野黄芩苷对人舌鳞癌Tca8113细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的：观察野黄芩苷对人舌鳞癌Tca8113细胞Bcl-2、Bax表达的影响。方法：分别用80、120、160μg／ml的野黄芩苷培养液处理体外培养的Tca8113细胞48 h后,采用免疫细胞化学法、RT-PCR技术观察野黄芩苷对Tca8113细胞Bcl-2、Bax表达的影响。结果：免疫细胞化学染色结果：随着野黄芩苷浓度的增高,Tca8113细胞中Bcl-2的阳性信号减弱,Bax的阳性信号增强（P＜0．05）。RT-PCR检测结果：随野黄芩苷浓度的不断增高,Bcl-2 mRNA表达水平逐渐降低,Bax mRNA表达水平逐渐增高（P＜0．05）。结论：野黄芩苷可以下调Tca8113细胞Bcl-2表达,上调Bax的表达,达到抗肿瘤的作用。     

灯盏乙素对过氧化氢致心肌细胞损伤的作用与机制研究

目的：探讨灯盏乙素对过氧化氢（H2O2）损伤心肌细胞的保护作用。方法：将大鼠H9C2心肌细胞分为对照组、H2O2 (200 μmol·L-1)干预组以及灯盏乙素(100、200 μmol·L-1)+H2O2 (200 μmol·L-1)干预组,每组设6个复孔。各组经过药物干预6 h后,通过 MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）活性和丙二醛（MDA）含量;测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果：与对照组比较,H2O2干预组H9C2心肌细胞存活率显著降低且凋亡率显著升高,培养液中 LDH、CK、AST 活性和 MDA 含量均显著升高,细胞中 SOD、CAT、GSH-Px 活性显著降低,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。与 H2O2干预组比较,灯盏乙素（100、200 μmol·L-1）+H2O2（200 μmol·L-1）干预组培养液中H9C2心肌细胞存活率显著升高、凋亡率显著降低,培养液中LDH 、AST、CK活性和MDA 含量均显著降低,细胞中SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：灯盏乙素能够有效提高 H2O2诱导状态下 H9C2 心肌细胞存活率并降低凋亡率,改善细胞中抗氧化酶活性、降低细胞损伤,提示灯盏乙素对H2O2诱导 H9C2心肌细胞氧化应激损伤具有剂量相关性的保护作用。     

灯盏花素对高糖联合低氧诱导人视网膜色素上皮细胞分泌VEGF的影响及其机制

目的 通过观察1 μmol/L灯盏花素对高糖、低氧,及高糖联合低氧环境下人视网膜色素上皮(RPE)细胞株D407细胞分泌VEGF的影响,PKCδ的转位激活变化,以及构建PKCδ的小分子干扰载体,探讨灯盏花素对RPE细胞在糖尿病环境下分泌VEGF的调节作用及机制.方法 常规培养D407细胞,分为对照组(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25.0mmol/L葡萄糖),低氧组(200.0 μmol/L CoC12),联合组(25.0 mmol/L葡萄糖+200.μmol/L CoCl2),灯盏花素干预联合组(25.0 mmol/L葡萄糖加200 μmol/L CoCl2加灯盏花素1.0μmol/L),ELISA检测VEGF浓度,Western blot检测PKCδ的转位激活水平;构建PKCδ小分子干扰载体转染D407细胞后,Western blot检测PKCδ表达水平,ELISA检测VEGF分泌水平.结果 高糖组、低氧组、联合组分别与对照组比较,细胞分泌VEGF与PKCδ转位激活均增加(均P＜0.05),联合组增加最明显(P＜0.01);灯盏花素在1 μmol/L的浓度下可以显著降低高糖联合低氧诱导的VEGF分泌;灯盏花素可以抑制高糖联合低氧引起的PKCδ转位激活;所构建的sh3-PKCδ干扰载体可以降低PKCδ表达水平,干扰PKCδ后联合组的VEGF分泌水平降低(P＜0.05).结论 灯盏花素可以抑制高糖联合低氧诱导RPE细胞分泌VEGF,这可能与灯盏花素抑制了PKCδ转位激活有关,提示PKCδ可能是DR的一个药物靶点,灯盏花素具有作为DR治疗药物的前景.     

