滋阴益肾汤对原发性IgA肾病的疗效观察及机制研究

目的:分析滋阴益肾汤辨治原发性IgA肾病的疗效及相关机制。方法:选取2015年2月至2017年1月日照市中医医院收治的原发性IgA肾病患者112例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组56例。对照组予常规西药治疗,观察组在此基础上加用滋阴益肾汤加减辨证治疗。2组患者均连续治疗3个月。比较2组患者γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-β(TNF-β)和Th2分子[白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-6、IL-10]漂移情况,24 h尿蛋白定量、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血清IgA水平变化、临床疗效以及不良反应情况。结果:与对照组比较,滋阴益肾汤可明显提高原发性IgA肾病临床有效率,升高外周血IFN-γ、TNF-β、IL-2水平,降低IL-4、IL-5、IL-6、IL-10表达及24 h尿蛋白定量、Scr、BUN、血清IgA水平,且2组患者不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:滋阴益肾汤辅助西药治疗IgA肾病,可促进漂移外周血Th1/Th2系统归于平衡,从而平衡机体促炎抗炎系统,提高临床疗效,不增加患者不良反应,具有较高的临床价值。     

温肾化痰方对早中期脾肾阳虚型慢性肾功能不全患者肾功能及血脂的影响

目的通过观察温肾化痰方治疗早中期脾肾阳虚型慢性肾功能不全(chronic renal insufficiency,CRI)患者的临床疗效,探讨从痰浊论治本病的临床有效性。方法选择90例早中期脾肾阳虚型CRI的患者,按2:1随机分为治疗组60例和对照组30例。两组患者在接受一般处理及对症治疗的同时,治疗组加用温肾化痰方治疗,疗程6个月。观察两组治疗6个月后的总有效率、中医证候积分、肾功能[血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)]、内生肌酐清除率(CCr)、血清胱抑素-C(Cys-C)、血脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]变化及不良反应。结果治疗组治疗6个月后的总有效率为70.0%(42/60),明显优于对照组43.3%(13/30,P<0.05),治疗组中医证候积分下降明显,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组在降低SCr、BUN、Cys-C及LDL-C,升高CCr方面均优于对照组(P<0.05)。结论温肾化痰方可延缓慢性肾功能衰竭的进程,改善脂质代谢,提示从痰论治早中期CRI确有一定的临床疗效。     

大鼠灌服复方丹参方后血清中丹参素的测定

目的 :了解大鼠ig复方丹参方后水溶性成分的吸收情况 ,建立大鼠血清中丹参素的含量测定方法。 方法 :采用液液萃取法对血清样品进行预处理 ,以对羟基苯甲酸为内标 ,甲醇 乙腈-0.5%醋酸 (2.5∶3.5∶94 )为流动相 ,用高效液相色谱法于 281nm检测。结果 :大鼠ig复方丹参方后在血清中检测到丹参素 ,用所建立的方法绘制了其经时血药浓度曲线 ;而原儿茶醛则未在血清中发现 ,检测到的是一个保留时间稍前于原儿茶醛的未知化合物。结论 :大鼠灌服复方丹参方后 ,丹参素可经胃肠道吸收入血 ,呈快吸收慢消除的过程。     

补中益肾方治疗非终末期慢性肾脏病蛋白尿的随机对照研究

目的:通过口服补中益肾方以补脾升清、益肾开阖,从而达到减少蛋白尿的排出、延缓肾脏病进展的效果,更好的保护肾功能.方法:采用随机对照的方法将符合纳入标准的96例非终末期慢性肾脏病患者分成两组,治疗组47例予以补中益肾方+氯沙坦钾片,对照组49例仅予以氯沙坦钾片,1个月后观察两组患者治疗前后各项相关指标,并进行比较分析.结...     

炎症因子及益肾活血泄浊汤对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨部分炎症因子及益肾活血泄浊汤对体外培养大鼠肾小球系膜细胞生长的影响。方法：应用脂多糖（ＬＰＳ）及白细胞介素６（ＩＬ－６）作为刺激因子，观察其促系膜细胞增殖的作用；并采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于一述受刺激的系膜细胞，观察益肾活血泄浊汤对系膜细胞增殖的影响。结果：ＬＰＳ和ＩＬ－６具有明显促进系膜细胞增殖作用。结论：系膜细胞是益肾活泄浊汤发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防     

生脉成骨方对股骨头坏死I型胶原表达的调节作用研究

目的　研究生脉成骨方对股骨头坏死Ⅰ型胶原mRNA表达的影响以揭示其作用机制。方法　以内毒素加甲基强的松注射制备兔骨坏死模型 ,分为模型组及生脉成骨方组 ,分批于用药后 4,8,12周处死 ,于原位杂交法测定骨Ⅰ型胶原表达 ,进行病理学检查 ,并与正常对照组比较。结果　模型组各时段成骨细胞及骨髓基质细胞内的Ⅰ型胶原mRNA的阳性表达减少 ;中药组 4周时mRNA的表达信号强度和量稍弱于正常组而稍高于模型组 ,8周和 12周时其信号强度和量以及阳性表达的骨髓基质细胞分布进一步改善 ,接近于正常组。结论　生脉成骨方在股骨头坏死的治疗中能促进成骨细胞功能活跃 ,增加骨髓基质细胞向前成骨细胞的分化 ,促进Ⅰ型胶原的合成     

