高效液相色谱法测定肝得宁丸中五味子甲素的含量

目的 建立肝得宁丸中五味子甲素含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:phenomenex Luna C18 (5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相:乙腈-水-醋酸(64:35:1);流速:1 ml/min;检测波长:254 nm;柱温25℃.结果 五味子甲素含量在0.2624～0.5248 μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.91%,相对标准偏差(RSD)为0.84%.结论 该方法操作简便,准确可靠,专属性强,重复性好,可用于肝得宁丸的质量监控.     

通塞脉微丸血清药物化学的初步研究(Ⅰ)

目的 研究通塞脉微丸复方大鼠给药后血清中移行成分的归属.方法 建立通塞脉微丸及大鼠ig通塞脉微丸后血清的HPLC色谱分析方法;比较全方制剂、金银花、当归、甘草、玄参、黄芪和石斛各单方制剂分别给药后所得的血清样品,分析口服通塞脉微丸后大鼠血中移行成分、来源生药及其代谢产物.结果 大鼠ig通塞脉微丸后从血清中发现了15种入血成分,其中10种成分为复方所含成分的原型,其中绿原酸、阿魏酸、甘草素和肉桂酸为已知确定结构的化合物,另外5种成分分别来源于金银花、当归、甘草、玄参和石斛,其具体结构还有待进一步检测分析;1种为复方给药后新产生的代谢物质;3种为给药后产生的未知化合物.结论 血中移行成分及其代谢产物是通塞脉微丸的体内直接作用物质,对其深入研究将有助于阐明复方效应的物质基础.     

Effects on neuroendocrinoimmune network of Lizhong Pill in the reserpine induced rats with spleen deficiency in traditional Chinese medicine

Aim of the study

Lizhong Pill, composed of Radix Ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer), Rhizoma Zingiberis (Zingiber officinale Roscoe), Rhizoma Atractylodis Macrocephalae (Atractylodes macrocephala Koidz.) and Radix Glycytthizae (Glycyrrhiza uralensis Fisch.), is a classical herbal product for curing spleen deficiency in traditional Chinese medicine (TCM), and reserpine treated rats show similar signs to TCM spleen deficiency pattern. This paper is aimed to explore the regulatory effect on neuroendocrinoimmune network by Lizhong Pill in reserpine induced TCM spleen deficiency rats.

Materials and methods

100 healthy adult male SD rats, with a mean weight of 200 g, were randomly divided into five groups in average: control group, reserpine treated group, atropine treated group, treatment groups with Lizhong Pill at high dose and low dose (equal to the dosage of crude drugs for 4 g/kg/d and 8 g/kg/d). Rats in reserpine treated group were induced by intraperitoneal injection of reserpine at 0.5 mg/kg d for 4 weeks. The levels of IL-1, IL-6 and gastrin were measured with radioimmunoassay, TNF-α and IFN-γ in serum were measured with ELISA, the level of vasoactive intestinal peptide (VIP) and substance P (SP) in small intestine were determined with radioimmunoassay, and the TNF-α and TGF-β positive cells in small intestine were detected by immunohistological staining. Data were analyzed with SAS 9.1 software package.

Results

The rats in reserpine treated group, body weight, concentrations of IFN-γ, IL-1 and TNF-α in serum, expression of TGF-β in small intestine, VIP in small intestine decreased (P < 0.05), and the level of IL-6 in serum, expression of TNF-α, SP in small intestine and gastrin were increased (P < 0.05). Administration of Lizhong Pill at high dose could increase the body weights at day 21, and the weights of rats in Lizhong Pill groups were much higher compared to reserpine treated group. At high dose of Lizhong Pill could increase the level of TNF-α in serum. Lizhong Pill at high dose and low dose could reverse the changes of IL-1, IL-6 and IFN-γ, gastrin, expression of TGF-β and TNF-α, VIP and SP in small intestine.

Conclusions

The rats treated with reserpine, with similar signs to TCM spleen deficiency, show neuroendocrinoimmune disorders, and the restoration of the neuroendocrinoimmune disorders might be the part of mechanism of Lizhong Pill for reinforcing TCM spleen deficiency.     

HPLC法测定桂龙咳喘宁片中肉桂酸含量

目的:建立桂龙咳喘宁片中肉桂酸的含量测定方法。方法:采用HPLC法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.5%磷酸溶液(30∶70)为流动相;检测波长为270nm。结果:肉桂酸进样量0.0355～0.2130μg之间呈良好的线性关系,r=0.9995,平均加样回收率为96.95%,RSD 1.85%。结论:本法灵敏、准确、重现性好,精密度高,专属性强。可用于桂龙咳喘宁片的质量控制。     

