兜唇石斛的酚类化学成分研究

目的研究石斛属植物兜唇石斛Dendrobium aphyllum茎的化学成分。方法采用硅胶、凝胶、MCI、中压制备色谱(MPLC)和高效液相半制备色谱(semi-HPLC)等方法进行分离纯化,根据理化性质、核磁共振谱及质谱等方法鉴定化合物结构。结果从兜唇石斛的90%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为4,7-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲(1)、2,4-二羟基-7-甲氧基-9,10-二氢菲(2)、2,5,7,9-四羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(3)、4,7,9-三羟基-5-甲氧基-9,10-二氢菲(4)、松脂醇(5)、丁香酚-β-D-葡萄糖苷(6)、反式阿魏酸(7)、正十二烷醇(8)、β-谷甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)。结论化合物1~2、5~8为首次从该属植物中分离得到,化合物1~10均为首次在该植物中分离得到。     

土茯苓活性分子落新妇苷抗顺铂诱导的人肾小管上皮细胞凋亡作用研究

目的观察土茯苓活性分子落新妇苷抗顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的作用。方法采用MTT法分别观察不同浓度落新妇苷(30、50、100、200、300μM)联合顺铂(50μM)对HK-2细胞活力的影响;将HK-2细胞分为对照组、顺铂组、落新妇苷(100、200μM)组,药物干预24h后,Annexin V/PI流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-caspase-3表达情况;RT-PCR法和Western blot法检测药物转运蛋白OCT2 m RNA和蛋白质表达情况。结果 MTT结果显示,落新妇苷能够增强顺铂诱导HK-2细胞活力(P0.05),且呈一定剂量依赖关系。流式细胞凋亡结果显示,与对照组比较,顺铂组细胞凋亡率显著升高[(61.5±5.67)%比(1.2±1.13)%,P0.01];落新妇苷能够显著抑制顺铂诱导HK-2细胞凋亡,尤其200μM剂量组显著[(33.5±6.93)%比(61.5±5.67)%,P0.01]。Western blot结果显示,与对照组比较,顺铂组细胞Bax、cleaved-caspase-3表达显著增加[(0.33±0.07)比(0.02±0.01)、(0.54±0.06)比(0.08±0.03),P0.01],Bcl-2表达显著减少[(0.11±0.02)比(0.63±0.07),P0.01];与顺铂组比较,落新妇苷能够显著下调Bax、cleaved-caspase-3,上调Bcl-2蛋白表达[Bax:(0.19±0.04)、(0.18±0.02)比(0.33±0.07),P0.05;cleaved-caspase-3:(0.28±0.06)、(0.20±0.05)比(0.54±0.06),P0.01;Bcl-2:(0.26±0.04)、(0.28±0.04)比(0.11±0.02),P0.05]。RT-PCR和Western blot结果显示,与顺铂组比较,落新妇苷能够显著抑制HK-2细胞药物转运蛋白OCT2 m RNA表达[(0.53±0.14)、(0.47±0.03)比(0.89±0.09),P0.01]和蛋白质表达[(0.36±0.08)、(0.25±0.03)比(0.52±0.05),P0.05,P0.01]。结论落新妇苷具有抑制顺铂诱导的HK-2细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制OCT2蛋白表达有关。     

两面针与毛两面针药材中5种化学成分的比较研究

通过建立RP-HPLC 法同时测定两面针与毛两面针中木兰花碱、橙皮苷、氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱及毛两面针素含量,对市场收集到的27批两面针商品药材以及2批野生药材进行分析,比较两者间各成分及含量上的差异。结果表明两面针与毛两面针5种成分差异较大：前者中主要含生物碱成分,其中乙氧基白屈菜红碱含量较高;后者中均含有这5种成分,毛两面针素、橙皮苷所占含量比重较大;且相同品种间各成分也存在一定的差异。该结果可为两者的质量控制、合理用药及进一步研究开发提供参考。     

商陆及其炮制品多糖的含量测定

目的　比较商陆原药材和醋煮品的多糖含量。方法　蒽酮 -硫酸法。结果　原药材的多糖含量为 1 0 3%,醋煮品的多糖含量为 1 0 6 %。结论　原药材和醋煮品的多糖含量相等。     

