HPLC法测定出血热预防片中的女贞苷、特女贞苷、哈巴苷和哈巴俄苷

目的建立高效液相色谱法测定出血热预防片中女贞苷、特女贞苷、哈巴苷和哈巴俄苷的定量测定方法。方法采用依利特Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm);体积流量1.0 m L/min;女贞苷和特女贞苷的检测流动相为甲醇-0.1%磷酸(42∶58),检测波长为224 nm;哈巴苷和哈巴俄苷的检测流动相为乙腈-0.03%磷酸溶液,哈巴苷检测波长为210 nm,哈巴俄苷检测波长为280 nm。结果女贞苷和特女贞苷分别在0.012 6~0.252 0μg(r=0.999 2)、0.073 2~1.464 0μg(r=0.999 6)范围内进样量与峰面积的线性关系良好,平均回收率分别为97.1%、98.2%,RSD(n=6)分别为1.0%、1.1%。哈巴苷和哈巴俄苷分别在0.095 2~1.904 0μg(r=0.999 5)、0.013 4~0.268 0μg(r=0.999 1)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.7%、97.0%,RSD(n=6)分别为0.7%、0.9%。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可应用于出血热预防片的质量控制。     

女贞子饮片中特女贞苷的薄层色谱鉴别

目的建立女贞子饮片中特女贞苷新的薄层色谱鉴别方法。方法采用70％乙醇回流提取和D101大孔树脂柱纯化处理得到供试品,以特女贞苷为对照品,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（6：3：1：1）为展开剂,以1％香兰素硫酸乙醇溶液为显色剂进行薄层层析。结果在可见光下检视,女贞子饮片中特女贞苷在与对照品相应位置上显相同颜色的斑点,显色清晰。结论该方法可作为女贞子饮片中特女贞苷新的薄层鉴别方法。     

市售二至丸水蜜丸和配方颗粒的体外溶出度比较

目的:考察二至丸水蜜丸和配方颗粒中5种药效活性成分的溶出情况,比较这些成分在2种剂型中的体外溶出特点。方法:参照《中国药典》2010年版二部附录X C溶出度测定法,采用第二法桨法,转速75 r·min-1,测试不同溶出介质(水,30%乙醇,0.1 mol·L-1盐酸和p H 4.5,6.8的磷酸盐缓冲液)。利用UPLC测定2种剂型中红景天苷、特女贞苷、女贞苷、木犀草素和齐墩果酸5种药效成分的体外溶出度,比较2种制剂的溶出行为。结果:在各个溶出介质中,二至丸2种不同制剂中各活性成分的溶出行为差别很大,配方颗粒中红景天苷、特女贞苷、女贞苷在各个介质里都能快速溶出且溶出量高(85%);而水蜜丸中木犀草素和齐墩果酸只能在p H 6.8磷酸盐缓冲液中溶出很少的量(30%)。从差异因子和相似因子分析,2种制剂中相同成分的溶出曲线无相似性。结论:和水蜜丸相比,配方颗粒中活性成分的累积溶出量更高,且在同一种溶出介质中,能溶出更多的药效成分。说明在体外溶出方面,配方颗粒这种新型的中药形式具有更大的优势。建立的溶出度方法可以应用于二至丸制剂的质量控制。     

基于5种特征性成分综合评价二至丸的质量

目的:建立二至丸中5种特征性成分特女贞苷、红景天苷、酪醇、木犀草素、蟛蜞菊内酯同时检测的含量测定方法,并据此评价所收集的11批二至丸样品的质量。方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,10%~30%A;15~25 min,30%~33%A;25~30 min,33%A)。流速1 mL·min~(-1),检测波长225 nm和349 nm,柱温30℃。结果:5个成分的分离度良好,红景天苷、酪醇、特女贞苷、木犀草素和蟛蜞菊内酯的线性范围依次为202.55~12 153,84.55~5 073,244.30~14 657.72,2.56~153.72,2.32~139.2 ng。加样回收率平均值处于95.61%~103.47%,RSD均2.0%。结论:建立的含量测定方法简便、准确,重复性好,可用于市售二至丸样品的含量测定和质量控制。11批样品中5个特征性成分含量差异较大,特女贞苷含量差异60倍,最低值0.15 mg·g~(-1),最高值10.22 mg·g~(-1),其原因可能与原料质量和执行标准等因素有一定关系。     

特女贞甙体外对小鼠脾淋巴细胞转化和自然杀伤细胞活性的影响

目的：观察特女贞甙（ＳＰＮ）体外对小鼠脾淋巴细胞转化和自然杀伤细胞活性的影响。方法：分别采用（１）３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，以核素掺入量为测定指标；（２）３Ｈ－ＴｄＲ标记靶细胞释放法，以杀伤率和抑制率为测定指标。结果：ＳＰＮ能与亚适量刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）协同提高正常鼠脾Ｔ淋巴细胞的转化；ＳＰＮ对正常鼠脾自然杀伤细胞（ＮＫ）活性无明显作用（Ｐ＞０．０５），但能显著提高由环磷酰胺抑制的ＮＫ杀伤功能（Ｐ＜０．０１），减轻由地塞米松引起的ＮＫ活性低下作用（Ｐ＜０．０１）。结论：ＳＰＮ为中药女贞子中具有免疫活性的水溶性成分之一。     

桂花种子环烯醚萜苷的提取工艺与抗血栓活性研究

目的优选桂花4大品种种子中2种主要环烯醚萜苷类成分(特女贞苷和女贞苷G13)的提取工艺并对桂花种子进行抗血栓活性评价。方法采用L_9(3~4)正交设计,从乙醇体积分数、料液比和提取时间3个方面考察超声、回流、微波不同提取方法对桂花种子中2种成分的提取效果。以提取率、成分质量及总峰面积为指标进行综合加权分析,确定最佳的提取方法和提取工艺。建立斑马鱼抗血栓模型评价桂花种子的抗血栓活性。结果 3种提取方法中,微波提取效果最好,最佳提取工艺为乙醇体积分数55%、料液比1∶10、提取时间15 min。HPLC分析表明桂花4大品种种子的化学成分组成基本一致。斑马鱼抗血栓活性结果显示,桂花种子提取物的血栓抑制作用不明显,在高浓度剂量下易导致心包水肿。结论考察了桂花4大品种种子中2种环烯醚萜苷的提取工艺,同时初步研究了银桂品种种子水提物的抗血栓活性,为桂花子这种废弃资源的二次开发和利用提供了参考。