抑制PARP1活性对博来霉素诱导的肺纤维化的改善作用

目的:探讨抑制聚ADP核糖多聚酶1(PARP1)活性对于博莱霉素导致的肺纤维化的改善作用,阐明抑制PARP1活化改善肺纤维化的作用机制。方法:48只雌性ICR小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)和5、10、15 mg·kg^-1博莱霉素组(模型组)。3个模型组分别在第1、4、8、11、15、18、22和25天腹腔注射相应浓度的博莱霉素。60只雌性ICR小鼠随机分成对照组、10 mg·kg^-1博莱霉素模型组及不同剂量PARP1抑制剂PJ34治疗组(腹腔注射博来霉素20min前尾静脉注射1、5和10 mg·kg^-1 PJ34)。上述实验中,分别于第14、21和28天每组选取3只小鼠,处死后取肺。HE染色观察肺泡结构,Masson染色分析纤维化程度。肺上皮源性细胞A549用于博莱霉素刺激后,Real-time PCR法分析PJ34对上皮间充质转化(EMT)标志基因表达的影响。结果:与博莱霉素模型组比较,PJ34治疗组小鼠肺泡结构的破坏及胶原在肺间质中的沉积明显减轻;Real-time PCR法分析,与博莱霉素模型组比较,PJ34治疗组肺上皮细胞A549中E-cadherinmRNA表达水平升高(P<0.05),α-SMA和TGF-βmRNA表达水平下降(P<0.05或P<0.01)。结论:抑制PARP1活性可以影响EMT标志基因的表达及肺纤维化的产生,PARP1抑制剂可用于预防博来霉素治疗肿瘤过程中产生的肺纤维化。     

阿奇霉素脂质体对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响

目的研究阿奇霉素脂质体对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的保护作用。方法 SD大鼠72只,随机分为空白对照组(n=6)、模型组(n=18)、溶液组(n=24)和脂质体组(n=24),后3组一次性向大鼠气管内注入博来霉素5 mg.kg-1制成肺间质纤维化模型,分别每日尾静脉注射给予生理盐水、阿奇霉素溶液(2.50 g.L-1)和阿奇霉素脂质体(2.61 g.L-1),连续28 d,各组分别于d 7、d 14、d 28和停药后d 28(d 56)处死。各组动物处死后测量肺重系数,测定肺组织匀浆内丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HP)含量,提取肺组织进行HE、Masson染色并进行病理半定量分析。结果博来霉素诱导大鼠肺重系数增加,MDA和HP含量增高、肺泡炎和肺纤维化显著,与空白对照组相比有非常显著差异(P<0.01)。d 7、d 14、d 28溶液组和脂质体组与同时点模型组相比肺重系数、MDA和HP含量均显著降低(P<0.05),脂质体组肺泡炎程度于不同时点均减轻(P<0.05)。脂质体组d 56与d 28相比无明显反弹(P>0.05),而溶液组出现反弹(P<0.05)。结论阿奇霉素脂质体能够有效地治疗病变过程中的肺泡炎,对纤维化有明显的防治作用,停药后能持续有效地发挥作用。     

Mechanism of Reduction of Bleomycin-Cu(II) by CO−2 and Oxidation of Bleomycin—Cu(I) by H2O2 in the Absence and Presence of DNA

Summary

The reduction reaction of bleomycin—Cu(II) by CO^?₂ has been studied by γ and pulse radiolysis at pH7. The CO^?₂ radical reduces bleomycin—Cu(II) at a rate of (6·7 ± 0·7) × 10⁸ dm³ mol^?1 s^?1. In the presence of calf thymus DNA the rate of the reduction decreased as the concentration of DNA increased, indicating that the reduction reaction proceeds through free bleomycin—Cu(II). The stoichiometry and the kinetics of the oxidation of bleomycin—Cu(I) by H₂O₂ in the presence and absence of DNA have been studied. Our observations suggest that the OH^· radical is not produced during this reaction and the degradation of the drug occurs in the absence and presence of DNA. We assume that bleomycin—Cu(II) in the presence of a reducing agent and molecular oxygen or H₂O₂ does not cleave DNA since the oxidizing species, which are formed during the oxidation reaction by H₂O₂, attack the drug even in the presence of DNA.     

Sensitivities of bleomycin-resistant variant cells enhanced by 40°C hyperthermia in vitro

Cultured mammalian cells of higher (mouse L) and lower (Chinese hamster V-79) sensitivities to bleomycin (BLM) were repeatedly treated with BLM (0.1 mg/ml), through which BLM-resistant variant strains were induced. Sensitivities of these variant strains to BLM were enhanced by simultaneous treatment with 40°C hyperthermia.     