大黄廑虫丸与黄芪合用对2型糖尿病大鼠治疗作用的实验研究

目的 观察大黄廑虫丸与黄芪合用对高脂乳剂加链脲佐菌素所致2型糖尿病大鼠的降血糖作用.方法 采用高脂乳剂灌胃加小剂量链脲佐菌素腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型.50个大鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、阳性对照组、大黄廑虫丸组、大黄廑虫丸+黄芪组.连续灌胃4周后,测定各组大鼠血糖、血脂及免疫指标水平.观察实验期间各组大鼠外观状态、体质量变化,解剖分离各脏器称质量,计算脏器系数.结果 模型组与正常组比较:血糖、低密度脂蛋白、甘油三酯及胆固醇升高,免疫球蛋白(IgG)、补体(CH50)水平下降、补体C3、C4水平升高.心、肝、肺增重,胸腺质量减轻,体质量下降.大黄廑虫丸与黄芪合用能降低糖尿病大鼠血糖、低密度脂蛋白、甘油三酯及胆固醇,升高高密度脂蛋白,提高补体CH50水平,降低补体C3水平;能改善糖尿病大鼠的体质量下降,纠正增加的肺脏质量,但不能纠正脾脏及胸腺免疫器官质最的减轻.结论 大黄廑虫丸与黄芪合用对2型糖尿病大鼠具有降血糖作用.     

地灵丹对大鼠高尿酸血症肾病影响的实验研究

目的观察地灵丹对大鼠高尿酸血症肾病的影响,并探讨相关作用机制。方法采用高嘌呤饲料制作高尿酸血症肾病大鼠模型,分为地灵丹治疗组、别嘌呤醇组、模型对照组及正常对照组,每组15只大鼠,分别给予相应的干预措施,持续4周。检测大鼠血尿酸、肌酐变化,观察肾脏组织学变化及细胞因子TGF-β1、TNF-α的表达。结果实验第14天,与正常对照组比较,各造模组血尿酸、血肌酐水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;与模型组比较,地灵丹组及别嘌呤醇组血尿酸、血肌酐水平均显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。实验第28天,与正常对照组比较,模型组及地灵丹组血尿酸、血肌酐水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,而别嘌呤醇组血尿酸水平出现显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,地灵丹组及别嘌呤醇组血尿酸、血肌酐水平显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;与地灵丹组比较,别嘌呤醇组的血尿酸水平显著降低,血肌酐水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与正常对照组比较,其余各组TGF-β1、TNF-α阳性面积均显著增多,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,地灵丹组与别嘌呤醇组的TGF-β1阳性面积显著减少,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,地灵丹组与别嘌呤醇组大鼠肾脏病理改变减轻。结论地灵丹可减缓高尿酸血症肾病大鼠肾脏损害的作用,其作用机制可能与调节TGF-β1、TNF-α等细胞因子有关。     

左归丸对肾虚大鼠MSCs增殖的影响

目的探讨补肾益精代表方左归丸对肾虚大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响。方法 SD雌性大鼠双侧卵巢切除增龄3月法复制肾虚模型,用左归丸给予部分模型大鼠灌胃。分离、培养正常组、模型组、左归丸组大鼠MSCs。观察各组大鼠MSCs细胞形态,生长周期,P3、P5代细胞生长曲线,β-半乳糖苷酶衰老细胞染色结果。结果模型组大鼠P3、P5代MSCsOD值明显低于正常组、左归丸组(P<0.05)。各组大鼠MSCs细胞周期无明显差异(P>0.05)。模型组衰老细胞阳性率最高,明显高于正常组(P<0.01),但与左归丸组间差异不明显(P>0.05)。结论去卵巢大鼠MSCs增殖能力减弱,左归丸一定程度上改善肾虚大鼠MSCs增殖能力。     

金匮肾气丸治疗2型糖尿病临床观察

目的：探讨金匮肾气丸治疗2型糖尿病的临床疗效。方法：将200例患者随机平均分为对照组和治疗组,对照组采用常规西药治疗,治疗组在对照组的基础上加服金匮肾气丸。结果：对照组有效率为87．O％,治疗组效率为95．0％。治疗后,治疗组各项观察指标明显优于对照组。结论：金匮肾气丸治疗2型糖尿病有显著的临床疗效。     

补肾调经方、逍遥丸对促性腺激素预处理小鼠组织蛋白酶-L mRNA的影响

目的 探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L（cathepsin-L,Cat L） mRNA的影响。     

毛细管电泳法测定逍遥丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量

目的 建立测定逍遥丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的毛细管电泳法.方法以对硝基苯甲酸为内标,采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱(65 cm×50 μm ID,有效长度57 cm),以20 mmol· L-1 Iris+ 20 mmol· L-1磺丁基-β-环糊精+ 25 mmol·L-1β-环糊精(pH 9.93)为运行缓冲液,分离电压10 kV,重力进样10 s(高度15cm),检测波长210 nm.结果柴胡皂苷a、柴胡皂苷d浓度分别在20.16～201.60 μg·mL-1(r =0.9971)、10.20～102.00 μg·mL-1(r=0.9947)间具有良好的线性关系;柴胡皂苷a的平均回收率为99.4％,方法精密度(RSD)为2.46％(n=6);柴胡皂苷d的平均回收率为98.7％,方法精密度(RSD)为1.07％(n=6).结论该法专属性强,结果准确可靠,重现性好,可用于逍遥丸的质量控制.