贵州产菝葜属及肖菝葜属8个品种的鉴别研究

目的系统研究贵州产菝葜属(SmilaxL.)及肖菝葜属(HeterosmilaxK.)常见8个品种的药材性状特征。方法用TLC鉴别该类品种的指标性成分落新妇苷、白藜芦醇及薯蓣皂苷元。结果在药材性状特征上建立了检索表,为该类品种的性状特征提供了专属性的鉴别依据。薄层鉴别中菝葜属及肖菝葜属常见8个品种均含有落新妇苷及白藜芦醇,但仅3个品种含薯蓣皂苷元,即短梗菝葜、黑叶菝葜及小叶菝葜,而药典品种菝葜及土茯苓则未检测出薯蓣皂苷元。结论该研究方法重复性及专属性较好,简单易行,可为该类品种的新资源开发利用及品种间鉴别提供一定的参考依据。     

HPLC-MS与HPLC-1H-NMR联用鉴定土茯苓中的二氢黄酮醇苷异构体

目的：鉴定土茯苓中的二氢黄酮醇苷异构体。方法：采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)与高效液相色谱-核磁共振氢谱法(HPLC-¹H-NMR)对土茯苓提取液中的二氢黄酮醇苷类成分进行分析鉴定。结果：从土茯苓中鉴定出4个二氢黄酮醇苷异构体，分别为落新妇苷、新落新妇苷、异落新妇苷和新异落新妇苷。结论：该法能简单、快速地鉴别土茯苓中的二氢黄酮醇苷类成分。     

Antiobesity effects of the water-soluble fraction of the ethanol extract of Smilax china L. leaf in 3T3-L1 adipocytes

BACKGROUND/OBJECTIVESSeveral medicinal properties of Smilax china L. have been studied including antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer effects. However, the antiobesity activity and mechanism by which the water-soluble fraction of this plant mediates its effects are not clear. In the present study, we investigated the lipolytic actions of the water-soluble fraction of Smilax china L. leaf ethanol extract (wsSCLE) in 3T3-L1 adipocytes.MATERIALS/METHODSThe wsSCLE was identified by measuring the total polyphenol and flavonoid content. The wsSCLE was evaluated for its effects on cell viability, lipid accumulation, glycerol, and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) contents. In addition, western blot analysis was used to evaluate the effects on protein kinase A (PKA), PKA substrates (PKAs), and hormone-sensitive lipase (HSL). For the lipid accumulation assay, 3T3-L1 adipocytes were treated with different doses of wsSCLE for 9 days starting 2 days post-confluence. In other cell experiments, mature 3T3-L1 adipocytes were treated for 24 h with wsSCLE.RESULTSResults showed that treatment with wsSCLE at 0.05, 0.1, and 0.25 mg/mL had no effect on cell morphology and viability. Without evidence of toxicity, wsSCLE treatment decreased lipid accumulation compared with the untreated adipocyte controls as shown by the lower absorbance of Oil Red O stain. The wsSCLE significantly induced glycerol release and cAMP production in mature 3T3-L1 cells. Furthermore, protein levels of phosphorylated PKA, PKAs, and HSL significantly increased following wsSCLE treatment.CONCLUSIONThese results demonstrate that the potential antiobesity activity of wsSCLE is at least in part due to the stimulation of cAMP-PKA-HSL signaling. In addition, the wsSCLE-stimulated lipolysis induced by the signaling is mediated via activation of the β-adrenergic receptor.     

土茯苓抗人巨细胞病毒的体外实验研究

目的:探讨土茯苓体外抗HCMV的效果和安全性。方法:用细胞病变法和MTT法,检测土茯苓体外抗人巨细胞病毒的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦、复方中药金叶败毒进行比较。结果:更昔洛韦、金叶败毒、土茯苓的最大无毒浓度分别为10μg/ml、3000μg/ml、30000μg/ml,最小有效浓度分别为10μg/ml、300μg/ml、300μg/ml,治疗指数分别为1、10、100。结论:土茯苓细胞毒性略低于金叶败毒,大大低于更昔洛韦;抗HCMV效果与金叶败毒相同,略低于更昔洛韦;治疗指数最高,有可能成为治疗HCMV活动性感染的药物。     

