高链孢霉属真菌YD-01菌丝体中化学成分的研究

通过对交链孢霉属真菌(Alternaria sp.)YD-01菌丝体的丙酮提取物进行化学成分研究，从中分离得到3个化合物，经波谱数据分析，鉴定其结构为2,3-二羟基喹啉-4-O-β-D-葡萄糖苷(1)、 3-甲基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮(2)和柚皮素(3)，其中化合物1为新化合物。     

虫草菌丝提取物对DMN诱导肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞通透性影响

目的：研究二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型肝窦内皮细胞(SECs)通透性变化模式,以及虫草菌丝提取物(CME)对SECs通透性的影响,以阐明其抗肝纤维化的作用机制。方法：采用DMN 10μg·kg~(-1)腹腔注射,每周3次,连续4wk的方法制作大鼠肝纤维化模型。按10mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量给予CME干预和治疗模型大鼠,qd,连续2wk和4wk。透射电镜观察肝组织超微结构。免疫组织化学染色法观察肝窦壁CD31和小窝蛋白1(Car-1)表达。结果：正常肝窦壁SECs有许多窗孔,CD31和Cav-1呈现弱阳性染色。给予DMN刺激后,模型组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量逐渐减少,CD31和Cav-1阳性染色细胞逐渐增多,至4wk末时到达峰值；停止DMN刺激后,模型对照组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量逐渐增多,CD31和Car-1阳性染色细胞逐渐减少。经2wk和4wk处理后,与模型组和模型对照组比较,CME预防组和治疗组大鼠肝窦壁SECs窗孔数量显著增多,CD31和Cav-1阳性染色细胞逐渐显著减少。结论：在DMN诱导大鼠肝纤维化形成过程中,SECs表型发生变化,其通透性模式由以窗孔运送为主转变为以小窝运送为主,使通透性减少。CME能够改善SECs通透性,这可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

冬虫夏草菌丝治疗慢性乙型病毒性肝炎的近期疗效观察

用冬虫夏草菌丝治疗33例慢性乙型病毒性肝炎(含肝硬化)。结果表明冬虫夏草能改善肝脏功能,对HBsAg转阴有一定作用,并有显著提高患者血浆白蛋白,抑制γ-球蛋白,调整机体免疫功能的作用。提示冬虫夏草菌丝可作为慢性肝炎患者调整蛋白代谢,纠正白,球蛋白倒置的有效药物之     

虫草菌丝提取物对二甲基亚硝胺大鼠肝窦内皮细胞损伤和表型改变的影响

目的 探讨虫草菌丝提取物(CME)对二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞(SECs)损伤和表型改变的影响.方法 采用DMN复制大鼠肝纤维化模型,分别于3 d、2周、4周作为观察时相点;透射电镜观察肝组织超微结构,免疫组织化学法观察肝窦壁CD44、Ⅷ因子相关抗原(vWF);放射免疫法测定血清透明质酸(HA)含量.造模同时给予CME 0.74 g/kg灌胃,每日1次,共4周.结果 DMN造模后第3天,CD44染色减弱、vWF阳性染色明显增强,SECs窗孔减少,血清HA含量显著升高(P<0.05),4周时可见SECs失窗孔和SECs下基底膜形成;CME早期(3 d)能够使SECs失窗孔减轻;CME灌胃2周、4周后,大鼠血清HA水平下降(P<0.05),肝窦壁CIM4表达增强、vWF阳性染色减弱(P<0.05),SECs失窗孔和SECs下基底膜形成减轻.结论 CME能够减轻DMN大鼠肝窦内皮细胞损伤和表型改变,抑制肝窦毛细血管化形成.     

