乌梅及其六种伪劣品的鉴别

乌梅中医临床内服外用均有奇效,但常被杏、山杏、山李、桃、陈乌梅、诃子等伪劣品所混淆,从来源鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别四方面可将它们相互鉴别区分开来。     

人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定

目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法,提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20 cm)冲净淤血,采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液,一根用0.2%胶原酶Ⅱ,另一根用0.1%胶原酶Ⅰ和0.25%胰酶等比混合消化液,比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10 ng/mL的VEGF的培养基中培养,观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术观察细胞周期。结果两种消化酶方法均获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞,胶原酶Ⅱ的消化效果稍优于混合消化酶,且比较理想的消化时间均为13 min,细胞接种后4～5 h开始贴壁生长,1周左右可生长成单层,光镜下呈多角形,"铺路石"样排列,免疫组织化学法可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。细胞周期显示约有50.6%的细胞处于G0/G1期。结论胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅰ与胰酶等比混合消化液灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法,而胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液,成功率高,可靠性大,可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型。     

偏光显微镜在中药鉴定中的应用

偏光显微镜用于观察具有偏光特性的中药粉末,具有快速准确并能排除干扰的作用,因此成为显微鉴定的常用方法。综合有关文献资料并结合作者工作经验,归纳了近年来偏光显微镜在中药显微鉴定方面的应用.      

前列舒乐泡腾片质量标准研究

目的:研究与修订前列舒乐泡腾片的质量标准。方法:化学鉴别法鉴别复方中药中的川牛膝和车前草;薄层色谱法鉴别中药复方中的蒲黄和黄芪。高效液相色谱法测定淫羊藿苷的含量,色谱柱为Polairs C18(150×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),检测波长270nm,流速1.0mL/min。结果:在薄层色谱中可鉴别出黄芪、蒲黄,无阴性干扰。淫羊藿苷在0.0493~0.4437μg范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率(n=6)为99.33%(RSD=1.28%)。结论:该定性定量方法简便易行,重现性好,可作为前列舒乐泡腾片的质量标准基础。     

我国突发公共卫生事件风险识别、评价和缓解能力的现状

目的了解我国突发公共卫生事件风险识别、评价和缓解能力的现状。方法采用分层抽样随机抽取4个省(市)作为调查样本,采用卫生部统计信息中心编制的《省/地市级突发公共卫生事件应对能力评价问卷》进行调查。结果共发放问卷66份,问卷回收率为90.91%。58%的地市(州)识别了当地可能发生的突发公共卫生事件,28%的地市(州)对所识别的突发公共卫生事件进行了风险评价,8%的地市(州)对当地易发生事故的厂矿企业及大型设施进行了风险评价,10%的地市(州)根据风险评价结果确定了当地突发公共卫生事件工作重点,10%的地市(州)针对主要突发公共卫生事件制定了专门预防策略,5%的地市(州)对当地居民的脆弱性进行了评估,57%的地市(州)开展过或正在开展应对能力评价工作,4省(市)突发公共卫生事件风险识别、评价和缓解能力的平均标准分为24.05,总体均数的95%置信区间为(18.32,29.77)。结论风险识别、评价和缓解工作在我国的突发公共卫生事件管理中重视程度不够,政府应采取措施提高此方面的应对能力。     

PDGFR单克隆抗体的制备和鉴定

目的 通过谷胱甘肽转硫酶偶联的血小板衍生因子受体氮端的融合蛋白(GST-PDGFR-N)制备有生物活性的单克隆抗体.方法 用GST-PDGFR-N融合蛋白作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗PDGFR的单克隆抗体,用间接ELISA、Western blot、免疫组化等方法对抗体的抗原结合特性进行鉴定.结果 获得两株能稳定分泌抗PDGFR单克隆抗体的细胞3B12F5和3C6H7C11,亚类鉴定两种单抗均为IgG1.间接ELISA法测定两株细胞腹水抗体的效价分别为1:102400为和1:25600.Western blot法显示PDGFR单克隆抗体特异性地识别免疫原和胶质瘤细胞株U251中的抗原成分.细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别胶质瘤细胞株U251和膀胱癌细胞株BIU87中表达的PDGFR抗原.结论 成功制备PDGFR单克隆抗体,为研究PDGFR的表达情况和临床检测提供了一个有用的工具.     

PICK1基因敲除小鼠的繁育及子代基因型的鉴定

目的 探讨蛋白激酶Cα相互作用蛋白(PICK1)基因敲除小鼠的优化繁育方法及 PICK1 基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,为进一步研究 PICK1蛋白的功能奠定基础.方法 用 6 种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性PICK1 基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组 DNA,用 PCR 方法扩增 PICK1 基因片段,电泳后观察结果.结果 PICK1 / 、PICK1 /-、PICK1-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌性PICK1 基因突变纯合子小鼠有繁殖能力,雄性PICK1 基因突变纯合子小鼠无繁殖能力.琼脂糖凝胶电泳显示PCR 产物分子量大小为 400 bp 和 200 bp,与目的 基因片段相对分子质量大小一致.结论 雌、雄性PICK1 基因突变杂合子小鼠交配是繁育PICK1 基因突变纯合子子鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定PICK1 基因突变纯合子子鼠,为PICK1 蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型.     

叶绿体DNA序列分析在药用植物鉴定中的应用

随着DNA测序技术的发展,叶绿体DNA序列分析被广泛应用于药用植物鉴定和品质研究等方面。本文介绍了近年来叶绿体DNA序列分析在植物系统学和药用植物研究中的应用,认为其在药用植物品种鉴定和伪品鉴别、保护种质资源以及扩大新药源等领域有广阔的应用前景。     

白术总黄酮鉴别及含量测定

目的:为了充分利用白术植物药材,首次鉴定证实白术中含黄酮类化合物,并用分光光度法对其进行含量测定。方法:采用乙醇浸提法从白术中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果:测得生白术总黄酮的含量1.329%,焦白术总黄酮的含量为1.136%。结论:白术药材中含黄酮类物质,炮制方法对黄酮含量有一定的影响。可见分光光度法测定,方法简便、有效。     

新生大鼠心脏微血管内皮细胞的分离培养及鉴定

目的:介绍一种改良的心脏微血管内皮细胞(CMECs)的分离培养及鉴定方法。方法:应用酶消化法分离大鼠CMECs,再用差速贴壁进行纯化。结果:用光学显微境、免疫细胞化学法进行第Ⅷ因子相关抗原染色来鉴定CMECs,其纯度约98%。结论:该法简单且经济。