乙肝清热解毒片质量标准的改进

目的:改进乙肝清热解毒片的质量标准。方法:增加茜草的薄层色谱,修订虎杖的含量测定方法为HPLC法测定虎杖苷的含量。HPLC色谱条件:采用SUNTEK Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(18∶82),流速1.0mL.min-1,柱温30℃,检测波长306 nm。结果:茜草的薄层色谱斑点分离良好;虎杖苷的含量测定方法专属性高,虎杖苷峰与其他峰分离良好,0.0615～0.6152μg范围内呈良好的线性关系,加样回收率为98.4%(RSD=1.8%)。结论:通过对乙肝清热解毒片质量标准的改进,使标准更具有专属性,更有利于该产品的质量控制。     

虎杖苷对ApoE-/-小鼠肝脏miR-214表达水平及肝功能的影响

目的研究虎杖苷（PD）对ApoE-/-小鼠肝脏miR-214及肝功能的影响。方法采用高脂饲料喂养雄性ApoE-/-小鼠,建立小鼠 AS模型。将ApoE-/-小鼠随机分为4组（n=10）,即模型组（Model）、辛伐他汀组（Simvastatin）、PD低剂量组（PDL）、PD高剂量组 （PDH）,另设10只同龄C57BL/6J小鼠为正常对照组。连续给药12周后取血,检测小鼠血糖、血脂、谷草转氨酶（AST）、谷丙转 氨酶（ALT）、肝脏T-SOD及MDA等指标,HE染色观察肝组织病理切片,实时荧光定量PCR检测miR-214水平。结果模型组小 鼠血糖和血清中TC、TG、LDL-C、ALT和AST,以及肝脏中MDA较正常对照组显著增高（P<0.01）,血清中HDL-C和肝脏中 T-SOD、miR-214则显著降低（P<0.01）,肝切片可见细胞内充满大小不一脂滴,大部分肝细胞呈现脂肪变性;与模型组相比,PD 高剂量组能显著降低小鼠空腹血糖、血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT以及肝脏中的MDA（P<0.05）,并且能够显著升高血清 HDL-C和肝脏miR-214及T-SOD（P<0.05）;PD高、低剂量组小鼠肝细胞脂肪变性与模型组相比均有所减轻。结论PD能降低 AS小鼠血糖、血脂,并保护肝功能,其机制可能主要与PD升高肝脏miR-214水平,调节T-SOD与MDA等氧化应激指标有关。     

虎杖苷对严重烫伤大鼠心肌细胞钙信号调控的作用

目的：观察虎杖苷（polydatin,PD）对烫伤大鼠心功能损害的钙信号调控,并探讨其对烫伤大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：28只成年SD大鼠随机分为4组,即假手术组、烫伤组、PD组及烫伤＋PD组,每组7只大鼠（n=7）。 各实验组使用Power lab系统进行实时心功能监测。手术后5 min通过静脉给予PD（10 mg/kg）,12 h后分离心室肌细胞,通过激光共聚焦显微镜观测PD对烫伤大鼠心室肌细胞钙火花发放频率、钙库水平、钙瞬变的作用。结果：与烫伤组比较,烫伤＋PD组大鼠左室收缩压、左心室内压力上升的最大速率（±dP/dtmax）均显著增加、钙瞬变和心肌收缩力明显增强、使烫伤引起的钙库容量下降基本恢复到正常水平,烫伤引起的高频钙火花发放显著抑制（均P〈0.01）,钙火花时程的增加也明显抑制（P〈0.05）。结论： PD可以显著抑制烫伤引起的心肌细胞肌浆网钙漏流,恢复肌浆网钙库容量水平,增强收缩期钙瞬变和心肌收缩力,从而改善烫伤引起的心功能障碍。     