药用真菌有柄树舌菌丝培养特性的研究

目的:考察有柄树舌菌丝适宜的培养条件,为其人工栽培、液体发酵生产提供依据。方法:通过有柄树舌菌丝固体培养生长速度和液体培养生物量的测定,对不同温度、光照、初始pH、碳源、氮源和碳氮比条件下有柄树舌菌丝生长进行了研究。结果:有柄树舌菌丝生长的最佳培养条件是:温度25℃,避光,初始pH5.5,碳源为蔗糖,氮源为酵母膏,适合的碳氮比范围40∶3～100∶3(最适为60∶3)。结论:实验获得的数据将为药用真菌有柄树舌的人工栽培和液体发酵提供参考。     

黑曲霉菌丝体抗菌活性及石油醚部分化学成分

目的:对黑曲霉Aspergillus niger xj抗菌活性及化学成分进行研究以筛选天然抗菌药物。方法:采用滤纸片扩散法对黑曲霉菌丝体石油醚、醋酸乙酯和水提取物进行抗菌活性测定,并对石油醚部位活性部位进行硅胶柱色谱,甲酯化,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其化学成分进行分析。结果:菌丝体石油醚部分具有一定抗菌活性,从中鉴定出10个化合物。结论:黑曲霉菌丝体的石油醚部分存在抗菌活性物质,其化学成分以脂肪酸占较大比例。     

乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠诱发记忆 再现障碍的作用机制

目的:研究乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠记忆再现障碍的作用及其可能的机制.方法:将SD大鼠随机分为4组:戊四唑点燃模型组(模型对照组),低剂量乌灵菌粉(0.3g· kg-1,ig)组,高剂量乌灵菌粉(0.6g· kg-1,ig)组和空白对照组.大鼠在放射状八臂(四臂放食物)迷宫训练成功后,隔日腹腔注射亚惊厥剂量(35 mg· kg-1)的戊四唑共12次.乌灵菌粉在每次注射戊四唑前0.5h灌胃.完全点燃后在同一迷宫中测记忆的再现过程.应用Western免疫印记法测定磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CERB)的水平,脑病理切片采用HE染色,在光学显微镜下计数海马完整神经元.结果:慢性癫痫大鼠在八臂迷宫中的参考记忆和工作记忆再现能力均受损,乌灵菌粉表现出改善作用.慢性癫痫导致大鼠海马p-CREB表达下降,海马CA1区和CA3区神经元破坏,乌灵菌粉逆转了海马的p-CERB表达水平的下降,保护了海马的神经元.结论:乌灵菌粉能改善癫痫诱发的记忆再现障碍,其作用可能与提高脑内p-CERB的表达及对海马神经元的保护有关.     

虫草菌丝对慢性肾功能衰竭大鼠微炎症反应的影响

目的考察慢性肾功能衰竭(CRF)模型大鼠肾脏组织NF-κB-p65与血清C反应蛋白(CRP)和白细胞介素6(IL-6)浓度的关系,并探讨虫草菌丝对NF-κB表达的抑制作用及其用于治疗微炎症反应的可能性。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)阳性对照组、虫草菌丝3和6g·kg-1治疗组。建模前1d各组大鼠尾静脉抽血,并留取24h尿液,第2天假手术组行假手术,其余4组切除右肾上、下两极约70%肾脏;10d后假手术组再次进行"假手术",其余4组再经左腹壁切除左肾,制备5/6肾切除CRF大鼠模型。建模2周后,PDTC组隔日ip给予PDTC0.01g·kg-1,虫草菌丝治疗组分别ig给予虫草菌丝3和6g·kg-1,每天1次,共12周;假手术组和模型组ig给予等体积生理盐水;给药12周后各组留取血样和24h尿液,处死大鼠取肾。ELISA法检测血清CRP和IL-6浓度,全自动生化仪检测血清肌酐浓度,考马斯亮蓝法测定24h尿蛋白,实时荧光定量RT-PCR法和免疫组织化学法检测肾组织NF-κB-p65mRNA和蛋白表达。结果①建模前,各组大鼠24h尿蛋白和血清肌酐浓度无明显差异;建模14周后,模型组、PDTC组、虫草菌丝3和6g·kg-1组24h尿蛋白和血清肌酐浓度较建模前均明显升高(P<0.01),模型组较假手术组亦明显升高(P<0.01);模型组大鼠肾组织均出现肾小球球囊粘连、局灶节段性硬化及肾小管灶状萎缩和代偿性肥大等CRF病理改变;给药12周后,PDTC组、虫草菌丝3和6g·kg-1组大鼠肾组织病理变化与模型组比较无明显改善,虫草菌丝3和6g·kg-1组24h尿蛋白和血清肌酐浓度明显降低(P<0.01)。②给药12周后,模型组与假手术组比较,血清CRP和IL-6浓度及肾组织NF-κB-p65mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),PDTC组、虫草菌丝3和6g·kg-1组与模型组比较均明显降低(P<0.01),虫草菌丝6g·kg-1组比3g·kg-1组降低更为明显(P<0.05)。③各组肾组织NF-κB-p65mRNA表达与血清CRP和IL-6浓度进行直线相关分析结果表明,假手术组肾脏NF-κB-p65mRNA表达与血清CRP和IL-6浓度之间无相关性,其余4组肾组织NF-κB-p65mRNA表达与血清CRP和IL-6浓度明显正相关(P<0.05,P<0.01)。结论 CRF大鼠肾脏NF-κB-p65表达与血清CRP和IL-6浓度正相关;虫草菌丝可抑制CRF大鼠肾脏NF-κB-p65mRNA和蛋白表达,对CRF大鼠微炎症反应具有一定的治疗作用。     

