南方红豆杉多糖对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

〔摘 要〕 目的：探究南方红豆杉多糖对宫颈癌 HeLa 细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法：经体外培养并取对数生长期人宫颈癌 HeLa 细胞,分别予以不同浓度红豆杉多糖（30、60、90、120 μmol·L-1）,将其设为四组,并设对照组加入等量 0.9 % 氯化钠溶液。应用 MTT 法检测细胞增殖情况,流式法检测细胞凋亡情况,Western blot 法检测 Survivin、Caspase–3、Bcl–2、P53 蛋 白 表 达 情 况。 结果： 与 对 照 组 相 比,30 μmol·L-1 组、60 μmol·L-1 组、90 μmol·L-1 组、120 μmol·L-1 组的宫颈癌 HeLa 细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著升高,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。P53 蛋白表达量明显升高,Survivin、Bcl–2、Caspase–3 蛋白表水平显著降低,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：南方红豆杉多糖可抑制宫颈癌 HeLa 细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调 Survivin、Bcl–2、Caspase–3 表达,上调 P53 表达有关。     

五味子有效成分提取分离方法的研究进展

五味子为我国传统的中药之一,具有多种药用功效,该文对近些年来五味子多种有效成分的提取分离方法做一综述,以利进一步的研究与开发利用。     

中华猕猴桃根的化学成分研究

目的：研究中华猕猴桃Actinidia chinensis根的化学成分。方法：中华猕猴桃根的95％乙醇提取物,依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,应用多种色谱技术对醋酸乙酯部分进行分离纯化,通过波谱数据分析(MS,IR,¹H-NMR,¹³C-NMR)进行结构鉴定。结果：从醋酸乙酯部分分离得到7个化合物,经鉴定为2α-羟基齐墩果酸(1),2α-羟基乌苏酸(2),蔷薇酸(3),23-羟基乌苏酸(4),3β-O-乙酰乌苏果酸(5),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(6),β-谷甾醇(7)。结论：所有化合物均为首次从该植物中分离鉴定。     

五味子PLR基因及其启动子的克隆与表达分析

目的从五味子中克隆木脂素生物合成途径松脂醇-落叶松脂素还原酶(Pinoresinol-lariciresinol reductases,PLR)基因及其启动子序列,并进行生物信息学与表达分析。方法根据转录组PLR测序序列设计特异性引物,克隆ScPLR并进行生物信息学分析;采用TAIL-PCR对Sc PLR启动子序列扩增,并进行序列分析;采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析果实不同发育时期ScPLR的表达。结果 Sc PLR基因开放阅读框(ORF)全长837bp,编码278个氨基酸;ScPLR蛋白相对分子质量31419.85,理论等电点8.97;具有跨膜结构,无信号肽,为稳定性疏水蛋白,主要由α-螺旋和无规卷曲构成;亚细胞定位预测Sc PLR主要定位于细胞质;系统进化显示Sc PLR与蓖麻PLR亲缘关系较近。克隆到Sc PLR基因启动子长994bp,具有TATA-box、CAAT-box基本元件、光调控、生长素响应、厌氧诱导、防御和应激反应的多种调控元件;qRT-PCR结果显示ScPLR表达量呈现果实膨大期快速增加而进入着色期迅速降低的变化趋势。结论获得了Sc PLR基因及其启动子序列,ScPLR果实着色期之前高水平表达的趋势和木脂素的动态变化相一致,为进一步研究该基因功能及表达调控奠定了理论基础。     

当归与五味子挥发油的超临界CO2萃取工艺

目的探讨当归与五味子及由二者组成的复方的超临界萃取工艺.方法应用超临界装置,用CO 2 萃取当归与五味子及其复方,以萃取油为考察目标,摸索不同工艺条件的影响规律.结果在萃取物粒径一定、CO 2 流量控制在5.0L·min -1 的条件下,提取率与萃取压力、温度和萃取物的组成密切相关.单味当归与五味子及复方的提取率随萃取压力升高而增大;随着萃取温度的增高,单味当归的提取率下降,而单味五味子的提取率增大.在相同的工艺条件下,其复方的提取率高于数学加权值.结论在超临界CO 2 萃取过程中,复方的提取率并不简单地等于单味提取率的数学加权值,组成也是影响提取率的重要因素.     

