丹龙醒脑方促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经干细胞增殖与β-catenin、 Wnt-3a表达及其机制的研究

目的 探究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区内源性神经干细胞增殖与β-catenin、Wnt-3a表达的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(西药组)、丹龙醒脑方小剂量组(丹小组)、丹龙醒脑方大剂量组(丹大组),线栓法制备局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤模型,再灌注7d后取大鼠缺血侧脑组织.采用BrdU掺入法记录海马齿状回颗粒下区BrdU阳性细胞数目;采用RT-qPCR法检测海马总β-catenin、Wnt-3a mRNA表达;采用Western Blot法检测海马总β-catenin、胞浆β-catenin、Wnt-3a蛋白表达.结果 与假手术组比较,其余各组BrdU阳性细胞数、β-catenin、Wnt-3a蛋白及mRNA的表达明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,西药组、丹小组、丹大组BrdU阳性细胞数、β-catenin、Wnt-3a蛋白及mRNA表达明显增强,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 丹龙醒脑方可能通过激活β-catenin及Wnt-3a表达促进神经干细胞增殖.     

活血软坚方对慢性乙型肝炎患者肝纤维化疗效及T淋巴细胞亚群影响

目的：观察活血软坚方联合西医治疗对慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化患者中医症候、肝功能、肝纤维化、T淋巴细胞亚群及临床疗效影响。方法：以我院2018年1月-2019年6月收治的100例CHB肝纤维化患者为研究对象,随机分为两组,最终对照组(47例)给予恩替卡韦+双环醇治疗,研究组(50例)在对照组基础上加用活血软坚方治疗,疗程48周。比较治疗前、48周时两组患者中医症候积分,肝功能、肝纤维相关指标,T淋巴细胞亚群;并记录临床疗效及不良反应。结果：48周时,两组患者中医症候积分,肝功能指标(ALT、AST、GGT、TBIL),肝纤维指标(Ⅳ-C、PCⅢ、LN、HA)均明显下降(P<0.01)。且两组患者CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺明显升高(P<0.01),CD8⁺明显下降(P<0.01)。两组比较,研究组上述指标均改善更明显(P<0.05),临床疗效更高(P<0.05)。两组患者治疗期间均未发生药物不良反应。结论：活血软坚方联合西医治疗CHB肝纤维化具有协同作用,改善患者临床症候表现,调节肝功能及免疫功能,降低肝纤维化水平,提高治疗疗效,且安全性高,值得临床进一步推广。     

补肾解毒方对放射致小鼠胸腺损伤的防护作用研究

背景　胸腺是最重要的中枢免疫器官,在接受射线后易受损造成免疫损伤,目前国内外研制的胸腺防护剂仍存在缺陷,中药因其高效低毒的特性,越来越受到重视。目的　研究补肾解毒方对放射致小鼠胸腺损伤的防护作用。方法　2019年1月,将90只C57BL/10J小鼠采用随机数字表法分为5组：空白对照组、单纯放射组、放射+氨磷汀组、放射+补肾解毒方防治结合组和放射+补肾解毒方预防组,每组18只。适应性饲养3 d后,放射+补肾解毒方防治结合组、放射+补肾解毒方预防组每日予以补肾解毒方汤剂灌胃（0.25 ml/只）,同时单纯放射组和放射+氨磷汀组予以等剂量0.9%氯化钠溶液连续灌胃10 d,第11天除空白对照组外,其余4组小鼠均接受与照射源同等距离的一次性4 Gy 60Coγ-射线全身照射,其中放射+氨磷汀组小鼠在照射前30 min于左侧腹腔内注射氨磷汀200 mg/kg。照射后,放射+补肾解毒方防治结合组继续予以补肾解毒方灌胃,余4组给予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃。观察小鼠一般情况,在照射后第1、7、14天进行取材,计算胸腺指数,在光镜下观察照射后第7天各组胸腺组织结构。结果　五组小鼠在照射后一般情况均较照射前差,具体表现为活跃度下降、精神状态不佳、皮毛光泽度下降,尤其单纯放射组程度更甚,其中5只小鼠出现毛发块状脱落症状。照射后第1、7、14天,空白对照组胸腺指数均高于其余4组（P<0.01）;照射后第7天,放射+氨磷汀组、放射+补肾解毒方防治结合组胸腺指数高于单纯放射组,放射+补肾解毒方预防组低于放射+补肾解毒方防治结合组（P<0.01）;照射后第14天,放射+补肾解毒方防治结合组胸腺指数高于单纯放射组、放射+氨磷汀组和放射+补肾解毒方预防组（P<0.05）。空白对照组胸腺结构完整,皮质内可见髓质,中央可见圆形或椭圆形胸腺小体;单纯放射组小梁结构破坏,界限不清,胸腺小体模糊;其余3组病理表现基本一致,部分小梁小叶结构破坏,胸腺小体隐约可见,皮质髓质界限不清,其中放射+补肾解毒方预防组还表现出更多炎性细胞浸润。结论　补肾解毒方能减轻放射所致小鼠胸腺组织损伤,发挥了良好的放射防护作用。     