RP-HPLC测定金刚藤中薯蓣皂苷元的含量

 目的　建立金刚藤中薯蓣皂苷元的测定方法。方法　采用RP-HPLC测定薯蓣皂苷元的含量,色谱柱为Lichrospher C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇,检测波长为210nm,峰面积外标法定量。采用正交设计,考察发酵时间(A)、水解时间(B)、硫酸浓度(C)3个因素对薯蓣皂苷水解的影响。结果　薯蓣皂苷元在50～350μg·mL^-1内具有良好的线性关系(r=0.9991,n=7) ,平均回收率为99.97%,RSD=0.85%(n=5 )。采用发酵72h后用浓度为5%的硫酸水解6h,可使金刚藤中薯蓣皂苷水解完全。结论　RP-HPLC是一个简便、快速、分离效果好、精密度高、准确度好的测定金刚藤中薯蓣皂苷元的方法。发酵对水解产率影响显著。     

拔葜抗炎作用及对炎症介质的影响

目的:研究拔葜抗炎作用及作用机制。方法:观察拔葜对角叉菜胶所致大鼠足肿胀、炎症组织和血清中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响。结果:拔葜灌胃给药能明显抑制角叉菜胶所致正常大鼠和去肾上腺大鼠足肿胀,150g/kg拔葜可降低肿胀足爪组织中PGE2及血清中NO、MDA含量,90、150g/kg拔葜可降低肿胀足爪组织中NO含量。结论:拔葜可能通过影响炎症介质释放而起到抑制角叉菜胶性大鼠足肿胀作用。     

正交设计法优选土茯苓中落新妇苷及总黄酮的提取工艺

目的:研究超声法提取土茯苓中落新妇苷及总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用正交试验法研究落新妇苷和总黄酮的提取工艺,其中落新妇苷含量用HPLC法测定,总黄酮含量用紫外分光光度法测定。结果:土茯苓中落新妇苷最佳提取工艺为加入甲醇30mL,超声提取15min,超声3次。总黄酮的最佳提取工艺为料液比1∶50,加入50%乙醇,超声提取60min。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于土茯苓药材中落新妇苷及总黄酮的含量测定及其质量控制。     

大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮的工艺条件。方法:以土茯苓总黄酮收率为指标,通过考察静态和动态吸附实验,筛选了大孔吸附树脂分离纯化土茯苓总黄酮的最佳工艺条件。结果:D101大孔树脂对土茯苓总黄酮的静态饱和吸附容量为45.6 mg.g^-1(干树脂);最佳动态吸附、洗脱条件为土茯苓总黄酮提取液pH 6.00±0.20,质量浓度4.2 mg.mL^-1,吸附流速2 mL.min^-1,上样量15 mL;吸附后的树脂柱先以100 mL纯化水洗脱后,再用100 mL pH 8.00±0.20的60%乙醇以3 mL.min^-1流速洗脱。结论:D101型大孔树脂在所确定的工艺条件下,可较好的分离纯化土茯苓总黄酮,其回收率达到90%以上,且纯化后土茯苓总黄酮含量达到62.6%,是纯化前的近2倍。     

异落新妇甙的结构研究

从百合科菝葵属植物土茯苓(Smilaxg labra Roxb.)根茎的乙醇提取物中分得一个新的天然化合物(I),命名为异落新妇甙(isoastilbin)。根据元素分析,UV,IR,¹H-NMR,¹³C-NMR,2DNMR及FAB-MS,确定化合物I的结构为5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮醇-3-O-α-L-鼠李糖甙。     

菝葜药材脂溶性成分指纹图谱研究

目的建立菝葜药材的脂溶性成分的HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%的磷酸溶液梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长303nm。结果不同产地菝葜药材的指纹图谱有较好的相似度,通过比较对应了山龙眼苷A、落新妇苷、白藜芦醇及黄杞苷4个对照品。结论建立的方法能较好地反映了菝葜中二氢黄酮醇苷及二苯乙烯两类主要成分。