虎杖-桂枝药对配伍对大鼠慢性高尿酸血症和肾、肠尿酸转运体表达的影响

目的:研究虎杖-桂枝药对配伍对大鼠高尿酸血症的防治作用及对尿酸盐阴离子转运体1(URAT1),有机阴离子转运蛋白3(OAT3),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2(ABCG2)表达的影响。方法:84只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,苯溴马隆组(10 mg·kg~(-1)),痛风定组(160 mg·kg~(-1))和虎桂低、中、高剂量组(3.5,7,14 g·kg~(-1))。以皮下注射氧嗪酸钾(200mg·kg~(-1))和ig次黄嘌呤(50 mg·kg~(-1))和乙胺丁醇(250 mg·kg~(-1))的方法,建立高尿酸血症大鼠模型。第4天开始各组大鼠ig给予相应药物,每天1次,连续2周,测定血尿酸(SUA),尿尿酸浓度(UUA),肌酐(Cr),尿素氮(BUN),谷丙转氨酶(GPT)水平;以RT-PCR方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3和小肠ABCG2的mRNA表达水平,以Western blot方法测定大鼠肾脏URAT1和OAT3的蛋白表达水平;以免疫组化方法测定大鼠小肠ABCG2的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸水平显著升高,尿尿酸排泄减少,肾脏URAT1 mRNA和蛋白高表达,肾OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白低表达,具有明显统计学差异(P0.01)。与模型组比较,虎桂药对高中剂量组能显著降低血尿酸和尿素氮水平,增加24 h尿酸排泄量;虎桂药对高中剂量组能显著降低肾脏URAT1 mRNA和蛋白表达量水平,升高肾脏OAT3和小肠ABCG2 mRNA和蛋白的表达量水平,均具有明显统计学差异(P0.01,P0.05)。结论:虎桂药对有明显的抗高尿酸血症作用,可能是通过下调大鼠肾脏URAT1的表达,并上调大鼠肾脏OAT3和小肠ABCG2的表达而减少尿酸的重吸收并增加其排泄。     

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定

目的 研究和探讨钩藤药材中钩藤碱与异钩藤碱的最佳提取与含量测定方法.方法 采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-0.01 mmol·L-1三乙胺水溶液(70:30,冰醋酸调pH 7.0)为流动相;流速:0.5 mL·min-1;柱温:30℃;进样器温度:5℃;检测波长为245 nm,测定和考察钩藤不同时间的水煎液和不同条件下甲醇冷浸超声提取液中主要有效成分钩藤碱和异钩藤碱含量的变化.结果 钩藤碱回归方程Y=76.7170X-0.0727(r=0.999 8),在2.5～80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率99.84%～116.91%,RSD小于8.8%;异钩藤碱回归方程Y=87.4729X-0.3666(r=0.999 7),在2.0～80.0μg·mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率87.08～104.97%,RSD小于7.3%;甲醇冷浸超声提取液中钩藤碱与异钩藤碱的提取率大约是水煎液中的十倍.在甲醇提取工艺中,影响提取率的因素从大到小依次为超声时间、甲醇用量、冷浸时间,经正交实验优选的最佳提取工艺为用20倍质量的甲醇,冷浸24h,超声60min.结论 钩藤药材中有效成分钩藤碱与异钩藤碱的提取,采用甲醇冷浸超声法优于水煎法.该含量测定方法快速、简便、准确,可为评价钩藤药材的质量提供依据.     

不同剂量的黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变患者的对比研究

目的比较不同药物剂量的黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变(DPN)患者的临床疗效。方法将68例DPN患者随机分为观察组和对照组各34例,两组均给予基础治疗及黄芪桂枝五物汤加减,其中对照组药物剂量按1两等于9g计算;观察组药物剂量按1两等于15g,两组均每日1剂,连用8周。于治疗前后分别检测肝肾功能及腓神经传导速度(NCV)变化,并判定临床疗效。结果观察组总有效率为91.2%,对照组总有效率为70.6%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组患者治疗后NCV均较治疗前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后两组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前后均无肝、肾功能异常及其他不良反应。结论药物剂量按1两等于15g换算的黄芪桂枝五物汤加减可明显提高DPN的临床疗效,并优于药物剂量按1两视为9g计算,而且未见明显毒副作用。     

中药桂枝的HPLC指纹图谱研究

目的:建立中药桂枝的指纹图谱,为其质量控制和药材鉴别提供理论依据。方法:高效液相色谱法,色谱柱:Krom a-sil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%醋酸水溶液(梯度洗脱);检测波长:280 nm,温度:25°C,流速:1 mL/m in。结果:确定了桂枝HPLC中桂皮醛、肉桂酸、邻甲氧基肉桂酸、香豆素所对应的保留时间;不同产地的桂枝HPLC指纹图谱有很大的相似。结论:桂枝的HPLC指纹图谱可用于药材鉴别和质量控制。     

桑叶中总黄酮纯化工艺研究

应用大孔吸附树脂技术,筛选桑叶总黄酮最佳纯化工艺。结果表明：AB-8树脂对桑叶总黄酮的纯化效果最佳,最佳工艺定为：径高比为1：9,供试液pH为4,浓度为生药量0．4g·mL-1,上样速度为4BV·h-1,洗脱液为70％乙醇,洗脱体积为2BV。     

HPLC测定桑叶及其炮制品中绿原酸含量

目的：建立桑叶及其炮制品中绿原酸的含量测定方法,考察桑叶炮制前后绿原酸的含量变化。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为AgilentXDB-C18,流动相为甲醇-0.01mol·L^-1磷酸二氢钾（19∶81）,pH=3.58,检测波长为328nm,流速为1.0mL·min^-1,柱温为35℃。结果：绿原酸进样量在0.25～3.0μg呈良好线性关系,r=0.9999,平均回收率为97.0%,RSD=3.32%（n=5）。桑叶药材与生品中绿原酸含量显著高于蜜炙品,不同地区药材绿原酸含量高低依次为河北〉安徽〉浙江〉江苏〉湖南。结论：本方法简单、准确,能有效用于桑叶及其炮制品的质量控制。     

基于网络药理学和分子对接探讨钩藤-全蝎药对治疗支气管哮喘的作用机制＊

目的通过网络药理学和分子对接探究钩藤-全蝎药对治疗支气管哮喘的药理作用机制。方法通过TCMSP、TCMIP数据库搜集钩藤、全蝎的活性成分及其作用靶点,并使用Cytoscape软件进行可视化分析成分-靶点网。通过OMIM、GeneCards数据库搜集支气管哮喘的疾病靶点,整合钩藤-全蝎药对与支气管哮喘的共有靶点。利用String平台构建对共有靶点互作PPI网络,并进行GO和KEGG富集分析,通过Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络模型。最后通过Autodock分子对接进行验证。结果经过筛选发现钩藤-全蝎药对37个活性化合物和234个药物靶点,与哮喘6010个靶点取交集得到35个共有靶点。钩藤-全蝎包含槲皮素、山奈酚、育亨宾碱、β-谷甾醇等重要活性成分;根据PPI网络分析,核心网络连接度高的潜在治疗靶点有IL6、CASP3、ECFR、ESR1、MAPK8等;根据KEGG富集分析结果显示,钩藤-全蝎药对主要通过PI3 K-Akt信号通路、TNF信号通路,HIF-1信号通路、M APK信号通路、NF-κB信号通路等来治疗哮喘;钩藤-全蝎药对活性成分与核心靶点的分子对接结果均显示出较好的结合活性。结论钩藤-全蝎药对治疗哮喘呈现出多成分、多靶点、多通路的特点,其核心成分槲皮素、山奈酚、育亨宾碱、β-谷甾醇等可能通过CASP3、MAPK8、ESR1、IL6、ECFR等靶点调节多条通路发挥抗炎、调节免疫、抗氧化应激、改善气道重塑等作用,从而对哮喘达到有效的治疗。     

痛风克方中寒热药对不同配比对大鼠痛风模型的影响

目的:研究痛风克方中虎杖桂枝寒热药对的不同配比对大鼠痛风病理模型的影响.方法:选用SD大鼠,分为正常组、模型组、秋水仙碱0.02 g·kg-1组、虎杖-桂枝=3:1 7.5g·kg-1组(A组),虎杖-桂枝6:1 9.3 g·kg-1组(B组),(虎杖+土茯苓)-桂枝6:1 9.3 g·kg-1组(C组),各组均连续ig给药7d,给药第5天运用微晶型尿酸钠(MSU)法造模.注射MSU混悬液造模后1,2,6,8,12,24h期间,量度各组大鼠足踝关节下0.5 mm处直径和圆周长,计算出足肿胀率;造模2d后于眼眶后静脉取血检测大鼠血清尿酸及PGE2水平;摘取右后足踝关节于光镜下观测大鼠足踝关节滑膜组织变化及病理形态学改变.结果:各组方对足肿胀均能起到不同程度的抑制效果,C组方在致炎后24h足肿胀率为18.2％,仍显示出明显的抑制作用(P＜0.05);B、C组方均能降低大鼠血清尿酸水平,分别为77.8 μmol·L-1和60.1 μmol· L-1 (P ＜0.05),降低PGE2水平,分别为9-0 pg·L-1和9.1 pg·L-1(P＜0.05),对改善足踝关节滑膜组织炎症均有较好效果,炎症变化分值可降至0.7;病理观察显示,C组滑膜及周围软组织内见少量炎细胞浸润,部分小血管扩张充血;B、C组方在各项检测指标上均优于其它组别.结论:痛风克方中寒热药对以6:1进行配伍是较好的配伍比例,对大鼠痛风病理模型的足肿胀度、血清尿酸及PGE2水平和足踝关节滑膜组织病理改变都有较好的改善作用.     

桂枝汤的药理学研究 五、加味、减味桂枝汤和桂枝汤的药理作用比较

比较了桂枝汤和桂枝去芍药汤、桂枝加桂汤、桂枝加芍药汤的实验药理作用差别,发现四方均能抑制流感病毒性肺炎、提高感染小鼠的网状内皮系统廓清能力,抑制皮肤迟发性超敏反应,作用均以桂枝汤最强,其次为桂枝加桂汤。桂枝汤、桂枝加桂和桂枝加芍药汤具有镇静作用,以桂枝加桂汤最强。桂枝加芍药汤、桂枝加桂汤和桂枝汤依次有镇痛作用。四方对正常肠蠕动功能无明显有规律的影响,但均能使亢进的肠蠕动抑制。实验结果与《伤寒论》对四方所述解表、调和营卫,治胸满、脉促,奔豚气和腹满时痛的主证大体吻合。