虎杖苷对缺血缺氧下平滑肌细胞蛋白激酶C的影响

目的　观察虎杖苷对缺血缺氧作用下血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白激酶C(PKC)活性的影响以探讨其抗休克作用的机制。方法　取大鼠胸主动脉培养VSMC,用Koyama方法复制VSMC缺血缺氧模型。用液体闪烁计数仪测定PKC的活性。结果　缺血缺氧状态下VSMC胞浆PKC的活性上升(vs正常组P<0 .05),但胞膜的PKC活性下降(vs正常组P<0 .05),经PD治疗后胞浆PKC的活性下降(vs缺血缺氧组、治疗对照组P<0. 05,vs正常组P>0 05 ),胞膜的PKC活性上升(vs缺血缺氧组、治疗对照组P<0 .05,vs正常组P>0 .05)。结论　PD对缺血缺氧作用下的VSMCPKC的活性有调节作用,这可能是PD抗休克作用的分子机制之一。     

十味盆安颗粒中9种成分的测定及指纹图谱研究

目的建立十味盆安颗粒中9种成分(没食子酸、丹参素钠、绿原酸、芍药苷、虎杖苷、苯甲酸、丹酚酸B、大黄素、大黄素甲醚)的定量测定及指纹图谱研究方法,为十味盆安颗粒的质量控制提供依据。方法采用HPLC法,色谱柱为Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱:0~16 min,5%~14%乙腈;16~20 min,14%~17%乙腈,20~35 min,17%~19%乙腈;35~60 min,19%~35%乙腈;60~62 min,35%~75%乙腈;62~78 min,75%乙腈;体积流量1.0 m L/min;检测波长230 nm(定量测定与指纹图谱用)。结果没食子酸、丹参素钠、绿原酸、芍药苷、虎杖苷、苯甲酸、丹酚酸B、大黄素、大黄素甲醚9种成分均达到基线分离,在线性范围内线性关系良好,r均0.999 9,加样回收率分别为100.15%(RSD为1.39%)、99.89%(RSD为1.71%)、99.92%(RSD为0.67%)、99.28%(RSD为0.60%)、99.89%(RSD为0.80%)、99.72%(RSD为1.83%)、99.91%(RSD为0.79%)、100.06%(RSD为0.94%)、99.97%(RSD为1.36%);利用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对15批十味盆安颗粒指纹图谱进行分析,15批样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度达0.976以上。结论该方法简便可行、快速准确,可以作为评价十味盆安颗粒质量的有效方法。     

大鼠肠道菌对虎杖苷的生物转化研究

 目的 利用大鼠肠内厌氧细菌对虎杖中主要单体虎杖苷进行生物修饰研究,观察虎杖苷在大鼠体内及体外经肠内菌代谢后的变化并确定代谢物。方法 生物样品经处理后分别进行LC-MS/MS及HPLC检测分析。结果 从虎杖苷的大鼠肠内厌氧细菌培育物中检出2个化合物,即虎杖苷及大鼠肠内厌氧细菌代谢产物白藜芦醇;大鼠ig虎杖苷1 500 mg·kg^-1后提取4 h胃肠道内容物,证明肠道存在虎杖苷和代谢产物白藜芦醇。结论 虎杖苷可被大鼠肠内菌代谢,其代谢模式为虎杖苷→白藜芦醇。
     

虎杖甙对内毒素刺激的单个巨噬细胞内游离钙动态变化的影响

用荧光染料Indo-1标记小鼠腹腔巨噬细胞内游离钙,在粘附式细胞仪检测下观察细胞内游离钙的动态变化，在大肠杆菌O55：B5内毒素刺激下细胞内游离钙迅速升高，于第400s达峰值．经虎杖甙处理的巨噬细胞加入内毒素后，胞质游离钙无明显增高．因细胞浴于无钙环境，故胞内游离钙升高不是由于细胞外的Ca2+进入细胞，而是由于内毒素影响胞内钙库调节功能．虎杖甙可能保护胞内钙库中胞质钙的某种调节机制，从而避免胞质游离钙升高．     