局部注射平阳霉素和确炎舒松A治疗小儿皮肤血管瘤的比较研究

目的 :　探讨和比较平阳霉素和确炎舒松A治疗小儿皮肤血管瘤的疗效。方法 :　 2 80例皮肤血管瘤患儿随机分为平阳霉素治疗组 (10 4例 )和确炎舒松A治疗组 (176例 ) ,平阳霉素组采用平阳霉素瘤体内注射 ,浓度为 2～ 3.2mg ml ;确炎舒松A组采用确炎舒松A瘤体内注射 ,浓度为 8mg ml。每 2周重复注射一次 ,总疗程 3～ 10次。结果 :　平阳霉素组 10 4例患儿中 ,治愈 89例 (治愈率 85 .6 % )和有效 15例 (14 .4 % ) ,确炎舒松A组 176例血管瘤患儿中 ,治愈 86例 (4 8.9% )和有效 75例 (4 2 .6 % )。两组比较差异有统计学意义 (P <0 .0 0 1)。结论 :　平阳霉素瘤体内注射治疗小儿皮肤血管瘤安全有效 ,其疗效优于确炎舒松A。     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的影响

目的:观察补肾通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads通路蛋白的影响,揭示该方抑制肺纤维化的作用机制。方法:48只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组8只,模型组、补肾通络低、高剂量组、氢化可的松琥珀酸钠组各10只。除正常组外,各组均采用博莱霉素法诱导肺纤维化制备模型。从术后第3天开始,补肾通络高、低剂量组分别给予14. 2,7. 1 g·kg~(-1)补肾通络方药灌胃,氢化可的松琥珀酸钠组给予4. 58 g·kg-1氢化可的松琥珀酸钠溶液腹腔注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,共治疗28 d。大鼠处死后测定血清羟脯氨酸(HYP),透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN)的含量,取肺组织,采用苏木精-伊红染色法(HE)及马松(Masson)三色染色法观察肺组织病理形态变化,采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3,Smad7等mRNA和蛋白表达变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP,HA,LN含量升高(P 0. 05,P 0. 01),肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达升高(P 0. 05,P 0. 01),Smad7蛋白和mRNA表达降低(P 0. 01);与模型组相比,补肾通络高剂量组血清HYP,HA,LN的含量下降(P 0. 05,P 0. 01)肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达降低(P 0. 05),Smad7蛋白和mRNA表达升高(P 0. 01)。结论:补肾通络方可有效改善肺纤维化的病变进程,其机制可能与调节TGF-β_1/Smads通路有关。     

复方苦参注射液抗博来霉素致大鼠肺纤维化药效学研究

目的 探讨复方苦参注射液对博来霉素诱导肺纤维化模型大鼠的影响及相关机制。方法 将120只SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及复方苦参注射液低、中、高剂量（注射液原液1、2、4 mL·kg^-1）组,每组20只,采用气管内注射博来霉素方法制备肺纤维化大鼠模型,造模24 h后给药组ip复方苦参注射液,第14、28天取材。观察大鼠一般状态、肺系数、肺功能、肺组织病理变化,并采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,进一步检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）表达量的变化。结果 大鼠的一般情况观察发现,与假手术组比较,模型组大鼠食量及饮水量均有所下降,精神萎靡,毛色暗淡发黄,同时模型组大鼠出现拱背及口唇、爪甲及尾尖均呈现紫黯现象,部分大鼠出现口鼻出血,呼吸困难现象。给予复方苦参注射液后,肺纤维化模型大鼠的活动和精神状态均有改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠体质量明显降低（P<0.01、0.001）,肺系数显著增加（P<0.001）,肺功能指标潮气量下降（P<0.001）,气道阻力升高（P<0.001）,动态肺顺应性降低（P<0.001）,肺组织发生纤维化、炎细胞浸润等明显损伤,血清中TNF-α和IL-1β水平显著升高（P<0.001）,肺组织中HYP水平显著升高（P<0.001）,而SOD活性则显著下降（P<0.001）,MDA水平有增加趋势。与模型组比较,复方苦参注射液低、中剂量组大鼠体质量显著增加（P<0.05、0.001）,大鼠肺系数显著降低（P<0.05、0.001）,潮气量显著上调（P<0.001）,气道阻力显著降低（P<0.01、0.001）,动态肺顺应性显著上调（P<0.01、0.001）,大鼠肺组织纤维化程度明显减轻,血清中TNF-α水平降低（P<0.01、0.001）,肺组织中HYP含量显著降低（P<0.01）,SOD活性则显著升高（P<0.05、0.01、0.001）,MDA有下调趋势,但差异不显著。结论 复方苦参注射液可改善肺纤维化模型大鼠肺功能与肺部形态学病变,降低血清中TNF-α水平,以及下调肺组织中HYP含量与提高SOD活性,减轻炎性反应并增加抗氧化能力,对肺纤维化大鼠产生保护作用。