An experiment study of osteogenesis of Ad-VEGF165 transfected human bone marrow mesenchymal stem cells in vitro

Objective:To evaluate the effect of osteogenic potential on human marrow mesenchymal stem cells (hMSCs) transferred with human vascular endothelial growth factor(VEGF) gene by adenovirus. Methods :hMSCs were isolated from human marrow, cultured in vitro and randomly divided into 3 groups:Ad-VEGF165 group: adding 1×1010OPU/ml Ad-VEGF in hMSCs culture fluid after incubating 24 hours, changing into ordinary complete culture and continuing culturing; Positive control group: Cultured hMSCs with 1 nmol/L dexamethasone, 10 mmol/L glycerophosphate and 50 mg/L vitamin C,exchanging this conditioned medium twice a week; blank control group :no special treatment but culturing hMSCs in DMEM.To evaluate osteogenesis competence, Von Kossa's staining and a quantitative alkaline phosphates (ALP) activity analysis were performed after 2 weeks treatment. Results :The calcified nodes formed after 2 weeks treatment in Ad-VEGF165 group and Positive control group but not in blank control group. ALP activities in Ad-VEGF165 group,Positive control group and blank control group were (7.91 ± 0.90)u/L, (8.18 ± 0.76 u/L) and (3.46 ± 0.49)u/L respectively. The differences were no statistical significance between Ad-VEGF165 group and positive control group (P ＞ 0.05), but Ad-VEGF165 group and Positive control group were significantly different with blank control group (P ＜ 0.05). Conclusion:Adenovirus mediated VEGF165 gene can transfect hMSCs and promote osteogenesis of hMSCs.     

The clinicopathological and immuohistochemical analysis of solid-pseudopapillary tumor of the pancreas： report of 9 cases

Objective：To investigate the clinical features, pathological characteristics and immunophenotype of solid-pseudopapillary tumor of the pancreas（SPTP）. Methods：Nine surgically treated cases of SPTP were retrospectively reviewed. Hematoxylin and Eosin（HE） staining and immunohistochemical staining were used to analyze all cases, and the general clinical data was collected. Results：Six patients were asymptomatic except for a palpable mass. Two patients complained of vague-epigastric pain. One patient appeared jaundice. The tumor was encapsulated and solid tissues alternately with cystic tissues. Histologically, the histological structure of solid portion was pseudopapillary with a fibrovascular core. Tumor cells were uniform and medium-sized which were arranged in sheets ets or nests or pseudopapillary patterns. Immunohistochemical studies demonstrated that SPTP proved positive in vimentin（9/9 cases）, AAT（9/9 cases）, NSE（9/9 cases）, ACT（7/9 cases）, CK20（2/9 cases）, CgA（1/9 cases）, S-100（3/gcases）, PR（4/gcases）, Syn（3/9 cases） and CD56（5/9cases）, negative in CEA and ER. Conclusion：SPTP is a tumor predominantly occurring in young women frequently without special symptoms. This tumor has various characteristical histological patterns with different immunophenotype.     

婺城区城乡居民1986—1988年、2004—2005年死亡模式变化趋势研究

目的：比较金华市婺城区城乡居民1986—1988年和2004—2005年全死因模式。方法：按照《全国第三次死因回顾抽样调查实施方案》要求进行回顾性调查。结果：居民死亡率下降了2．06‰；居民期望寿命男性提高了4．38岁，女性提高了5．64岁；前5位死因顺位变化依次为恶性肿瘤（原第二位）、呼吸系统疾病（原首位）、脑血管病（原第四位）、心脏病（原第五位）和损伤中毒（原第三位）；传染病和寄生虫病死亡率下降了59．88％；慢性非传染性疾病死亡构成由63．4％上升到83．0％。结论：两个时期对比居民总体健康水平提高明显；前5位死因死亡率上升迅速；传染病寄生虫病死亡率有所下降；慢性非传染性疾病死亡比例上升。     

卒中单元加虫类中药治疗脑梗死临床研究

目的观察卒中单元加虫类中药治疗急性脑梗死的临床疗效。方法将200例急性脑梗死住院患者随机分为2组,治疗组100例采取卒中单元模式加中医辨证用药加虫类中药治疗,对照组100例采用卒中单元模式加中医辨证用药治疗。治疗前后分别测定2组患者神经功能缺损程度及病残程度,对所有患者进行评分,疗程为3周,疗程结束后分析患者治疗前后评分情况,进行疗效判定。结果治疗组基本治愈率、显效率及总有效率分别为47%、32%、93%,对照组则分别为33%、26%及76%,2组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论卒中单元模式加中医辨证用药加虫类中药治疗急性脑梗死疗效确切,且安全可靠。     

基因芯片对骨肉瘤发病相关基因的筛查

目的:筛查骨肉瘤发病相关的基因,探讨其对于骨肉瘤发病的意义。方法:采用3个骨肉瘤细胞株(MG-63、Saos-2、U-2OS)及1个成骨细胞株(Hfobl.19),提取总RNA,合成生物素标记的cRNA,与Affymetrix~(?)GeneChip~(?)U133A芯片杂交,筛查骨肉瘤细胞差异表达≥2.0倍的基因。挑选其中10个差异表达基因,分别设计合成引物,用嵌合荧光(SYBR~(?) GreenⅠ)实时PCR法定量检测9例新鲜骨肉瘤标本中该10个基因的表达水平,应用ABI Prism 7 000分析其与成骨细胞株之间的表达差异。结果:在芯片包含的所有基因(约22 000个转录本)中,3个骨肉瘤细胞株与成骨细胞株相比较,共同上调58个基因,共同下调142个基因;这些差异表达基因主要包括能量和物质代谢基因、癌基因、信号转导基因、转录相关基因、细胞周期基因、细胞凋亡基因、免疫反应基因、抑癌基因等。在200个差异表达基因中挑选10个差异表达基因,利用实时RT- PCR检测9例骨肉瘤组织标本中该10种基因的表达结果与芯片结果完全相符。结论:骨肉瘤是一种多基因病变,应用基因芯片可以发现该肿瘤发病相关的基因,为深入探讨骨肉瘤的基因机制奠定基础。     

志贺菌敏感株与诱导耐多药株蛋白质组学分析

目的对志贺菌敏感株与诱导耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组学比较，寻找细菌耐多药相关蛋白。方法采用4类抗生素的次抑菌浓度，对临床分离鉴定的志贺菌敏感株进行诱导耐多药试验；对志贺菌敏感株及诱导耐多药株全菌蛋白进行双向电泳；电泳图谱采用ImageMaster2DPlatinum软件分析；差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MOLDITOF-TOF质谱）分析。结果成功获得志贺菌诱导耐多药株，在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分别检测出（946±37）个和（1096±189）个蛋白质斑点；共发现48个差异表达的蛋白点，其中5个质谱鉴定为ABC转运蛋白、谷胺酰转肽酶、天冬氨酸氨甲酰基转移酶、翻译延长因子Tu、单链DNA结合蛋白；其中前3个蛋白中在耐多药株中表达量增强，后2个减弱。结论5个耐多药相关蛋白中在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调；ABC转运蛋白在志贺菌诱导耐多药机制中起重要作用。     

咪达唑仑在2类机械通气患者镇静中的应用

目的　研究咪达唑仑对 2类不同病因导致呼吸衰竭的患者在接受机械通气时的镇静治疗。方法　将接受机械通气、躁动不安的患者作为治疗对象。慢性阻塞性肺病、呼吸衰竭的患者为Ⅰ组 ,急性呼吸窘迫综合征患者为Ⅱ组。分别予以不同剂量的咪达唑仑镇静 ,记录其维持剂量、维持时间以及不良反应的发生。结果　 2组患者均获得满意的镇静效果。Ⅰ组咪达唑仑维持剂量 (0 .0 5± 0 .0 6 )mg/ (kg·h) ,维持时间 (8.2 0± 6 .5 6 )h ,不良反应主要为呼吸抑制及反应下降。Ⅱ组咪达唑仑维持剂量 (0 .12± 0 .32 )mg/ (kg·h) ,维持时间 (72 .15± 6 4 .78)h ,几乎无不良反应。结论　对ICU内不同病因需要机械通气的患者 ,咪达唑仑均可作为理想的镇静剂。但剂量及维持时间在不同病因中存在明显差异 ,需区别对待。     

甘肃道地党参生长动态研究

目的:研究党参的生长变化动态及其在不同栽培条件下的干物质消长规律,确定科学合理的田间管理。方法:采用2因素4水平随机区组法进行试验。结果与结论:掌握了党参各生长发育阶段干物质的消长变化规律,不同生长发育时期开始和结束的时间及其生物学特性的变化过程;在栽植密度和施肥量2因素效应下,对茎叶重的增加最具优势的处理组合为密度105万株/hm²和施肥量240 kg.hm^-2,对单根鲜重增加最具优势的处理组合为密度60万株/hm2和施肥量240 kg.hm^-2。有利于党参的规范化生产、产量的提高和质量的稳定。     

不同产地乌梅的SDS-PAGE的电泳鉴别

目的:对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别.方法:利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析.结果:不同产地乌梅的电泳图谱存在差异,各品种图谱基本相似.结论:电泳鉴别可为中药不同产地药材蛋白质成分鉴别提供一项可靠的简便的检测方法.     

不同产地灰毡毛忍冬藤主要成分的比较研究

目的: 对采自湖南省四个不同产地的灰毡毛忍冬藤的主要成分绿原酸、挥发油含量进行比较,为选育优良品种提供依据. 方法:采用紫外分光光度法测定样品中绿原酸的含量. 按<中国药典>2000年版附录XD挥发油测定乙法测定挥发油含量.结果:隆回产的总挥发油含量最高(0.5%);其次为武岗和邵东产,分别为0.32%和0.2%;最低为祁东产的,含量为0.1%.绿原酸含量也以隆回产为最高(2.66%);其次为祁东和邵东产的,分别为2.35%和2.31%;最低为武岗产的,为2.07%.结论:灰毡毛忍冬藤主要成分的含量与产地有着一定关系,不同产地含量不尽相同,育种时应择优考虑.