活血通脉软胶囊的制备及其溶出度评价

目的采用湿法超微粉碎技术制备活血通脉软胶囊内容物,对其溶出度进行评价。方法以物料粒度、物料稳定性作考察指标,采用单因素考察法分别对不同分散介质、介质用量、粉碎时间、粉碎温度等工艺参数进行筛选;以多肽含量作溶出度考察指标,比较所制软胶囊与市售活血通脉硬胶囊体外溶出情况。结果软胶囊内容物的最佳湿法超微粉碎工艺为:药粉中加入3.8倍量含8%丙二醇的PEG400,于超微粉碎机中40℃粉碎30 min,出料,即得。软胶囊和硬胶囊在60 min时溶出率分别为75.74%和29.57%。结论湿法超微粉碎所制软胶囊溶出速率和程度显著高于市售硬胶囊,提示其具有更好的生物利用度,具有广阔的应用前景。     

光化学法致大鼠脑血栓及水蛭提取物的治疗作用

应用光化学原理,以自制冷光源(LG150B)诱导大鼠大脑中动脉血栓形成,并观察其后动物行为学改变、脑水肿程度、脑梗塞面积以及尿激酶和水蛭提取物的治疗作用。结果,光照诱导后4、12、24h均出现行为学改变,以24h时为著;脑水肿也以24h时最为严重,梗塞灶约占脑(嗅球、小脑和低位脑干除外)切片面积的10.51%±2.37%;尿激酶和水蛭提取物处理后以上改变均有明显改善。以水蛭提取物(2g/kg)处理可使脑水肿程度下降29%,梗塞面积缩小45%。结果表明用LG150B冷光源可成功建立大鼠大脑中动脉血栓模型,水蛭提取物可减轻其脑梗塞程度。     

精氨酸对蚂蟥诱食效应的初步研究

以蚂蟥Whitmania pigra为试验动物,在排除振动、底物影响的前提下,以黄原胶作为饲料底物,观察不同浓度精氨酸对蚂蟥的诱食效应。结果表明,0.3%精氨酸对蚂蟥有明显的诱食作用,与蚂蟥天然饲料螺蛳体液中精氨酸质量分数2.97 mg·g-1相接近。     

水蛭的化学成分研究

[目的]研究中药水蛭的化学成分。[方法]采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化,依据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。[结果]从中药水蛭的95%乙醇提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为:吲哚-3-甲酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、3-吲哚-甲醛(2)、腺苷(3)、2-羟基嘌呤核苷(4)、尿嘧啶核苷(5)、腺嘌呤(6)、尿嘧啶(7)、黄嘌呤(8)和2-哌啶酮(9)。[结论]首次从该药材中分离得到9种化合物。     

蚂蟥内脏器官和皮肤的组织结构观察

目的：通过解剖观察蚂蟥主要内脏器官组织和皮肤结构,为蚂蟥类品种鉴别及其生理功能等方面研究提供依据。方法：通过石蜡组织切片和显微摄影的方法,对蚂蟥内脏器官,包括口、咽、食管、嗉囊、肠、直肠、侧盲囊、精巢、储精囊、输精管、射精球、前列腺、皮肤等进行解剖观察分析。结果和结论：明确其消化系统、生殖系统的器官和皮肤的组织结构和作用以及皮肤黏液细胞的类型与分布。为进一步研究蚂蟥的生活习性、繁殖习性和人工养殖环境提供参考依据。     

温度对蚂蟥生长及摄食规律影响的初步研究

目的：观察蚂蟥在不同温度下的生长情况及其摄食规律。方法：比较在不同温度条件下不同体重蚂蟥生长情况,以及蚂蟥在24 h之内的摄食规律。结果与结论：蚂蟥生长的适宜温度是15～25 ℃,其饱食量随着体重增大和温度的升高而增加。摄食率随个体增大而有所降低。在24 h之内蚂蟥有2个摄食高峰。     

温度和体重对蚂蟥人工繁殖影响的研究

目的：确定蚂蟥的最佳产卵温度、体重以及孵化的最适温度。方法：在不同温度、体重条件下观察蚂蟥产卵和孵化。结果与结论：蚂蟥产卵和孵化的最适温度是25 ℃,产卵的最佳体重为20 g左右；温度能影响蚂蟥产卵前后的体重,而体重对其的影响不明显；当卵重在0.1～2.0 g时与孵出量成正比,当卵重大于2.0 g时孵出量反而有所下降。     

水蛭抗凝血活性成分的研究

目的：研究水蛭的抗凝血成分。方法：以血浆复钙时间为指标，应用Sephadex DEAE A-50阴离子交换树脂色谱、Sephadex G-25和Sephadex LH-20凝胶过滤色谱及反相高压液相色谱技术分离纯化。结果：得到3个抗凝血活性多肽，其中化合物1，2在自然条件下互相转化，它们的相对分子质量分别为7 100和5 531；采用HPLC及SDS-PAGE鉴定了化合物3的纯度，采用MALDI-TOF-MS法测定出其相对分子质量为8 608，并测定了其氨基酸组成。结论：推测化合物3为首次分离得到的抗凝血多肽，命名为蚂蟥多肽(whitmanin)。     

基于环介导等温扩增技术快速鉴定宽体金线蛭

[目的] 建立中药材宽体金线蛭的环介导等温扩增（LAMP）检测技术,实现对宽体金线蛭及其常见混伪品的快速检测。[方法] 针对宽体金线蛭线粒体细胞色素氧化酶I（COI）的基因序列设计LAMP引物。在64℃恒温条件下,用设计的LAMP引物组对水蛭进行LAMP扩增。[结果] LAMP反应结束后,宽体金线蛭均扩增出梯状条带,对照组无条带产生。加入0.2 μL荧光染料10 000×SYBR Green Ⅰ后,宽体金线蛭反应液在自然光下呈绿色（阳性）,对照组呈橙色（阴性）。将加入了0.2μL 10 000×SYBR Green Ⅰ的扩增产物置于紫外灯下观察,结果宽体金线蛭在紫外光下呈绿色荧光（阳性）,对照组无绿色荧光产生（阴性）。[结论] 利用LAMP技术可实现宽体金线蛭及其常见混伪品的快速鉴别,为水蛭中药材的现场鉴别提供技术支撑。     

水蛭饮片规格质量的调查及实验研究

调查及实验证明,水蛭以蚂蟥为主流药用品种。切丝入药溶出效果最优。对水蛭3种炮制品的质量从浸出物限量、薄层层析、蛋白电泳、体外抗凝效价方面进行了定量、定性研究。