地高辛标记人乳头状瘤病毒DNA探针的制备及其应用

本文将含ＨＰＶ重组质粒的大肠杆菌活化，扩增，提取，酶切回收，获得纯化的７．９ｋｂＨＰＶ ＤＮＡ片段，通过随机引物标记法制成Ｄｉｇ－ＨＰＶＤＮＡ探针。用此探针进行斑点杂交，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交检测女性生殖器活检组织标本中的ＨＰＶＤＮＡ，并检测其敏感生，特异性及重复性。１３３例活检组织标本中，经病理切诊断为尖锐湿疣的标本，其ＨＰＶ６ｂ和ＨＰＶ１１检出率为８０．６５％，非尖锐湿疣为６．９３％。试验证     

环氧化酶-2基因启动子甲基化及表达与胃黏膜病变的关系

目的 探讨环氧化酶2(COX-2)基因启动子区甲基化水平和蛋白表达与胃黏膜病变的关系,并对其相关的影响因素进行研究.方法 以1201例患有不同胃黏膜病变的高危人群为研究对象,采用免疫组织化学方法榆测COX-2表达,用亚硫酸氢钠-变性高效液相色谱(DHPLC)对COX-2启动子甲基化率进行定量分析,采用13C尿素呼气实验(13C-UBT)对幽门螺旋杆菌(H priori)感染状况进行测定.结果 COX-2甲基化率中位数随胃黏膜病变的加重逐渐升高,在浅表性胃炎和慢性萎缩性胃炎(SG/CAG)、肠上皮化生(IM)及不确定性异型增生和异璎增生(Ind DYS/DYS)病变中分别为10.6%、11.8%、13.8%,各病变组之间差异有统计学意义(X2=8.312,P=0.016).分层分析显示,在H pylori感染阴性病例中,COX-2甲基化率仍随病变加重明显升高,在SG/CAG、IM、Ind DYS/DYS病变中其中位数分别为8.8%、10.6%、14.1%(X2=6.629,P=0.036).进一步分析发现,COX-2甲基化率随着COX-2表达强度的增强而降低,由COX-2弱阳性表达的13.3%降至强阳性表达的7.6%(X2=10.400,P=0.015).结论 COX-2启动子甲基化水平与胃黏膜病变程度及H pylori感染状况密切相关,并与COX-2表达强度呈负相关,说明COX-2启动子区异常甲基化可能在胃黏膜病变的演变过程中起重要作用.     

DNA含量及形态参数对喉部恶性肿瘤前期病变的诊断价值

ＤＮＡ含量及形态参数对喉部恶性肿瘤前期病变的诊断价值董学武，王强，李潮，洪书丽，李辉，汪翠华，孙连玉细胞化学、ＤＮＡ定量化学和体视学的研究发展，为了解癌细胞的生长特性提供了客观手段。本文对喉正常粘膜上皮（Ｎｏｒｍｏｅｐｉｔｈｅｌｔｉｕｍ，ＮＥ）、喉乳...     

大肠肿瘤细胞DNA及RNA的定量分析及临床意义

目的：测定大肠肿瘤细胞DNA及RNA的含量，观察其与疾病的关系。方法：采用流式细胞计方法对63倒不同性质的大肠肿瘤细胞DNA及RNA含量进行了定量研究，其中28例为大肠良性肿瘤，35例为大肠癌。结果：大肠良性肿瘤的异倍体率为43％．大肠癌的异倍体率为80．0％。以“标准RI”及“标准RI”为指标判断大肠肿瘤性质的准确性较“异倍性”为高，且双指标同时应用高于任一单项指标，对大肠良恶性肿瘤诊断的准确率分别为92．9％和94．3％。结论：“标准DI”和“标准RI”是判断大肠肿瘤性质的理想指标。     

赖型钩体flaB2与VR1012中的CpG基序分析

目的：对问号赖型钩端螺旋体（赖型钩体）DNA疫苗[包括内鞭毛蛋白基因（flaB2)和质粒DNA表达载体（VR1012）]的CpG基序（CpG motifs)进行分析，为DNA疫苗免疫机制的阐明和提高DNA疫苗的效能奠定基础。方法：以flaB2与VR1012构建重组DNA的免疫原，对flaB2及VR1012全核苷酸序列进行计算机分析（分类、计数和定位）。结果：CpG的“C”的侧翼为两个嘌呤，“G”的侧翼为两个嘧啶，在flaB2中共3个，分别为GACGCT，GACGTC和GACGCC；在VR1012中共11个，分别为GACGTC1个，GACGCT2个，GACGCC1个，GACGTT1个，GGCGTT2个，GGCGCT2个，GGCGCC1个，AACGCT1个，其中特别重要的TGACGTCA4个和TAACGCCA有1个，位于5'端456－463；509－516；592－599；778－785和486－493；4个TGACGTCA和1个TAACGCCA均位于5'端且相对集中。结论：赖型钩体flaB2与VR1012构成的DNA疫苗含有TGACGTCA等CpG，这些基序又称免疫刺激序列，构成了DNA疫苗中的佐剂。     

帕金森氏病和肌营养不良症（Erb型）中线粒体DNA的部分缺失

用ＰＣＲ技术对１２例神经肌肉性疾病患者的１６个标本进行了线粒体ＤＮＡ缺失情况的研究。发现２例帕金森氏病患者的肌肉组织以及其中１例的外周血和另１例肌营养不良（Ｅｒｂ型）患者的肌肉组织中线粒体ＤＮＡ至少有５２６ｂｐ的缺失。还对线粒体ＤＮＡ的部分缺失与疾病发生的关系进行了讨论。     

微核实验中抗着丝粒抗体和DNA探针技术的应用及其意义

微核实验中抗着丝粒抗体和ＤＮＡ探针技术的应用及其意义曹佳综述蔡亚娜审校重庆第三军医大学预防医学系分子毒理室重庆６３００３８广州师范学院生物系广州５１０４００微核（Ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ，简称ＭＮ）主要由染色体受损后的染色体断片形成，这一基本概念已被遗...     

rhGM-CSF对小鼠口腔粘膜损伤的防治作用

目的：探讨rhGM-CSF促进口腔腔溃愈合的作用机制。方法：取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞，用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及^3H－胸腺嘧啶掺入法（^3H-TdR）测定其增殖情况，结果rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用，在80－100ng/ml时，细胞生长达到最佳状态，过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降。结论：rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合。     

从癌症病人全血中提取DNA影响因素的探讨

从癌症病人全血中提取基因组DNA的方法简便易行,我们曾做过报道。但在实际应用中,本方法中某些因素对提取DNA的成功至关重要,若掌握不当,则会导致整个实验失败。现将我们对其几项影响因素的体会及控制方法介绍如下: