淋巴细胞活性检测方法研究

目的 探讨淋巴细胞活性检测最佳方法,以提高检测灵敏度和稳定性,降低本底.方法 用传统的实验方法和改进的实验方法分别对不同数量的外周血单核细胞进行检测,比较不同实验方法的准确性、灵敏度和稳定性.结果 在不吸除培养基的情况下,传统的DMSO和酸性异丙醇都不能完全融解formazan,影响了检测.传统的酸性SDS能够很好的融解formazan,但是得到的OD值太小,这就降低了检测的灵敏度,容易造成测量误差,而改进的10%SDS溶液能够完全融解formazan,并且得到的OD值适中,能够客观的反应细胞数目的变化,减少数值引起的实验误差.结论 用改进10%SDS作为溶解formazan的溶解液,可以准确地反应活细胞的数目变化情况,对淋巴细胞这类悬浮细胞来说.在不吸除上清的情况下进行细胞数目的检测更加方便.     

蜂毒素体外抑瘤作用的实验研究

目的：研究蜂毒素对建系肿瘤细胞体外生长的抑制作用。方法：通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中纯化得高纯度蜂毒素,分别选取SMMC－7721、BEL－7402和Hep-3B三种肿瘤细胞系,以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察蜂毒素对3种肿瘤细胞系的生物抑制作用,以丝裂霉素、长春新碱、华蟾素为对照;并考察了蜂毒素对SMMC－7721细胞系的生长抑制作用的时效关系。结果：蜂毒素的抑瘤作用与剂量呈正相关,抑制率优于对照组药物,蜂毒素对SMMC－7721细胞系各时间点的抑瘤率无显性差异。结论：蜂毒素的体外抑瘤作用明显,而且作用发生迅速。     

琼脂培养MTT法测定肺癌和卵巢癌药物敏感性的临床评价

目的 评价琼脂培养MTT法（简称MTT法）测定肿瘤细胞对化疗药物敏感性的临床应用价值。方法 应用人肿瘤干细胞集落形成能力测定（HTSCA）和MTT法同时对人肺癌细胞进行药物敏感性测定,并对结果进行共同相关性分析;同时,回顾性观察MTT法测定卵巢癌患者对顺氯氨铂（DDP）的体外敏感性与临床疗效关系;前瞻性观察通过MTT法测定药物敏感性结果指导临床选择有效药物对肺癌化疗效果的影响。结果 ①MTT比色法和HTSCA同时可供药敏分析的药物浓度次是126,两法测定结果的总符合率是92．8％（117／126）。②MTT法测定的卵巢癌细胞对DDP体外敏感性与临床疗效相关,总符合率是92％（24／26）。③MTT法药敏预测指导人肺癌化疗组临床有效率（91．2％）,较常规方案化疗组（53．3％）明显增高（P＜0．05）。结论 MTT法测定人实体瘤体外药物敏感性具有指导临床化疗的价值。     

应用四唑盐比色法对5种骨水泥的细胞毒性的测试

0　引言　应用细胞培养法对牙科材料的生物相容性进行评价是一种简便、有效、经济的方法 .近年来 ,国内外有许多学者报道用 MTT检测细胞活性 ,并认为用 MTT法可以代替活细胞计数、同位素标记进行细胞毒性试验 .我们应用 MTT法对 5种骨水泥的细胞毒性进行了评价 ,并对有关问题进行了讨论 .1　材料和方法1.1　测试材料　 1号 :生物水泥 ,2号 :羟基磷灰石人工骨 ,3号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 1号 (自制 ) ,4号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 2号 (自制 ) ,5号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 3号 (自制 ) .阴性对照采用珊瑚 ,阳性对照采用聚氯乙烯 .1.2　实验步骤…     

考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋白质含量

目的 建立快速、灵敏的测定蛋白质的方法。方法 以考马斯亮蓝作为显色剂,用酶联免疫测定仪微盘比色测定牛血清白蛋白和小鼠肝组织匀浆的蛋白含量,并与常量比色法进行了比较,结果 考马斯亮蓝微盘比色法与常量法相比,对样品的测定结果相近,而前者样品用量少（只需几微升）,简便、快速、检测极限低（0.63ug)。结论 考马斯亮蓝微盘比色法是一种简单、快速、灵敏的蛋白质测定方法,尤其适用于大批量、微量样品的蛋白质含量测定。     