从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α致肝细胞凋亡的保护作用

目的:从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-氨基半乳糖(D-GaIN)所致肝细胞凋亡的保护作用.方法:体外培养人正常肝L02细胞,用TNF-α(100 μg·L-1)和D-GaIN(44 mg·L-1)诱导肝细胞损伤模型,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用细胞增殖实验(MTT)法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染色法结合高内涵细胞成像系统检测肝细胞凋亡;罗丹明123(Rh123)染色结合高内涵分析系统检测线粒体跨膜电位;Western-blot检测线粒体途径凋亡标志蛋白凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)、细胞凋亡诱导因子(AIF)、胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9)表达水平的变化.结果:与正常对照组相比,TNF-α和D-GalN可明显抑制L02肝细胞增殖,诱导细胞凋亡,使细胞线粒体跨膜电位明显下降,并使促凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达显著增加.不同浓度的凉血化瘀方作用后,与TNF-α/GalN损伤组相比,可显著减轻L02肝细胞的增殖抑制、减少细胞凋亡,抑制细胞线粒体跨膜电位的下降,并促使凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达量呈逐渐下降的趋势.结论:凉血化瘀方对TNF-α和D-GaIN所诱导的肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与稳定线粒体的膜电位和下调促凋亡基因Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达有关.     

扶正化瘀方对实验性急性肝损伤肝细胞凋亡的影响

目的观察扶正化瘀方对内毒素诱导的急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的影响与部分机制。方法雄性BABL／c小鼠30只．随机分为3组，正常组10只，模型组10只，治疗组10只。治疗组小鼠给予扶正化瘀方灌胃，每日2次，连续3d，第4日灌胃后1h开始造模；正常组与模型组给予等量生理盐水灌胃。模型组与治疗组小鼠以内毒素10μg／Kg、D-氨基半乳糖900mg／Kg刑量，腹腔注射，诱导急性肝损伤模型；正常组以等剂量生理盐水腹腔注射作为对照。各组小鼠于造模后6h处死，试剂盒法检测血清ALT、AST活性，肝组织TUNEL染色检测肝细胞凋亡，计算凋亡指数；HE染色观察炎症反应与肝细胞坏死；蛋白免疫印迹法分析肝组织细胞凋亡因子bct-2、bax表达。荧光定量PCR法检测bcl-2和bax的基因表达。结果与正常小鼠相比，模型组小鼠血清ALT、AST活性均明显升高，治疗组小鼠较模型组明显降低。大体病理观察，模型组小鼠肝脏明显肿胀、色泽紫黯、表面见散在点状及片状出血点；治疗组小鼠肝脏肿胀明显减轻、色泽红润、表面未见出血点或少量点状出血点。TUNEL染色显示，正常组小鼠肝组织无或偶见肝细胞凋亡；模型组小鼠肝组织中见大量凋亡肝细胞弥漫性分布于肝小叶各区，肝细胞凋亡指数明显升高；治疗组小鼠肝细胞凋亡指数明显降低。HE染色显示模型组小鼠肝组织小叶结构紊乱，肝窦明显充血，大量炎性细胞浸润，肝细胞灶性坏死；治疗组小鼠肝窦充血、炎性细胞浸润与肝细胞坏死均明显减轻。与正常小鼠比较，模型组小鼠肝组织凋亡调节因子bcl-2基因与蛋白表达明显减少，而bax基因与蛋白表达显著增加；扶正化瘀方能促进bcl-2基因与蛋白表达增加，减少bax基因与蛋白表达。结论扶正化瘀方可抑制LPS诱导急性肝损伤小鼠的肝细胞凋亡，部分机制与调节凋亡因子bcl-2     

HPLC法测定五子益肾酒中补骨脂素和异补骨脂素的含量

目的:建立五子益肾酒中补骨脂素和异补骨脂素的高效液相色谱含量测定方法。方法:采用 Inertsil ODS-3C_(18)色谱柱(150 mm×4.60 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(40:60:0.1);柱温35℃;流速:10 mL·min~(-1);检测波长为246 nm。结果:补骨脂素和异补骨脂素进样量均在0.047～0.233μg范围内线性关系良好,相关系数均为0.9999;平均回收率分别为98.44%和99.70%,RSD 分别为1.2%和2.0%。结论:该方法简便易行,重现性好,测定准确灵敏。     

孙维峰治疗痛风性关节炎经验

孙维峰教授认为痛风性关节炎间歇期及慢性期的病因多为肝肾阴虚,脾失健运,痰湿内生,久则痰瘀互结,留滞经脉、关节、脏腑,强调"肝脾肾虚、痰瘀互结"为痛风的发病根源。孙教授认为痛风性关节炎间歇期及慢性期的治疗原则为"泄浊祛邪、化湿清热、活血化瘀",自拟"泄浊除痹汤"治疗痛风间歇期及慢性期。孙维峰教授特别注重对痛风性关节炎患者生活上的预防调摄。