.026,P=0.042)。从不吸烟者XRCCl-399Gln纯合子DNA加合物水平平均为15.60±5.42,与Gln/Arg杂合子的6.16±0.97和Arg,Arg纯合子的6.78±1.10相比(F=5.237,P=0.007)。调整几种混杂因素后观察到XPD-751Gln相比从不吸烟的XPD-751Lys纯合子其比值比有显著性(OR=3.81,95％CI:1.02~14.16)且DNA加合物水平高于平均值。表明所有已分析的多态可导致不同的DNA修复,并提示需进一步探讨存在于基因多态、吸烟和其他风险因素间的交互作用。     

EB病毒DNA酶基因特异性结合蛋白的检测

ＰＣＲ法扩增出ＥＢ病毒ＤＮＡ酶全基因之后、用「γ＾－３２Ｐ」ＡＴＰ进行５’末端标记然后利用凝胶迁移分析法来检测与该基因结合的蛋白质。结果表明在Ｒａｊｉ细胞核和细胞浆中均有ＥＢ病毒ＤＮＡ酶基因非特异性和特异性结合蛋白，在人乳清中也有与该基因结合的蛋白质。     

PCR检测结核分枝杆菌DNA中不同细菌裂解方法结果观察

目的：寻找适合于临床ＰＣＲ检测结核杆菌ＤＮＡ简单、快速、有效、经济的细菌裂解方法。方法：采用１１种细菌裂解剂对相同数量的结核分枝杆菌进行裂解，裂解上清液直接用于ＰＣＲ扩增，结果：１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００，１％ＮＰ４０，１％Ｔｅｗｅｅｎ２０、和１％ＯＰ四种裂解剂的裂解液可直接扩增出结核分枝杆菌ＤＮＡ；ＳＤＳ，ＮａＯＨ，十二烷基肌酸钠等裂解剂的裂解液直接用于ＰＣＲ扩增均为阴性。结论：１％的Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００，ＮＰ４０、Ｔｅｗｅｅｎ２０和乳化剂ＯＰ裂解细菌效果好，又不抑制ＰＣＲ反应，适合于作为临床ＰＣＲ检测结核杆菌的裂解剂。     

重组人骨形成蛋白—2成熟肽在大肠杆菌中的高效表达

利用大肠杆菌系统高效表达人骨形成蛋白－２成熟肽。方法；将编码人骨形成蛋白２成熟肽的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体ｐＤＨ上，使其受控于ＰＲＰＬ启动子，构建成表达质粒ｐＤＨＢ２ｍ，以大肠杆菌ＤＨ５α为宿主菌。对工程菌进行温度诱导表达，表达产物初步纯化后进行复性处理，用小鼠肌袋模型检测产物诱骨活性。     

Measurement of biological activity of somatotropin in hypophysectomized rats

目的：建立测定生长激素（ＧＨ）在体生物活性的方法．方法：以去垂体大鼠体重增长（ＢＷＧ）和胫骨骺软骨板宽度（ＴＥＷ）为指标，观察动物性别、给药途径、次数和周期不同对效应的影响；同时进行４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法，测定ＧＨ的效价（平行线３×３设计）．结果：♀和♂ｓｃ和ｉｍ给药以及每日给药１次和２次的ＢＷＧ和ＴＥＷ差异无显著意义．给药６ｄ比给药４ｄ引起较大的ＢＷＧ和ＴＥＷ（Ｐ＜００５）．４ｄＢＷＧ法和６ｄＢＷＧ法在００２０－０５００ＩＵ·ｄ－１有较好的λ值（００６６０和０１７４７）和ｒ值（０９０００和０９２３７）；４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法测得ｒｈＧＨ的效价为４６１３２，３９８２９和４８０２３ＩＵ／ａｍｐ．６ｄＢＷＧ法有较小的λ值和较低的ＡＲＦＬ值．结论：可在同一组去垂体大鼠体内同时用４ｄＢＷＧ，６ｄＢＷＧ和６ｄＴＥＷ法测ＧＨ活性，以６ｄＢＷＧ法较好．     

直肠癌远端切除2cm是安全的吗？：（41例直肠癌流式细胞DNA分析…

用流式细胞技术分别对４１例直肠癌新鲜标本的癌灶，癌远端移行区及近切缘正常组织细胞动力学研究。结果：癌灶ＳＰＦ和ＰＩ极显著高于癌远端２ｃｍ移行区及近切端正常组织；。癌远端２ｃｍＳＰＦ显著高于近切端组织，说明癌旁２ｃｍ组织的ＤＮＡ合成期细胞已呈增殖活跃状态，尽管普通光镜下此区尚无癌细胞。     

食管癌高发及低发区患者DNA修复功能的研究

本文对食管癌高、低发区食管癌患者和正常人,经MNNG诱导的DNA损伤修复功能进行了研究。实验采用外周血淋巴细胞培养的方法。每组又分为对照组及MNNG诱导组。样品以~3H-TdR标记后经液闪仪计数法进行检测。结果发现,低发区正常人经MNNG诱导的DNA损伤修复功能明显高于对照组,两个地区食管癌患者修复能力均低于正常人,与地区无关。     

过氧化氢对白色念珠菌DNA破坏的研究

本文用热变性温度法研究一定浓度 H_2O_2对 C.albicans DNA 破坏作用。结果表明,经6%和10%H_2O_2处理后,C.albicans DNA G c Mol%(分别为28.1±0.82和14.4±1.51)显著低于对照 DNA G C Mol%(85.9±0.62),并推断 H_2O_2可能作用于 C.albicans DNA 碱基以及其间的氢键上;DNA 电泳图谱发现,经3%和6%H_2O_2处理的 C.albicans DNA 电泳带明显不同于对照,提示 H_2O_2更易造成 C.albicans DNA 核苷酸链的降解或断裂.H_2O_2对 C.albicans DNA 的破坏,增强了其杀菌作用。