超微粉碎对虎杖膏透皮吸收和流变性的影响

目的研究超微粉碎对虎杖膏透皮吸收和流变性的影响。方法采用普通粉碎和超微粉碎工艺制备虎杖普通粉和虎杖超微粉,再分别制成虎杖膏和超微虎杖膏;以离体小鼠皮肤为屏障,采用改良Franz扩散池法进行透皮吸收实验,以虎杖苷、白藜芦醇、大黄素为考察指标比较虎杖膏和超微虎杖膏体外经皮渗透性的差异;以表观黏度、屈服应力为指标,采用旋转流变仪测定,比较虎杖膏和超微虎杖膏流变性的差异。结果虎杖普通粉和超微粉的d_(0.9)分别为(210.011±3.468)、(63.496±2.570)μm,径距分别为5.412±0.055、2.913±0.117。虎杖膏中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的累积透过量分别为(2.100 3±0.154 5)、(2.114 5±0.341 6)、(6.210 4±0.750 0)μg/cm~2,透皮速率分别为(0.175 3±0.022 6)、(0.234 0±0.020 2)、(0.337 4±0.051 6)μg/(cm~2·h);超微虎杖膏中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的累积透过量分别为(14.247 9±4.875 0)、(4.399 3±0.628 7)、(6.768 6±0.728 6)μg/cm~2,分别比虎杖膏提高6.8、2.1、1.1倍,透皮速率分别为(0.815 9±0.277 1)、(0.313 2±0.043 0)、(0.393 7±0.042 6)μg/(cm~2·h),分别比虎杖膏提高4.7、1.3、1.2倍。虎杖膏和超微虎杖膏的表观黏度分别为34.940、8.865 Pa·s,屈服应力分别为41.211、7.381 Pa。结论超微虎杖膏与虎杖膏相比透皮吸收效果更优,且膏体细腻,黏稠度和屈服应力更小,涂展性更好。     

Targeting mast cells: a new way to treat endometriosis

Introduction: Endometriosis is a chronic estrogen-dependent inflammatory disease of unclear etiology that affects 15–20% of women of reproductive age. Efforts are now focusing on understanding new mechanisms involved in its physiopathology, like novel target pathways and different molecules. There is evidence that mast cells (MCs) play a role in this disease. This article summarizes recent achievements in preclinical studies and clinical activities investigating the role of MCs in endometriosis. Targeting MCs might offer new alternatives to treat this disease.

Areas covered: A systematic literature search was performed (PubMed, Cochrane Library and ClinicalTrials.gov) using the keywords ‘endometriosis and mast cells’. All relevant articles (34) found in PubMed were examined and their reference lists reviewed in order to pinpoint further studies for potential inclusion.

Expert opinion: Since endometriosis is a multifactorial disease, and considering that numbers of MCs and activated MCs were clearly increased in endometriotic lesions in both animals and humans, use of MC stabilizers and inhibitors may prove to be effective to treat endometriosis and its associated pain. However, more data from preclinical studies and clinical trials will help to better define the status of MCs in the treatment of this pathology.     

虎杖苷通过Hippo/YAP通路影响甲状腺癌8505C细胞的恶性生物学行为和顺铂敏感性

目的：探究虎杖苷通过Hippo/Yes相关蛋白（YAP）通路对人甲状腺癌8505C细胞的恶性生物学行为和顺铂（DDP）敏感性的影响。方法：体外培养8505C细胞,构建其DDP耐药细胞8505C/DDP,用CCK-8法检测0、25、50、75、100 nmol/L虎杖苷处理8505C和8505C/DDP细胞的增殖能力,以筛选虎杖苷的最佳作用浓度。将8505C细胞分为对照组、虎杖苷组、空载组、虎杖苷+YAP1过表达组;将8505C/DDP细胞分为对照组、DDP组、DDP+虎杖苷组、DDP+空载组、DDP+虎杖苷+YAP1过表达组。WB法检测各组8505C细胞中Hippo/YAP通路[YAP1、转录辅激活因子（TAZ）]和EMT(E-cadherin、N-cadherin)相关蛋白,8505C/DDP细胞中YAP1、TAZ、耐药相关蛋白[P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白1(MRP1)]、凋亡相关蛋白（C-caspase-3、BAX、Bcl-2）的表达。Transwell小室和细胞划痕实验分别检测各组8505C、8505C/DDP细胞的侵袭、迁移能力。结果：虎杖苷可显著抑制8505C细...