用于眼部给药的槲皮素与microRNA-150共载阳离子固体脂质纳米粒制备及初步评价

目的制备槲皮素与microRNA-150(m R150)共载阳离子固体脂质纳米粒(Que/mR150 SLNs),考察其制备工艺,并评价其体外释放、细胞摄取能力以及眼部给药安全性。方法采用薄膜分散法制备包载槲皮素的阳离子固体脂质纳米粒(Que-SLNs),以平均粒径、多分散指数(PDI)、包封率为指标,优化其制备工艺;采用静电吸附法将m R150共载于纳米粒中,制备Que/mR150 SLNs,通过琼脂糖凝胶电泳实验考察纳米粒对miRNA的吸附效率;并考察Que/mR150 SLNs中槲皮素的体外释药性能;采用MTT法测定Que/mR150 SLNs对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC增殖的影响,并对其进行荧光标记,观察其在HUVEC细胞中的摄取情况;并通过兔眼病理组织切片考察Que/mR150 SLNs对兔眼的刺激性。结果经过工艺优化,制得的阳离子纳米Que-SLNs载药性、粒径分布、稳定性均较好,其外观呈类球形,放置2个月能保持稳定,槲皮素包封率为(85.25±1.29)%,载药量(1.67±0.02)%,平均粒径(110.00±2.10)nm,Zeta电位(53.20±5.12)m V;体外药物释放结果表明,槲皮素在纳米粒中释放较缓慢,48 h内累积释放量约(80.69±1.29)%;在不同阳离子材料双十八烷基二甲基溴化铵与m R150的质量比(DDAB/RNA)为6∶1时,阳离子固体脂质纳米粒可基本将m R150包载完全,且对其粒径、电位影响较小;MTT实验表明,50～150 mg/L的空白纳米质量浓度对HUVEC细胞无明显增殖毒性;细胞摄取实验表明,Cy5与香豆素6(coumarin-6,C6)双荧光标记共载纳米能有效进入HUVEC细胞;兔眼病理组织切片显示Que/mR150SLNs多次给药对眼部角膜组织无明显损伤。结论 Que/mR150SLNs固体脂质纳米粒制备工艺稳定可靠、重复性好、贮藏稳定性、生物安全性好,有利于高效递送槲皮素与m R150进入HUVEC细胞,为年龄相关性黄斑变性等血管增生相关疾病的治疗提供思路。     

UPLC法测定水红花子中花旗松素及槲皮素的含量

目的 应用超高效液相色谱法(UPLC)建立同时测定水红花子药材中花旗松素和槲皮素含量的方法。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,柱温25 ℃,检测波长290 nm,流速0.2 mL·min-1,进样量1 μL。结果 建立的分析方法方法学考察良好。花旗松素、槲皮素进样浓度分别在3.258~104.272 μg·mL-1、2.983~95.452 μg·mL-1内呈良好的线性关系(r2=0.999 9),平均加样回收率为98.8%、98.8%,RSD值为1.9%、2.2%。结论 本方法简便、快速,可在同一波长下快速测定水红花子中花旗松素及槲皮素的含量,为水红花子药材质量控制提供参考依据。     

鬼箭羽中黄酮类化学成分研究

目的对鬼箭羽Euonymus alatus中的黄酮类成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定了13个化合物,其中二氢黄酮及其苷类4个:柚皮素(1)、香橙素(2)、二氢槲皮素(3)、橙皮苷(4);黄酮及其苷类8个:山柰酚(5)、槲皮素(6)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(7)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、金丝桃苷(10)、山柰酚-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(11)、槲皮素-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(12);黄烷酮醇类1个:去氢双儿茶素A(13)。结论化合物3、7～9、11、12为首次从该植物中分离得到。     