九香虫抗凝血作用的研究

目的研究九香虫的抗凝血作用。方法采用毛细玻管法观察九香虫水煎液对正常小鼠及"寒凝血瘀"模型小鼠凝血时间的影响,研究其体内抗凝血作用;通过二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集试验,考察九香虫水煎液的体外抗凝作用。结果九香虫水煎液灌胃给药可显著提高正常小鼠及"寒凝血瘀"模型小鼠的凝血时间,九香虫低(0.03g/Kg)、中(0.05g/Kg)、高(0.1g/Kg)剂量组的药效作用呈现量效关系,但当剂量升高至1g/Kg及以上时,发现作用效果反成下降趋势,提示小剂量优于高剂量;九香虫水煎液体外可抑制家兔血小板聚集。结论九香虫水煎液具有明显的抗凝血作用。     

Cytotoxic effects of Coptis chinensis and Epimedium sagittatum extracts and their major constituents (berberine, coptisine and icariin) on hepatoma and leukaemia cell growth

1. The present study was conducted to evaluate the cytotoxic effects of Coptis chinensis and Epimedium sagittatum extracts and their major constituents on hepatoma and leukaemia cells in vitro. 2. Four human liver cancer cell lines, namely HepG2, Hep3B, SK-Hep1 and PLC/PRF/5, and four leukaemia cell lines, namely K562, U937, P3H1 and Raji, were used in the present study. 3. Of the two crude drugs, C. chinensis exhibited the strongest activity against SK-Hep1 (IC50 = 7 microg/mL) and Raji (IC50 = 4 microg/mL) cell lines. The IC50 values for C. chinensis on HepG2, Hep3B and PLC/PRF/5 cell lines were 20, 55 and 35 microg/mL, respectively. The IC50 values for C. chinensis on K562, U937 and P3H1 cell lines were 29, 29 and 31 microg/mL, respectively. 4. With the exception of HepG2 and Hep3B, the E. sagittatum extract inhibited the proliferation of all cell lines (SK-Hep1, PLC/PRF/5, K562, U937, P3H1 and Raji), with IC50 values of 15, 57, 74, 221, 40 and 80 microg/mL, respectively. 5. Interestingly, the two major compounds of C. chinensis, berberine and coptisine, showed a strong inhibition on the proliferation of both hepatoma and leukaemia cell lines, with IC50 values varying from 1.4 to 15.2 microg/mL and from 0.6 to 14.1 microg/mL, respectively. However, icariin (the major compound of E. sagittatum) showed no inhibition of either the hepatoma or leukaemia cell lines. 6. The results of the present study suggest that the C. chinensis extract and its major constituents berberine and coptisine possess active antihepatoma and antileukaemia activities.     

合蕊五味子中两个新的三萜内酯及其在生物合成途径中的意义

目的：研究合蕊五味子（Schisdndrapropinqua var.propinqua）地上部分化学成分。方法：利用正反相硅胶、高效液相色谱等现代分离技术进行分离,利用IR,UV,MS和NMR等现代波谱技术手段鉴定了它们的结构。结果：分离得到两个分别具有3,4-seco—cycloartane和3,4：9,10-seco—cycloartane型骨架的新三萜内酯：propiniclactnnesA（1）和B（2）;同时分离得到了一个典型的cycloartane骨架三萜类化合物。结论：这两个新化合物在生源合成途径上具有重要意义,它们可能是连接cycloartane骨架三萜和schisandra降三萜骨架的重要中间体。     

开口箭乙醇提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡活性研究

目的探讨开口箭根部乙醇提取物(ERT-95)对肝癌细胞HepG2生长的影响及其抗肿瘤作用的可能机制。方法采用MTT法绘制HepG2细胞生长曲线,检测ERT-95对HepG2细胞的生长抑制作用;采用光学显微镜观察HepG2细胞的凋亡形态变化;采用Hochest染色原理检测HepG2细胞凋亡情况;采用Western blot检测Cyt C蛋白的表达;采用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3、caspase-9的活性变化;采用DNA ladder凝胶电泳技术检测DNA的裂解情况。结果 MTT结果显示,ERT-95对HepG2细胞的抑制作用呈剂量依赖性(IC50为52.57μg·mL-1);光学显微镜下,处理组细胞出现皱缩、变圆等形态变化;Hochest-33258染色后的处理组细胞呈现典型的凋亡结构;Western blot结果显示,随着药物浓度增加,Cyt C蛋白表达上调;caspase活性检测显示,caspase-3、caspase-9活性逐步升高;与对照组相比,处理组琼脂糖凝胶电泳图谱出现DNA条带。结论ERT-95有显著的体外促肿瘤细胞凋亡作用,初步研究其促肿瘤细胞凋亡机制是通过线粒体释放Cyt C,进一步活化caspase-9和caspase-3而激活内源性核酸内切酶,导致DNA裂解而实现的。     

高效液相色谱法测定苦荬菜中木犀草苷和菊苣酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定不同产地苦荬菜中木犀草苷和菊苣酸的含量.方法:采用COSMOSIL?C18(4.6?mm×250?mm,5?μm),以乙腈-0.1％磷酸水溶液(18︰82)为流动相,流速:1.0?mL/min;检测波长:330?nm;柱温:40?℃.结果:木犀草苷在0.092～1.84?μg范围内线性关系良...