雷公藤多苷联合缬沙坦对早期糖尿病肾病患者血清D-二聚体及细胞炎性因子的影响

目的 观察雷公藤多苷联合缬沙坦对早期糖尿病肾病(DN)患者血清D-二聚体(D-D)、血液流变学及细胞炎症因子水平的影响.方法 将80例DN患者根据尿微量白蛋白/肌酐比值(UMA/Cr),分为正常白蛋白尿组(NA组,n=45,UMA/Cr<30 mg/mmol)和微量白蛋白尿组(MA组,n=35,UMA/Cr 30~299 mg/mmol).2组均采取基础治疗,同时加用雷公藤多苷联合缬沙坦治疗.2组均治疗16周.观察2组治疗前后空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、餐后2 h血糖(2 h PG)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及D-二聚体(D-D)变化情况,以及细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-18变化.同时随机选择本院健康体检者30例作为对照组.结果 与对照组比较,NA组、MA组D-D水平均升高,且MA组较NA组D-D水平升高明显,差异有统计学意义(P<0.05).NA组、MA组治疗前后FPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C、2 hPG、D-D均明显降低,HDL-C明显升高,2组间比较差异有统计学意义(P<0.05).2组治疗后TNF-α、IL-6、IL-18均降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期DN患者D-D水平升高,雷公藤多苷联合缬沙坦具有改善微循环、抑制细胞炎性因子、预防微血栓形成的作用,可降低早期DN患者体内D-D水平.     

LC-MS法同时测定雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量

目的建立一种灵敏、准确的雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量的LC-MS法。方法雷公藤浸膏样品经氯仿溶解后用稀盐酸（2．0mol·L“）溶液提取,上清液移人Oasis。MCX固相萃取小柱进行净化,然后样品在ZorbaxPlusRRHDC18柱（50innl×2．1mm,1．8μm）上,以醋酸铵缓冲液[0．05％醋酸一酸酸铵溶液（5mmol·L-1）]-乙腈（30：70）为流动相进行分离,应用LC—MS法,在大气压化学电离正离子选择离子监测模式（SIM）下测定,雷公藤新碱和雷公藤碱戊的定量离子分别为m／z806和m／z779。结果雷公藤新碱和雷公藤碱戊的绝对回收率为87．0％-97．5％,在含量1．0—200．0μg·kg-1内均具有良好线性,日内RSD均〈9．8％,日间RSD均〈14．7％,定量检出限均为1．0μg·kg-1。结论本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于雷公藤浸膏中雷公藤新碱和雷公藤碱戊含量的监测。     

雷公藤多苷联合来氟米特治疗类风湿性关节炎疗效观察

目的:观察雷公藤多苷联合来氟米特治疗类风湿关节炎的效果和安全性.方法:60例随机分为对照组和研究组各30例,两组均给予来氟米特治疗,研究组加用雷公藤多苷治疗.比较两组疗效及安全性.结果:临床疗效、实验室指标改善研究组均优于对照组(P＜0.05).结论:雷公藤多苷联合来氟米特治疗类风湿性关节炎能提高疗效,用药安全.     

液相色谱-质谱法测定雷公藤浸膏中4种倍半萜类生物碱含量

目的建立一种灵敏、可靠的雷公藤浸膏中4种倍半萜类雷公藤生物碱含量的高效液相色谱-质谱检测方法。方法雷公藤浸膏样品经氯仿溶解后用稀盐酸（2.0 mol·L~（-1））提取,Waters Oasis.MCX小柱进行净化,以0.05%（V/V）醋酸-醋酸铵溶液（5 mmol·L~（-1））/乙腈（45/55,V/V）为流动相,采用Zorbax SB C_（18）柱（250mm×4.6mm,5μm）分离,应用高效液相色谱/大气压化学电离正离子选择离子监测模式（SIM）测定,雷公藤春碱、雷公藤定碱、雷公藤吉碱和雷公藤次碱的定量离子分别为m/z874、884、858和868。结果 4种雷公藤生物碱的绝对回收率为86.5%～96.0%,质量浓度在1.0～200.0μg·L~（-1）内具有良好线性,批内RSD〈7.4%,批间RSD〈9.3%,定量检出限均为1.0μg·kg~（-1）。结论本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于雷公藤浸膏中4种倍半萜类雷公藤生物碱含量的检测。     

HPLC法测定雷公藤贴膏中雷公藤甲素的含量

目的:建立雷公藤贴膏中雷公藤甲素的HPLC测定方法.方法:外标法,色谱柱:Angilent ZORBAX SC-C18(4.6 mm×25 cm,5μm);甲醇一水(40:60);检测波长:218 nm;柱温:25 ℃;流速:1.0 mL/min;进样量:20μL.结果:雷公藤甲素在0.0482-0.2410 mg/mL呈良好的线性关系,r=0.9998(n=5),平均回收率为99.4%,RSD%=0.96%(n=6).结论:本方法具有操作简便、准确,回收率好,精密度高、重现性好,分析快速的优点.可作为雷公藤贴膏雷公藤甲素的定量分析和质量控制方法.     

Therapeutic effects of total alkaloids of Tripterygium wilfordii Hook f. on collagen-induced arthritis in rats

Ethnopharmacological relevance

Tripterygium wilfordii Hook f. is one of Traditional Chinese Medicines which is commonly used to treat rheumatoid arthritis (RA). The total alkaloids were the main constituent part of Tripterygium wilfordii Hook f. It has a great significance to study the effects of the total alkaloids of Tripterygium wilfordii Hook f. (ATW) on RA.

Aim of the study

This paper aims at investigating the therapeutic effect of ATW on RA and its possible mechanism, and providing a theoretical and experimental basis for the clinical use of ATW.