顶空固相微萃取法与水蒸气蒸馏法联合气相色谱-质谱分析肿节风挥发性成分

目的：比较顶空固相微萃取法（HS-SPME）与水蒸气蒸馏法（SD）提取肿节风中挥发性成分的差异。方法：采用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术分析肿节风挥发性成分。结果：采用HS-SPME-GC-MS共分离出59个色谱峰,鉴定出40个化合物,占总挥发性成分的88.47%;SD-GC-MS共分离出59个色谱峰,鉴别出38个化合物,占总挥发性成分的90.04%;2种不同前处理技术共同鉴定出的挥发性成分有11种。结论：HS-SPME与SD联合GC-MS适用于分析不同类型挥发性化学成分,将两种方法联用分析肿节风挥发性成分能够得到更加全面的信息。     

RP—HPLC同时测定菝葜药材中总槲皮素和山柰酚含量

目的:建立同时测定菝葜药材中槲皮素和山柰酚含量的反相高效液相色谱法。方法:色谱柱:Lichrospher C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.5%磷酸水溶液(55:45),流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长:365 nm。结果:槲皮素在2.97～29.7μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),山柰酚在3.01—30.1μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),方法回收率分别为98.9%和99.7%。结论:本方法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可为评价菝葜药材质量提供依据。     

菝葜三种提取物活血化瘀药理作用研究

目的研究菝葜的活血化瘀药理作用.方法菝葜水煎液(Ⅰ)、正丁醇萃取物(Ⅱ)、正丁醇萃取剩余物(Ⅲ)高(100g/kg)、低(50 g/kg)剂量对小白鼠灌胃给药7 d后,眼眶取血,采用凝固比浊法测定APTT、PT,采用derive法测定FIB;全自动血细胞计数仪测定血小板数,采用比浊法体外测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对人血小板的聚集功能Ma、M1、V1的影响.结果100 g/kg剂量的Ⅰ和Ⅲ能显著延长APTT(P＜0.05),50～100 g/kg剂量的Ⅲ能使FIB显著增加(P＜0.05),而50 g/kg剂量的Ⅱ能使FIB显著减少(P＜0.05).稀释8倍后的Ⅰ和Ⅱ能抑制体外的血小板聚集功能,特别是对V1的影响更显著(P＜0.01),但三者对血小板数无明显影响.结论菝葜具有明显活血化瘀的药理作用,其作用机制可能与抑制血小板聚集和延长内源性凝血时间及影响纤维蛋白原生成有关.     

HPLC法测定两面针中氯化两面针碱的含量

建立了两面针中氯化两面针碱的HPLC测定法，方法简便、准确。加样回收率为97.7％，RSD＝0．82％，最低检测浓度0．8μg／mL，可用于两面针的质量控制。     

Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羟基-2-环己烯-1-酮Zeylenone(Zey)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察Zey对PC-3细胞和正常前列腺基质细胞WPMY-1的增殖抑制作用,应用平板克隆形成实验观察Zey对PC-3细胞克隆形成的作用,AO/EB荧光染色观察细胞形态、JC-1染色观察Zey对细胞内线粒体膜电位的影响,An-nexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-7和PARP的激活及Bcl-2、Bax、Bid、Bcl-xL蛋白的表达。结果Zey可以明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常前列腺基质细胞WPMY-1的抑制作用显著低于PC-3细胞。Zey抑制PC-3细胞克隆形成并明显诱导其凋亡。线粒体膜电位检测结果显示Zey导致细胞内线粒体膜电位的明显降低,Western blot检测结果表明Caspase-8、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3被激活,PARP和Bid被剪切活化,Bcl-2、Bcl-xL表达下降,而Bax表达上调。结论 Zey可选择性抑制人非激素依赖性前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制与其对Bcl-2和Caspase家族蛋白的影响,从而诱导PC-3细胞发生内源性和外源性凋亡相关。Zey有望成为治疗前列腺癌的候选药物。     

一起因误食商陆叶引起的食物中毒事件的调查

目的及时查清1起食物中毒事件发生原因,探讨致病因素,为预防类似事件提供参考。方法现场流行病学调查、简易动物毒性实验。结果6人进食商陆叶后全部发病,其中重症5例,经治疗后痊愈,无死亡病例。经调查确定为商陆叶引起的急性食物中毒事件。结论商陆为有毒植物,食用不当可引起食物中毒,此次事件发生的主要原因是当地群众对商陆的认识不足,加强宣传教育是防范类似事件发生的关键。