竹节参多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的恢复作用研究

目的:研究竹节参多糖(Panax japonicus polysaccharides)对环磷酰胺所致免疫低下模型小鼠免疫功能的调节作用。方法:腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)制备免疫功能低下模型,计算脾脏指数;MTT法检测脾淋巴细胞增殖活性;分光光度法检测血清溶血素的含量;QHS法检测脾脏分泌抗体形成细胞的能力;流式细胞术检测外周血NK细胞百分比。结果:竹节参多糖能提高免疫低下小鼠的脾脏指数;显著促进脾淋巴细胞的增殖;促进血清溶血素的生成及QHS反应;提高外周血NK细胞比例。结论:竹节参多糖具有较好的免疫增强作用,对免疫低下小鼠的免疫系统具有恢复作用。     

麦冬多糖MDG-1对非糖尿病小鼠糖耐量及肠道菌群的影响

目的探讨麦冬多糖MDG-1对正常小鼠的糖耐量作用及肠道菌群的影响。方法 KM小鼠随机分为9组:淀粉组、淀粉+MDG-1组、淀粉+阿卡波糖组,葡萄糖组、葡萄糖+MDG-1组、葡萄糖+阿卡波糖组,蔗糖组、蔗糖+MDG-1组、蔗糖+阿卡波糖组。灌胃给药阿卡波糖400 mg·kg~(-1)·d~(-1),麦冬多糖MDG-1 300 mg·kg~(-1)·d~(-1),单次给药2 h及连续给药2 wk后行口服糖耐量实验。另设空白组、MDG-1低剂量(150 mg·kg~(-1)·d~(-1))组、MDG-1高剂量(300 mg·kg~(-1)·d~(-1))组,连续给药3 wk后,对小鼠肠道菌群进行培养,观察小鼠肠道菌群的变化情况。结果单次给药糖耐量实验结果显示,淀粉+MDG-1组AUC_(0-120min)低于淀粉组(P<0.01)、蔗糖+MDG-1组AUC_(0-120min)低于蔗糖组(P<0.05),葡萄糖负荷各组血糖无显著差异(P>0.05)。连续给药糖耐量实验结果显示,蔗糖+MDG-1组和葡萄糖+MDG-1组糖负荷后AUC_(0-120min)分别低于蔗糖组、葡萄糖组(P<0.05),淀粉负荷各组血糖无显著差异(P>0.05)。MDG-1高剂量组肠道乳酸杆菌和双歧杆菌数高于空白组,差异显著(P<0.05),大肠杆菌和链球菌数量低于空白组,但无显著差异(P>0.05)。结论麦冬多糖MDG-1对非糖尿病小鼠的糖耐量有显著影响,同时对肠道微生态有一定的调节作用。     

竹节参总皂苷对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响

目的探讨竹节参总皂苷对四氯化碳（CCl4）诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法体外实验采用HepG2细胞株建立CCl4诱导肝细胞损伤模型。体内实验采用1%CCl4油剂处理Balb/c小鼠造成急性肝损伤模型,随机分为正常组、模型组、药物组,药物组灌胃20 mL/kg竹节参总皂苷,正常组和模型组灌胃等量无菌生理盐水,连续8 d。MTT法观察肝细胞存活状况,HE染色观察肝组织形态,RT-PCR检测转化生长因子-β（TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和Toll样受体4（TLR4）mRNA表达。结果与正常组比较,模型组存活细胞明显减少（P〈0.01）;与模型组比较,药物组存活细胞明显增多（P〈0.01）。HE染色镜下观察,药物组小鼠肝组织损伤较模型组明显改善。RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组TGF-β、TNF-α和TLR4 mRNA表达水平明显升高;与模型组比较,药物组TGF-β、TLR4、TNF-αmRNA水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论竹节参总皂苷对CCl4诱导小鼠肝损伤具有保护作用。     

利用木霉对麦冬根腐病的生物防治研究

采用稀释平板法从26份中药材根际土样中分离到24个木霉菌株，通过室内筛选获得了对病原菌有较好控制作用的哈茨木霉T23、T158菌株，这两种菌株对引发麦冬根腐病的尖孢镰刀菌的抑制率分别达到84．07％和83．47％，其拮抗作用在于营养和空间竞争、寄生两种形式。制成的哈茨木霉T23制剂能有效控制麦冬根腐病的发生，500g／666．7m^2处理对麦冬根腐病的防治效果达67．52％，显著优于化学农药代森锰锌300g／666．7m^2处理，处理区的麦冬产量比空白对照高24．46％。     

超声提取麦冬总黄酮的工艺研究

目的 优化超声技术提取麦冬总黄酮的工艺条件.方法 采用L9(34)正交试验法,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数对超声提取的影响,以总黄酮含量为考核指标,确定最佳提取条件.结果 最佳提取工艺为加12倍生药量的60%乙醇,超声提取3 次,每次45min.结论 此方法 是一种简单、快捷、高效、可行的提取.     