基于WGCNA联合网络药理学探究防己地黄汤治疗类风湿关节炎的作用机制

目的 利用网络药理学和加权基因共表达网络分析（WGCNA）方法探讨防己地黄汤治疗类风湿关节炎的分子机制。方法 利用TCMSP、SwissTargetPrediction、HERB数据平台及相关文献检索防己地黄汤的主要活性成分及其相关靶点,通过R软件limma包对GEO平台类风湿关节炎数据集GSE110169进行差异分析。基于WGCNA筛选与疾病相关的基因模块。利用R软件VennDiagram包进行交集靶点分析。通过Cytoscape的cytoHubba插件筛选核心靶点基因。采用Cytoscape软件进行“药物–活性成分–靶点–疾病”网络构建与分析。clusterProfiler包对交集靶点基因进行基因本体论（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。通过PyMOL软件对核心活性成分与核心靶点基因进行分子对接验证;并运用CIBERSOTR进行核心靶点基因的免疫浸润分析。结果 共筛选出有效活性成分129个,相关靶点1 280个,基因芯片差异基因2 091个;筛选出3个与疾病相关的基因模块;获得药物与疾病共同靶点139个;KEGG通路分析显示,主要富集在T细胞受体...     

篱蓼地下部分的化学成分研究

目的 研究篱蓼Fallopia dumetorum地下部分的化学成分。方法 利用硅胶、Sephadex LH-20、C₁₈-ODS等柱色谱,以及半制备高效液相色谱(HPLC)技术进行系统分离纯化,结合质谱(MS)、核磁共振谱(NMR)等波谱数据和文献对照等手段鉴定化合物结构;对部分化合物进行体外抗氧化活性测试。结果 从篱蓼地下部分醋酸乙酯提取物中分离得到27个化合物,分别鉴定为对羟基肉桂酸甲酯(1)、反式-4-甲氧基肉桂酸(2)、methyl gallate 3-O-β-D-glucopyranoside(3)、smilaside J(4)、lapathoside A(5)、vanicoside B(6)、hedyotisol A(7)、表儿茶酚(8)、红花素(9)、木犀草素(10)、槲皮素(11)、异槲皮苷(quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside,12)、槲皮素-3-O-β-D-木糖苷(quercetin 3-O-β-D-xylopyranoside,13)、2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-...     

基于miR-124-3p/IL-6信号通路的槲皮素和表儿茶素协同调节炎症相关性结直肠癌研究

目的 基于miR-124-3p/白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)信号通路探究槲皮素与表儿茶素协同作用对炎症相关性结肠癌模型小鼠的干预作用及作用机制。方法 采用氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）/葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）诱导小鼠建立炎症相关性结肠癌模型,同时单独或联合给予槲皮素和表儿茶素,待整个造模周期结束,测量各组小鼠结直肠长度,统计结直肠组织肿瘤数量;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠结肠组织病理变化;采用qRTPCR检测结直肠组织中炎症相关基因[Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、IL-1β、IL-6、IL-17]及肿瘤相关基因[c-myc、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）]和miR-124-3p的m RNA表达;采用Western blotting检测结直肠组织中磷酸化信号转导与转录活化因子3(phosphorylated signal transducer and activator of t...     

基于UPLC指纹图谱的菟丝子酒炙前后化学模式识别及多成分定量测定

目的 建立生菟丝子Cuscutae Semen与酒菟丝子UPLC指纹图谱,并结合多元统计分析和定量测定研究菟丝子酒炙前后化学成分的变化,为菟丝子质量评价提供参考。方法 采用UPLC法进行测定,色谱柱为Thermo AccucoreTM C18柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,柱温30℃,梯度洗脱,进样体积为2μL,体积流量为0.4m L/min,采用分段波长,建立15批酒菟丝子及15批生菟丝子指纹图谱。通过相似度评价、层次聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)来对指纹图谱进行分析评价,同时对9个主要成分进行定量测定,寻找炮制前后差异成分。结果 建立的UPLC指纹图谱中,共匹配了19个共有峰,宁夏产区与内蒙产区的生菟丝子和酒菟丝子相似度均较高,HCA中可将酒菟丝子与生菟丝子明显区分,PCA提取出4个主成分,能够明显区分菟丝子生品及炮制品。正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squ...