黄芩苷对鼻咽癌化疗期间激素使用影响的实验研究

目的 探讨黄芩苷对地塞米松干扰鼻咽癌细胞化疗效果的影响。方法 将常规培养的人低分化鼻咽癌细胞CNE-2Z分为四组（空白对照组、单纯紫杉醇处理组、地塞米松干扰组、黄芩苷预处理组）。MTT法检测各组细胞的OD值并计算各组细胞的增殖率;RT-PCR法检测细胞中与增殖相关的基因Cyclin D1和Caspase-12的表达。结果 地塞米松对紫杉醇处理后的CNE-2Z细胞中凋亡基因Caspase-12的上调和原癌基因cyclinD1的下调均产生显著的抑制,紫杉醇诱导的细胞凋亡现象部分被地塞米松所逆转,导致CNE-2Z细胞的存活率增高;而加入了黄芩苷后,地塞米松的这种逆转效应被部分抑制。结论 地塞米松降低了CNE-2Z细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性,黄芩苷能够对抗地塞米松的这种效应,部分恢复了鼻咽癌细胞对紫杉醇的敏感性。     

应用网络药理学方法揭示黄酮类化合物灯盏花乙素分子机制研究进展

黄酮类化合物灯盏花乙素（scutellarin,SCU）为我国传统中药灯盏花的主要活性成分,其副作用小,安全性高,在临床中广泛应用于中风后遗症,冠心病,心绞痛,以及防治其它类型的缺血性心脑血管疾病。现代 药理学研究表明,SCU等黄酮类化合物具有多靶点的药理作用特点,但其靶点相关分子作用机制并不清楚。近 年来基于生物信息技术发展起来的网络药理学,适用于研究多靶点药物作用机制,可以预测药物作用靶点,构 建药物-靶点-疾病的相互作用网络,为后续的实验研究提供线索和新思路。本文对近年来采用网络药理学方 法,研究探讨黄酮类化合物以及SCU网络药理学机制的研究进行综述,为SCU及其他黄酮类化合物后续的分子 机制研究提供思路和参考。     

黄芩与柴胡不同比例配伍黄芩苷水煎出量的比较

目的考察黄芩与柴胡不同比例配伍共煎黄芩苷的煎出量,以探讨传统"药对"黄芩配伍柴胡对有效成分煎出的影响。方法单味黄芩、黄芩与柴胡(1 2,1 1,2 1)配伍,水煎提取,分离,采用HPLC法,以ODS-C18(4.6mm×250mm)为色谱柱,甲醇∶水:磷酸=47∶53∶0.2为流动相,流速∶1.0mL.min-1,检测波长:280mm,柱温:31℃。结果黄芩配伍柴胡,黄芩苷煎出量均比黄芩单煎高,平均提高15.3%,其中黄芩与柴胡2∶1配伍比例黄芩苷煎出量最大。结论说明黄芩配伍柴胡有利于黄芩苷煎出,从而使黄芩苷煎出量增加。     

一测多评法同时测定扶正固本颗粒中6种成分的含量

目的:建立扶正固本颗粒中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等6种成分含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为275 nm(0～8 min)、320 nm(8～9...     

灯盏乙素聚乙二醇前药的合成与表征

目的:合成黄酮类化合物灯盏乙素聚乙二醇前药。方法:以聚乙二醇单甲醚2000为原料,与琥珀酸酐反应后再与N-羟基琥珀酰亚胺缩合得到活泼酯,最后与灯盏乙素反应得到目标化合物。结果:分别用FT-IR、1HNMR和质谱对其结构进行了表征,并初步测定了其在水中的溶解度。结论:高分子前药水溶性大大提高,为延长药物体内半衰期及提高生物利用度提供了可能。     

热炎宁颗粒质量标准研究

目的:制定热炎宁颗粒的质量标准.方法:采用薄层色谱法对方中蒲公英、虎杖、半枝莲进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对大黄素、野黄芩苷进行含量测定.结果:薄层鉴别均斑点清晰,阴性对照无干扰.含量测定中大黄素对照品进样量在0.0432-0.2160μg范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9983);其平均回收率为98.83%,RSD%为1.29%.野黄芩苷对照品进样量在0.04188-0.8376μg范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9998);其平均回收率为97.85%,RSD%为1.71%.结论:所建立方法操作简单,专属性和重现性良好,可作为该制荆的质量控制方法.     

反相高效液相色谱法测定花芪通脉颗粒中灯盏乙素的含量

目的建立测定花芪通脉颗粒中灯盏乙素含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法RP-HPLC,ZORBAX-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.01 mol.L-1磷酸缓冲液PH为5.2(35∶65)为流动相,检测波长335 nm,流速0.8 m l.m in-1,柱温25℃。结果灯盏乙素在0.74~3.70μg范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 6,灯盏乙素平均加样回收率为97.4%,RSD为0.98%(n=5)。结论:该方法可靠性高,准确性和重现性好,适用于花芪通脉颗粒中灯盏乙素的含量测定。