Materials and methods

The model of wistar rats of type II collagen-induced arthritis (CIA) was made, and the rats were perfused a stomach with ATW for 4 weeks continuously. Then the levels of interleukin (IL)-6, IL-8, tumor necrosis factor (TNF)-<alpha>, in the serum of CIA rats were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), and the joint pathological section of CIA rats was observed by hematoxylin and eosin (HE) staining method and the expression of IL-6, IL-8, nuclear factor kappa B (NF-κB), TNF-α were measure by immunohistochemistry staining method.

Results

Compared with model group, ATW could significantly reduce paw swelling and suppresse articular cartilage degenerated. The results also found that there was significant reduction levels of IL-6, IL-8 and TNF-α in serum of CIA rats treated with ATW and ATW inhibited the expression of IL-6, IL-8, NF-κB, TNF-α in synovial tissue.

Conclusion

ATW not only could inhibit the symptom of CIA rats significantly but also could inhibit the production of IL-6, IL-8, TNF-α in serum and the expression of IL-6, IL-8, NF-κB and TNF-α in synovial tissue targeting the inflammatory. ATW would be a drug as a novel botanical drug for the treatment of RA.     

雌孕激素替代治疗雷公藤多甙致雌性大鼠生殖系统损害的实验研究

目的通过雌、孕激素序贯性（HPT）干预治疗，探讨雌孕激素对雷公藤多甙（TWP）所致大鼠生殖系统损害的保护作用及卵巢早衰（POF）的防治方法。方法选择30只SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、自然恢复组（B组）及雌孕激素干预组（C组），前12周B组、C组每天均给予TWP灌胃，A组给予等量溶媒；后4周C组给予HPT治疗，A、B组给予等量溶媒。为期16周。分别观察3组大鼠动情周期，生殖器官质量及组织形态学变化，性激素水平改变。结果与A组相比：B组大多动情周期缺失、不完整或延长；子宫及卵巢质量明显下降（P〈0．05），结构受损。血清雌激素（E2）水平明显降低，、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）水平则明显升高（P〈0．05）。而C组动情周期规律；子宫、卵巢的质量无下降（P〉0．05）；子宫各结构未见异常，E2、FSH及LH水平无明显改变（P〉0．05）。结论TWP可致雌性大鼠生殖系统的损害，HPT对卵巢功能有较好的保护作用，可促进所致损害的恢复，是防治TWP所致POF的有效方法之一。     

雷公藤多甙对蟾蜍缝匠肌终板膜乙酰胆碱受体的作用

目的 观察雷公藤多甙（TWP）对终板膜乙酰胆碱受体（nAChR)的反应性的作用。方法 在不均匀牵张法制动的蟾蜍缝匠肌标本上，利用微电泳氯化及乙酰胆碱（AChCl)技术，在终板区引起的乙酰胆碱电位（AChP）来板映终板膜nAChP的反应性。结果 （1）20g L TWP组，用药20min后AChP振幅明显升高，40mg/L和60mg/LTWP组，用药10min后AChP振幅明显升高。（2）20mg/L和40mg/L TWP组内，AChP振幅除80min组外，其它各时间组间有显著性差异（P＜0．05），60min达最大值；（3）60mg/L TWP组，在用药后40min,60min和80min均记录到动作（AP）；（4）药物各浓度组引起的AChP振幅变化率之间有显著差异（P＜0．05），其中60mg/L TWP组引起的变化率最大。结论 TWP能提高终板膜nAChR的反应性，并有明显的量效关系和一定的时效关系。     

抗生育剂量雷公藤对小鼠脾NK细胞活性的调节作用

采用银染和MTT的方法,分别观察不同剂量雷公藤对雄性小鼠的附睾尾精子变化和脾NK细胞活性的影响。结果显示:雷公藤实验组附睾尾精子多为头部异常,大部分出现头尾分离和折断现象,精子活率及密度均明显低于对照组。雷公藤对小鼠脾NK细胞活性存在着明显的剂量效应关系,多甙组和雷公藤糖浆大剂量组对NK细胞活性抑制较明显,而中剂量组和小剂量组则对NK细胞活性影响不明显。结果提示:雷公藤糖浆在有效抗生育剂量下对小鼠脾NK细胞活性无明显影响,为重新评价雷公藤的药用价值及今后的临床应用提供了有意义的实验数据。     

雷公藤多甙下调IL-1β诱导的呼吸道上皮细胞TGF-β1的表达

目的研究雷公藤提取物(雷公藤多甙)对前炎症因子白介素-1β(IL-1β)诱导的气道上皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调控,以探讨雷公藤在气道重塑中作用的分子机制。方法原代分离新西兰白兔气道上皮细胞,体外培养,随机分5组:正常对照组,IL-1β处理组(加入终浓度为10ng/ml的IL-1β),IL-1β 雷公藤共处理A、B、C组(分别加入终浓度为5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的雷公藤溶液预处理半小时后再给予终浓度为10ng/ml的IL-1β),作用24h收集细胞爬片,采用免疫细胞化学染色方法,观察各组TGF-β1的表达。结果IL-1β处理组(0.511±0.012)TGF-β1表达较对照组(0.138±0·009)显著增强,差异有显著性(均P<0.01),IL-1β 雷公藤共处理A、B、C组(0.353±0.046,0.245±0.034,0.218±0·024)TGF-β1表达较IL-1β处理组减少,差异均有显著性(均P<0.01)。在5-20μg/ml浓度范围内,随雷公藤浓度的增加,气道上皮TGF-β1表达呈浓度依赖性减少。结论雷公藤多甙抑制由IL-1β诱导的气道上皮TGF-β1的过度表达,从而可减轻气道重塑的发生,为雷公藤防治哮喘气道重塑作用的分子机制之一。