以前胡为例,探讨中药活性成分研究的思路与方法

前胡为中国药典收载的常用中药，我们在对其化学成分和生物活性深入系统研究的过程中，逐渐形成了对中药活性成分研究思路和方法的认识。本文主要结合我们长期的研究工作，综述了1993年后中药前胡在化学成分、质量标准、资源开发、有效成分的结构修饰与全合成以及药理活性方面的研究近况，其主要目的是介绍如何以前胡活性成分研究为基础，全面提高中药前胡的研究水平，并为新药开发奠定基础。对前胡的研究已初步建立起了活性成分的现代化研究模式，期望其研究思路与方法能为其它中药活性成分的研究提供参考。     

龙胆斑枯病有效调控及其与药材产量和质量的相关性研究

龙胆斑枯病是龙胆栽培过程中的主要病害。本文通过田间试验及实验室研究,探讨了龙胆斑枯病的发病规律及病害对产量和质量的影响,并从农业措施、土壤与种苗处理、化学农药防治和中药防治等角度提出了有效防治措施。研究表明:黑龙江龙胆斑枯病的病原菌为Septoria mi- crospora speg．和Septoria gentianae Thum．;农学措施防治研究表明优质健壮种苗、较高的栽培密度、与高杆作物间作可有效缓解龙胆斑枯病;就有效成分而言,獐牙菜苦苷含量与病情之间无明显规律性,但龙胆苦苷含量随病情指数增加而呈现下降趋势;植物新农药防治龙胆斑枯病药效试验表明,9种中药乙醇提取物对龙胆斑枯病病菌（Septoria microspora Speg．）均有不同程度的抑制作用。     

康媛颗粒质量标准研究

目的:为更好的控制康媛颗粒的质量。方法:采用薄层色谱法对当归、白芍和黄芪进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对芍药菩进行含量测定,色谱柱为:Phenomenex Prodjgy ODS-3(4.6mm×150mm,5μm);流动相为:0.05mol/L 瞵酸二氢钾—乙腈(75:15);检测波长为230nm。结果:当归、白芍和黄芪的定性鉴别,阴性无干扰,斑点清晰,分离度良好。芍药苷在0.49—4.89μg 范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.6%,RSD=0.97%。结论:方法简便,准确,重现性良好,可用于康媛颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定三七药材中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量

目的采用HPLC方法测定三七药材中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量.方法色谱条件,以Kromasil C18柱 (4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸 (25∶75)为流动相,检测波长203nm;流速1.5mL·min-1.结果人参皂苷Rgl在0.52～10.36μg内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 92,n=7),三七皂苷R1在0.20～4.05μg内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 98,n=7).人参皂苷Rgl的回收率为97.4%～98.9% (n=9),三七皂苷R1的回收率为93.6%～96.0% (n=9).结论本方法分离度好,快速,简便,重现性好,可用于三七药材的质量控制.     

赤芍拮抗内毒素活性的实验研究

目的:提取分离中药赤芍中拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行药理学活性检测。方法:通过生物传感器,结合常规的中药分离技术,分离提取出赤芍拮抗LPS的有效成分,应用鲎实验和ELISA法检测该有效成分对LPS的中和作用。结果:赤芍中的有效成分与LPS具有较高的结合作用,该结合作用具有较强的中和LPS活性,在体外能够显著抑制由LPS介导小鼠RAW 2 6 4.7细胞释放TNF α。结论:以LPS为靶点,应用生物传感器技术,可快速、有效地提取分离赤芍中具有较强的中和LPS活性的有效成分。     

八味地黄汤各药味对附子生物碱影响的电喷雾质谱研究

目的以八味地黄汤为研究对象,考察各药味对附子生物碱的影响规律,揭示附子配伍组方的科学内涵,为科学阐释八味地黄汤配伍规律提供化学依据。方法利用电喷雾质谱技术分别对八味地黄汤,附子加山茱萸、山药、肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓共煎液以及次乌头碱加山茱萸、山药共煎液进行系统考察。结果次乌头碱加山药、山茱萸,附子加山药等共煎液中次乌头碱含量较高;八味地黄汤、附子加山茱萸共煎液中次乌头碱含量较低;肉桂、丹皮、泽泻、地黄、茯苓等对附子生物碱的影响不明显。结论八味地黄汤中乌头碱和中乌头碱水解和溶出比较完全,次乌头碱的含量较少,次乌头碱的减少是由于水解以及溶出受到抑制导致。其中山茱萸对制附子起减毒作用,其减毒机制主要是抑制了制附子中次乌头碱的溶出。而山药则能导致附子毒性增加。     