益气回阳注射液工艺改进及双酯型生物碱的限量检测

[目的]比较超滤法和活性炭吸附法在益气回阳注射液的制备工艺中对乌头类总生物碱的含量影响;对其中双酯型生物碱（新乌头碱、乌头碱、次乌头碱）进行限量检测。以了解药物的安全性。[方法]采用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱（以乌头碱计）;用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）进行双酯型生物碱的限量检测。采用BDS-C18柱,以甲醇-0.05%三乙胺（70：30）为流动相,检测波长240nm,外标法进行定量分析。[结果]与活性炭吸附法相比,超滤法大大减少了乌头类总生物碱的损失;在双酯型生物气回阳注射液中3种双酯型生物碱的含量均极低。[结论]在制备益气回阳注射液的工艺中,以乌头类总生物碱的含量为指标。超滤法优于活性炭吸附法;初步推测该注射液毒性可能较低。     

复方抗癌合剂的体外实验研究

目的：为了寻找效高、毒低的抗癌中草药,我所通过十余年的抗癌中草药筛选,将其中的十余种组成方剂。复方抗癌剂为三七、半枝莲半夏、白茅根、黄芪、柴胡、土茯苓、川芎、莪术、白花蛇舌草、桂枝等十余味中草药组成的复方水煎剂．方法：本文通过体外癌细胞杀伤实验,癌细胞集落形成抑制实验,MTT检测细胞毒性实验．结果：三项实验指标显示复方抗癌合剂对GLC肺癌细胞、SGC胃癌细胞、Hela宫颈鳞癌细胞均有明显的抑制杀伤效果,对肿瘤干细胞集落形成也有明显的抑制作用．MTT检测说明复方抗癌合剂的量效关系为阳性对照药长春新碱的l／l0,而复方抗癌合剂为水煮粗提液,今后可通过化学提纯有效成份,将大大提高其抗癌效果．     

葛根提取物对肝癌细胞增殖及细胞周期的作用

目的 :探讨中药葛根提取物的抗癌活性并试图建立一种筛选药物的方法。方法 :用MTT快速测定法及流式细胞仪分析法分析葛根提取物 (PR)对靶细胞人肝癌SMMC 772 1细胞的抗癌药效及细胞分裂周期各时象DNA变化。结果 :葛根提取物有比较强的抗癌活性 ,与阴性对照组相比差异非常显著 (P <0 .0 1) ,与丝裂霉素MMC联合用药抗癌活性显著增强 ,与单独用药组比差异非常显著 (P <0 .0 1)。流式细胞仪分析细胞分裂周期各时象DNA变化显示药物作用后S期细胞明显减少 ,增殖指数 (PI)降低 ,并可诱导凋亡峰 (AP峰 )。结论 :提示葛根提取物具有一定抗癌活性 ,并为建立筛选抗癌中药的方法提供一条新途径。     

黄芪水煎剂和黄芪多糖对CD3AK细胞毒性的增强作用

目的探讨黄芪水煎剂和黄芪多糖(APS)对CD3AK细胞毒性的增强作用.方法将黄芪水煎剂、不同浓度的APS分别加入CD3AK细胞和靶细胞K562中,共同培养24 h后,用MTT比色法测定CD3AK细胞毒性.结果黄芪水煎剂和APS具有明显增强CD3AK细胞的毒性(P＜0.001),有效剂量为0.01 g/L.结论黄芪水煎剂和黄芪多糖能够增强CD3AK细胞的细胞毒性作用.     

用MTT法检测抗真菌药物对白念珠菌的敏感性

目的:了解白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感性。方法:采用MTT微量稀释法,检测58株白念珠菌对两种抗真菌药物的敏感性。结果:绝大部分菌株对两种抗真菌药物敏感,部分菌株为剂量依赖性敏感,氟康唑对白念珠菌的敏感率高于伊曲康唑,两者比较有统计学差异,并且对氟康唑耐药的菌株往往对伊曲康唑也耐药。结论:MTT微量稀释法具有结果客观、易于分析、灵敏度高的特点。本研究结果提示,临床上存在交叉耐药菌株感染现象,应引起重视。