The sORF-Encoded Peptides,ATP Synthase Subunits,Facilitate WSSV Duplication in Shrimp

Short open reading frames (sORFs) are a newly identified family of genes, and the functions of most sORF genes and their encoded peptides (SEPs) are still unknown. In this study, two ATP synthase subunits were identified in kuruma shrimp (Marsupenaeus japonicus) as SEPs, namely MjATP5I and MjATP5L. They were widely distributed in all of the tested tissues of shrimp and upregulated in hemocytes and intestines in response to WSSV challenge. The injection of recombinant proteins (rMjATP5I and rMjATP5L) increased the expression of Ie1 and Vp28, while the knockdown of MjATP5I and MjATP5L decreased the expression of Ie1 and Vp28. All of the results suggest that MjATP5I and MjATP5L were beneficial for WSSV replication. Further exploration found that MjATP5I and MjATP5L RNAi significantly improved the shrimp survival rates, reduced ATP production, and upregulated the expression of antimicrobial peptide genes post viral challenge, and the two ATPase subunits and Relish negatively regulated each other. These results reveal that MjATP5I and MjATP5L facilitated WSSV duplication by regulating the production of ATP contents and the expression of antimicrobial peptide genes in shrimp.     

高效液相色谱-DAD-化学发光法在线检测麦冬清除超氧阴离子活性

利用高效液相色谱-DAD-化学发光法(HPLC-DAD-CL)在线检测麦冬对超氧阴离子（O2^·-）的清除活性,追踪其抗氧化活性的物质基础。将麦冬水提物分成乙醚和正丁醇两个萃取部位,以化学发光的降低作为检测指标,测定麦冬中主要活性成分对邻苯三酚-鲁米诺-碳酸缓冲液体系产生的O2^·-的清除能力,并利用HPLC-DAD-MS/MS和对照品对其进行结构鉴定。采用槲皮素为阳性对照,通过标准效价方程分别评价了主要活性成分的抗氧化活性。研究结果表明,麦冬中直接清除超氧阴离子作用主要来自乙醚部位中的高异黄酮成分。HPLC-DAD-CL在线联用技术简单、快速,可用于中草药抗氧化活性成分的筛选。     

浙江产麦冬原植物学名的论证

本文针对浙江产麦冬原植物学名存在的两种不同看法,利用经典分类学和主要分类特征定量分析的方法,对收集到的麦冬植物标本进行分析处理,论证了浙江产麦冬的原植物学名仍应为Ophiopogon japonicus(L.f.)Ker-Gawl。同时,观察了浙江、日本产麦冬、“日浙麦冬”的花粉粒、叶表面扫描电镜下特征以及块根根被组织特征,为分类学的结论提供了佐证。     

竹节参皂苷对顺铂耐药肺癌细胞敏感性的影响及机制研究

目的 研究竹节参皂苷对顺铂耐药肺癌细胞敏感性的影响及其潜在作用机制。方法 通过递增顺铂浓度诱导肺癌A549细胞耐药,测定细胞存活率,SRB显色法测定药物敏感性,Annexin V-FITC/PI双染测定细胞凋亡,ELISA测定Caspase 3和Caspase 8水平,Western blotting测定细胞中相关蛋白表达情况。结果 经长期诱导后,A549细胞对顺铂的耐受性增加14.79倍,且较稳定。与顺铂组比较,联合应用竹节参皂苷和顺铂可显著增加A549细胞对顺铂的敏感性,增加细胞内Caspase 3和Caspase 8水平,促进细胞凋亡,同时抑制MDR1、P-gp、Bcl-2和p-Akt等蛋白表达,促进Bax蛋白表达。结论 竹节参皂苷可增加顺铂耐药细胞株对顺铂的敏感性,增强顺铂的作用效果,其作用机制可能与抑制耐药相关蛋白MDR1、P-gp和Akt活性相关。     

竹节参总皂苷通过HES1调节高脂饮食小鼠小肠上皮分泌型细胞数量的研究

目的 探讨竹节参总皂苷对高脂饮食小鼠小肠上皮分泌型细胞数量的调节作用。方法 将40只Balb/c小鼠随机均分为4组,即对照组,高脂模型组和竹节参总皂苷高、低剂量组。对照组小鼠给予普通维持饲料,高脂模型组和竹节参总皂苷高、低剂量组小鼠均给予高脂饲料;另外,竹节参总皂苷高、低剂量组小鼠每天给予45,15 mg·kg^-1的竹节参总皂苷分别进行灌胃处理,高脂模型组和对照组以生理盐水进行灌胃,灌胃频次均为每天1次,每周6 d。各组小鼠均持续喂养7个月后处死,取材并进行HE染色观察各组高脂饮食小鼠回肠组织病理学改变,阿利新蓝染色、过碘酸-Schiff染色后统计小鼠回肠杯状细胞数量,荧光桃红酒石黄染色后统计小鼠潘氏细胞数量,免疫组化法检测小鼠回肠Lysozyme、HES1蛋白的表达。结果 与高脂模型组相比,竹节参总皂苷高剂量组小鼠回肠绒毛长度与隐窝深度比值、黏膜下层厚度显著降低（P < 0.05）,内环肌层厚度显著增加（P < 0.01）,Lysozyme蛋白表达、杯状细胞数量显著增加（P < 0.05或P < 0.001）,HES1蛋白表达显著下调（P < 0.01）。结论 竹节参总皂苷通过抑制高脂饮食小鼠小肠HES1蛋白的表达调节小肠上皮分泌型细胞数量。