独活种子发芽特性研究

目的探讨独活种子的发芽率低的原因,以及适宜发芽条件,为大田生产奠定基础。方法采用去果皮、清水以及GA浸种等方法处理种子,在不同的温度和光照条件下,检测种子的发芽情况。结果清水浸种24h可提高发芽率13.7%,去果皮可提高种子发芽率10.6%;在浸种24h条件下,与暗培养相比,光照可提高发芽率16.6%;适宜发芽温度为20℃,高温对独活种子萌发具有抑制作用。结论独活种子中存在发芽抑制物质,光照可促进种子发芽。     

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的:　观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg^-1·d^-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg^-1·d^-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg^-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg^-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。     

党参皂苷L1抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠皮质神经细胞凋亡的作用

目的:以原代培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞进行缺氧缺糖再给氧处理,观察党参皂苷L1对神经细胞凋亡的抑制作用.方法:胚胎大鼠大脑皮质神经细胞原代培养,含连二亚硫酸钠的无糖Earles液进行缺氧/缺糖处理造模,MTT法测定细胞存活率,Hoechst 33342和PI原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死、凋亡细胞百分率,APO-BRDU法流式细胞术检测凋亡细胞百分率,Fluo-3法流式细胞术检测细胞内Ca2 浓度,评价药效.结果:(1)细胞存活率(%):与模型组(29.89±6.28)比较党参皂苷L1 1.0mg/L组(46.05±8.92)、0.1mg/L组(46.83±6.76)、0.01mg/L组(41.05±9.18)均能显著提高细胞存活率(P<0.01和P<0.05);(2)细胞坏死率(%):与模型组(44.99±12.81)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(19.45±2.31)、0.1mg/L组(18.78±4.95)和0.01mg/L组(22.37±4.44)能显著降低细胞坏死率(P<0.001);(3)原位双染法细胞凋亡率(%):与模型组(17.44±4.82)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(8.75±1.88)、0.1mg/L组(9.73±1.76)能显著降低细胞凋亡率(P<0.01和P<0.05);(4)流式细胞术检测细胞凋亡率(%):与模型组(8.55±3.84)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(4.21±2.31)、0.1mg/L组(3.83±2.95)能显著降低细胞凋亡率(P<0.05);(5)细胞内Ca2 平均荧光值,与模型组(47.37±9.68)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(28.67±11.12)、0.1mg/L组(27.34±8.57)能显著降低细胞内Ca2 平均荧光值(P<0.05),表明党参皂苷L1能明显降低细胞内Ca2 浓度.结论:党参皂苷L1对缺血再灌注损伤后神经细胞的坏死和凋亡过程均具有抑制作用,这种作用可能与其能降低细胞内Ca2 浓度有关,提示党参皂苷L1是党参治疗脑卒中急性期的主要效应成分.     

生大黄与酒炙大黄不同溶剂提取液中游离蒽醌、结合蒽醌的含量比较

目的:通过大黄不同炮制品的水煎液和甲醇提取液中结合蒽醌类化合物的含量比较研究,探索酒炙大黄泻下力缓与结合蒽醌含量的关系.方法:采用分光光度法分别测定不同炮制品水煎液、甲醇提取液中游离蒽醌、结合蒽醌的含量.结果:水煎液中,游离蒽醌生品与炮制品相差不大,但是结合蒽醌酒炙品比生品高的多;而甲醇提取液中,生品的游离蒽醌、结合蒽醌均较酒炙品高.结论:临床汤方,多为水煎,用结合蒽醌含量减少来解释酒炙大黄缓泻作用可能并不完全,酒炙大黄缓泻的真正原因可能需要从多个层次上进行探讨.