Effect of N-tosyl-L-phenylalanylchloromethyl Ketone on Tumor Necrosis Factor-alpha -induced NF-κB Activation and Apoptosis in U937 Cell Line

Summary: To investigate the effect of N-tosyl-L-phenylalanylchloromethyl ketone (TPCK) on tumor necrosis factor-alpha-induced NF-κB activation and apoptosis in U937 cell line, changes and subcellular localization of NF-κB/p65 and IκB-α were observed by fluorescencemicroscopy and expression and degradation of IκB-α by flow cytometry. The apoptosis of U937 cells was measured by flow cytometry and electrophoresis of DNA. Immunolfluorescence assay showed that NF-κB/p65,IκB-α only localized in cytoplasm. After TNF-α stimulation, p65 was localized only in nuclei, and IκB-α was only localized in cytoplasm and decreased. The changes of TNF-α stimulation were specifically inhibited by TPCK. Flow cytometry also revealed the downregulation of IκB-α protein during TNF-α-induced apoptosis and the down-regulation was specifically inhibited by TPCK. Flow cytometry also showed the apoptosis of U937 cells after TNF-α induction. DNA ladder can be detected in cells treated by TNF-α. It is concluded that degradation of IκB-α protein and NF-κB/p65 translocation occur during TNF-α-induced apoptosis of U937 cells, suggesting the activation of NF-κB.TPCK-sensitive protease plays an important role in the degradation of IκB-α protein induced by TNF-α in U937 cells. TPCK sensitive protease also plays an important role in the apoptosis of U937 cells induced by TNF-α.     

检测宫颈癌癌前病变的新进展

官颈癌是妇科肿瘤死亡的第二大原因，但大多数宫颈癌在发展成侵犯性恶变前有多年的非侵犯性病变，即癌前病变存在。及早发现宫颈癌癌前病变无疑是切断宫颈癌发生和发展的重要手段。主要介绍宫颈癌癌前病变的细胞学、组织学检查，基因检查及与宫颈癌发生发展有密切关系的HPVDNA检测方面的最新进展。     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

乙肝核酸疫苗在BALB/c小鼠体内的生物分布情况

目的：了解DNA疫苗在BALB／c小鼠体内的生物分布情况，建立DNA疫苗体内生物分布情况研究方法。方法：乙肝核酸疫苗(HBV DNA)经^32P标记、分离、纯化、鉴定后，胫前肌注射给药，结合三氯乙酸(TCA)沉淀，研究肌注乙肝核酸疫苗后BALB／c小鼠体内的生物分布情况。结果：质粒DNA疫苗除注射局部肌肉分布较多外，其他一些重要组织也有分布，其中腺体组织(肾上腺、胰腺、胸腺)中的浓度最高，其次为排泄物(尿、肠内粪)，脑组织中浓度最低。各组织中可沉淀放射性按血浆浓度时间曲线下面积(AUC)从高到低排列依次为胸腺、肾上腺、膀胱、生殖腺、脂肪、肠内粪、胰腺、颌下腺、脾、小肠、眼球、肝、肠内容、肾、甲状腺、肺、淋巴结、对侧肌肉、心脏和脑。结论：^32P标记DNA疫苗后各组织β计数结合三氦乙酸沉淀法研究核酸疫苗生物分布情况，方法灵敏、可靠，易于分析。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

图象分析法检测乳腺癌细胞DNA含量及其意义

目的：检测乳腺癌及其癌变过程中细胞DNA的含量，探讨DNA含量在这一过程中的变化规律和临床意义。方法：对1988年63例在我院手术治疗的浸润性乳腺癌，以及1984～1992年间手术治疗的13例导管内癌（ductal carcinoma in situ,DCIS)、6例导管内癌伴早期浸润(DCIS Ca)、6例导管上皮高度增生(proliferative breast disease,PBD)的原发灶进行DNA图象分析(image cytometry，ICM)．结合临床资料，分析63例浸澜性乳腺癌细胞DNA含量与预后关系的观察。结果：发现浸润性乳腺癌与：DCIS及PBD相比，有较高的DNA指数(DNA index，DI)、异倍体检出率、核面积(nuclear area，NA）和5C细胞阳性率（P<0.05）。在DCIS与PBD两组病人中，DI、NA无明显差别（P<0．05)，而异倍体肿瘤，5C细胞出现在DCIS中(P<0.05)，且PBD中无5C细胞，异倍体出现。在乳脉癌病人预后的单因素分析中，发现5C细胞阳性、异倍体肿瘤等的无病生存率低(P<0．01)。结论：异倍体细胞群的出现是细胞癌变的早期标志，DNA含量随着乳腺癌恶性程度增加而发生显著改变。     

整合互补 集优成势——镇江医学院实施德育系统工程实践

《中国普通高等学校德育大纲(试行)》在阐述德育的“整体性原则”时指出:“高等学校德育,要完善科学的工作体系,发挥全体教职员工、各种途径和环节的德育功能,协调一致,形成卓有实效的德育合力。”近几年来,镇江医学院把学校德育工作作为一项系统工程,从整体着眼,于谋势着力,在管理体制、队伍组织、施教方式、受育机制等方面作了积极的探索和创新,从而在全院形成了齐抓共管、立体交叉、整合互补、集优成势的德育工作新格局。一、在管理体制上,党政统一,“一级管理”,由此使德育工作得力迅捷镇江医学院党委和行政,都把培养有理想、有道德、有…     

应用地高辛标记探针检测以Vero传代细胞制备人用狂犬疫苗中残余细胞DNA含量

用地高辛标记正常Ｖｅｒｏ细胞ＤＮＡ，制成特异探针，通过与制备人用狂犬疫苗的基质Ｖｅｒｏ细胞同源ＤＮＡ杂交，检测人用狂犬疫苗中残余Ｖｅｒｏ细胞ＤＮＡ含量，达到ＷＨＯ规程中“以传代细胞制备生物制品中残余细胞ＤＮＡ含量，每剂量ＤＮＡ须低于１００ｐｇ”的检测要求。检测灵敏度可达１ｐｇ，杂交反应特异性高，重复性好。测得以Ｖｅｒｏ细胞制备人用狂犬疫苗粗制原液中残余细胞ＤＮＡ含量为１００～１０００ｐｇ／ｍｌ，超滤浓缩后为１０４～１０６ｐｇ／ｍｌ，纯化后低于１０～１００ｐｇ／ｍｌ。这对以传代细胞为基质的生物制品中残余细胞ＤＮＡ的检测提供了一种常规可行的方法，因而具有重要的应用价值