Anti-angiogenic effects and mechanisms of polysaccharides from Antrodia cinnamomea with different molecular weights

Ethnopharmacological relevance

Antrodia cinnamomea is a popular medicinal mushroom in Taiwan that has been widely used for treatment of various cancers and liver diseases.

Aim of the study

This study aimed to investigate the immunomodulatory effect on angiogenesis of polysaccharides from mycelia of Antrodia cinnamomea (PMAC).

Materials and methods

PMAC were extracted in boiling water, precipitated with 95% ethanol, and separated into four different molecular weights (<5, 5–30, 30–100, >100 kDa). Tube formation and chorioallantoic membrane (CAM) assay were used to determine the in vitro and ex vivo anti-angiogenic effects.

Results

Only the PMAC-mononuclear cells (MNCs)-conditioned medium (CM) with MW > 100 kDa significantly and concentration-dependently decreased the secretion of vascular endothelial growth factor in human leukemia cells and inhibited the matrigel tube formation in human umbilical vein endothelial cells. Similarly only the PMAC-MNC-CM with MW > 100 kDa significantly and concentration-dependently increased the levels of interleukin (IL)-12 and interferon-γ (IFN-γ). In addition, the ex vivo CAM assay revealed that only the PMAC with MW > 100 kDa significantly and dose-dependently inhibited neovascularization.

Conclusions

PMAC with MW > 100 kDa are anti-angiogenic in vitro and ex vivo, and the effects are likely through immunomodulation.     

香菇菌多糖联合5%咪喹莫特乳膏预防尖锐湿疣CO_2激光术后复发的疗效观察

目的观察CO2激光去除疣体后,联合应用全身及局部免疫调节剂香菇菌多糖和5%咪喹莫特乳膏预防尖锐湿疣复发的疗效。方法将患者按就诊先后随机分为三组,先用CO2激光去除疣体后:A组给予口服香菇菌多糖片10mg,3次/d;待创面愈合后,同时给予5%咪喹莫特乳膏外用,每周二、四、六晚涂药3次。B组单纯给予5%咪喹莫特乳膏外用。C组单纯给予口服香菇菌多糖片。用法及用量同A组。3组疗程均为8周。观察复发情况及不良反应,12周后进行复发率比较。结果 2周后A,B,C3组的复发率分别为10.42%,30.00%,33.33%。A组复发率明显低于B,C组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论联合应用免疫调节剂香菇菌多糖和5%咪喹莫特乳膏预防尖锐湿疣复发疗效好,复发率低。