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水蛭抗凝血活性成分的研究 总被引:9,自引:1,他引:9
目的:研究水蛭的抗凝血成分。方法:以血浆复钙时间为指标,应用Sephadex DEAE A-50阴离子交换树脂色谱、Sephadex G-25和Sephadex LH-20凝胶过滤色谱及反相高压液相色谱技术分离纯化。结果:得到3个抗凝血活性多肽,其中化合物1,2在自然条件下互相转化,它们的相对分子质量分别为7 100和5 531;采用HPLC及SDS-PAGE鉴定了化合物3的纯度,采用MALDI-TOF-MS法测定出其相对分子质量为8 608,并测定了其氨基酸组成。结论:推测化合物3为首次分离得到的抗凝血多肽,命名为蚂蟥多肽(whitmanin)。 相似文献
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水提取法和仿生提取法研究水蛭不同炮制品的体外抗凝活性 总被引:1,自引:0,他引:1
为确定水蛭传统炮制的科学性,分别采用水提取法和仿生提取法提取水蛭清水吊干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的抗凝活性成分,以活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶活性作为活性指标进行抗凝测定,并采用考马斯亮蓝法,测定各炮制品提取物中的蛋白含量以初步解释抗凝活性变化原因。对比发现,采用水提取法时,APTT,PT,TT,抗凝血酶活性4种指标结果均显示,滑石粉烫制或酒浸闷烘后水蛭的抗凝活性降低,活性顺序为清水吊干品酒浸闷烘品滑石粉烫制品,此结果与水蛭不同炮制品水提物蛋白含量顺序一致;而采用仿生提取法时,除滑石粉烫制后APTT缩短外,其他结果均显示炮制使水蛭抗凝活性升高,且活性顺序为酒浸闷烘品滑石粉烫制品清水吊干品。仿生提取法与水提取法相比更符合水蛭口服后在人体内的吸收过程,结果更具科学性。所以,传统的炮制方法不仅可以矫味矫臭,还可增强水蛭的抗凝活性作用。 相似文献
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不同月龄蚂蟥内在品质及最佳采收期研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:比较不同月龄蚂蟥内在品质及生长的差异,为其药材质量控制及最佳采收期的确定提供理论依据.方法:水分、醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、抗凝血酶活性测定都参考20HD5年版<中国药典>;结果:各月龄采集的蚂蟥其品质均符合国家药典标准,其中醇溶性浸出物含量以9月龄蚂蟥最高,6月龄的其次,而且9月龄蚂蟥与4月龄、7月龄、11月龄的蚂蟥有显著性差异(P<0.05);抗凝血酶活性含量以6月龄蚂蟥最高,10月龄其次,而且6月龄与4月龄、5月龄有显著性差异(P<0.05),与其他月龄无显著性差异;6月龄的蚂蟥干重最高,与其他月份采集的有显著性差异(P<0.05).结论:江浙一带人工养殖的蚂蟥最佳采收期为11月份(即6月龄). 相似文献
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[目的] 建立中药材宽体金线蛭的环介导等温扩增(LAMP)检测技术,实现对宽体金线蛭及其常见混伪品的快速检测。[方法] 针对宽体金线蛭线粒体细胞色素氧化酶I(COI)的基因序列设计LAMP引物。在64℃恒温条件下,用设计的LAMP引物组对水蛭进行LAMP扩增。[结果] LAMP反应结束后,宽体金线蛭均扩增出梯状条带,对照组无条带产生。加入0.2 μL荧光染料10 000×SYBR Green Ⅰ后,宽体金线蛭反应液在自然光下呈绿色(阳性),对照组呈橙色(阴性)。将加入了0.2μL 10 000×SYBR Green Ⅰ的扩增产物置于紫外灯下观察,结果宽体金线蛭在紫外光下呈绿色荧光(阳性),对照组无绿色荧光产生(阴性)。[结论] 利用LAMP技术可实现宽体金线蛭及其常见混伪品的快速鉴别,为水蛭中药材的现场鉴别提供技术支撑。 相似文献
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蚂蟥酶解工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的确定蚂蟥的最佳酶解工艺。方法选取活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)3种抗凝活性指标,以外翻肠囊实验筛选蚂蟥酶解物在肠吸收前后最佳活性测定指标。采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合酶(先胃蛋白酶后胰蛋白酶)对蚂蟥进行酶解,以筛选得到的最佳活性指标考察酶的种类、酶底比、酶解时间以及酶解温度对蚂蟥酶解工艺的影响。结果 TT是测定蚂蟥酶解物抗凝活性的最佳指标,采用胰蛋白酶对蚂蟥酶解可获得高活性的酶解产物,最佳的酶解条件为温度73℃,酶底比10%,酶解时间8 h。结论 TT作为抗凝指标进行酶解工艺考察,可反映整个凝血过程,结果更可靠,且该法操作简便,灵敏度高。所优选的酶解工艺简单可行,可为蚂蟥合理提取提供依据。 相似文献
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宽体金线蛭不同炮制品抗炎作用及使用方法的药理研究 总被引:5,自引:0,他引:5
比较了宽体金线蛭3种炮制品,对小鼠急性炎症模型的抗炎作用、免疫吞噬能力。以体内、外抗凝及体内抗栓作用为指标,比较了供试品不同使用方法的活血作用,为全面认识宽体金线蛭的药理作用及合理使用方法,提供了初步实验依据。 相似文献
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目的:建立宽体金线蛭室内网箱湿土养殖新模式,为中药材生产质量管理规范及规模化繁养殖提供参考依据。方法:以野外采捕的具有生殖环带的宽体金线蛭为试验材料,在室内采用网箱湿土法养殖,进行宽体金线蛭产茧、卵茧孵化及仔蛭饥饿试验研究。结果:亲蛭采用网箱湿土法养殖17d,其平均成活率为90%;产茧前具有生殖环带(土黄色),产茧后生殖环带消失;亲蛭产卵茧后平均体重下降率达(29.94±0.01)%;产卵茧期间共收获卵茧79枚,平均产茧量为1.8枚/条,卯茧平均重量为(0.50±0.21)g/枚,平均长径和短径分别为(1.75±0.31)cm/枚和(1.10±0.18)cm/枚;卵茧在室温下(14—33℃)孵育34d,共孵出仔蛭865条,每枚卵茧孵出(11.4±2.0)条仔蛭,卵茧孵化率达92.57%。初孵仔蛭平均个体体重为(0.0205±0.0084)g。饥饿试验表明,在140d时,对照组存活11条水蛭,成活率仅22%,其平均个体体重为(0.1084±0.0877)g,仔蛭个体体重有随日龄的增加而增加趋势;饥饿组仔蛭在140d时全部死亡。结论:在适宜的条件下,采用网箱湿土养殖法,宽体金线蛭可在室内产茧,卵茧集中孵育及亲蛭和仔蛭分开饲养。 相似文献
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