补肾益智方治疗阿尔茨海默病斑马鱼模型的作用及机制研究

目的 通过阿尔茨海默病斑马鱼模型,探讨补肾益智方的作用机制。方法 选取6月龄斑马鱼,随机分成5组,分为空白对照组（n=12）、模型组（n=10）、阳性药组（n=10）、补肾益智方高剂量组（n=11）和低剂量组（n=12）。除空白对照组,其余各组均用AlCl₃·6H₂O配制成浓度为100 μg/L的溶液持续浸泡斑马鱼30 d,每天更换一半的染毒培养液。染毒结束后利用T迷宫实验剔除染毒失败的斑马鱼。造模结束后,分别给予阳性药组多奈哌齐20 μg/mL,高、低剂量组补肾益智方30、10 μg/mL浸泡14 d。给药结束后,通过T迷宫实验检测斑马鱼学习记忆能力;免疫组化染色观察神经元变化;qPCR检测相关基因的表达;Western blot检测相关蛋白的表达。结果 ①在T迷宫测试第4天,模型组潜伏时间为（198.00±45.78）s,补肾益智方低剂量组为（12.75±2.29）s,补肾益智方高剂量组为（7.27±0.90）s,补肾益智方治疗组斑马鱼的潜伏时间明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;②补肾益智方治疗组斑马鱼的端脑神经元数量较模型组明显增多、排列变整齐,星型胶质细胞增多;③补肾益智方组斑马鱼脑ACHE活力显著降低（P<0.01）、ChAT活力显著增加（P<0.05）;④补肾益智方治疗组斑马鱼脑组织中appb、bace1表达显著降低（P<0.01）,sod、cat、nrf2基因表达显著增加（P<0.01）,keap1基因表达显著降低（P<0.01）;⑤补肾益智方治疗组斑马鱼脑组织蛋白表达情况与qPCR结果一致,APP、BACE1表达显著降低（P<0.01）,Nrf2表达显著增加（P<0.01）,Keap1表达显著降低（P<0.01）。结论 补肾益智方能有效改善AD斑马鱼的学习记忆能力,减少Aβ生成,减轻氧化应激。      

健脾活络方治疗脾虚络瘀型的糖尿病远端对称性多发性神经病变的临床研究

目的探讨健脾活络方治疗脾虚络瘀型的糖尿病远端对称性多发性神经病变(DSPN)的临床疗效。方法将80例脾虚络瘀型的DSPN患者随机分为治疗组和对照组,各40例。两组均给予基础治疗配合甲钴胺片治疗(500μg,3次/d,口服),治疗组在对照组治疗基础上加用健脾活络方煎服治疗。治疗8周后,观察比较两组治疗前后多伦多临床评分(TCSS)、震动感觉阈值(VPT)检查结果、生活质量评分及疗效。结果治疗后,两组TCSS评分、VPT检查结果、生活质量评分均明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。临床疗效方面,治疗组总有效率85.00%、对照组60.00%,两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾活络方明显改善脾虚络瘀型DSPN患者神经功能和生活质量,提高疗效。     

降酸方联合非布司他治疗急性顽固性痛风性关节炎的临床观察

目的观察自拟降酸方联合非布司他治疗急性顽固性痛风性关节炎的临床疗效。方法选择2017年1月～2019年9月门诊收治的确诊为急性痛风性关节炎的患者100例,分为西药组和中西药组,西药组给予非布司他片,80 mg,每日1次口服,20 d为1个疗程。中西药组在西药组基础上给予降酸方,每日两次,20 d为1个疗程,早晚饭后半小时温服。比较两组治疗前和治疗20 d后血尿酸、C反应蛋白及疼痛评分,评估两组有效率。并比较中西药组治疗前和治疗3个月后的疼痛改善情况。结果治疗前两组UA、CRP和VAS比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗20 d后两组UA、CRP和VAS均低于治疗前,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。中西药组愈显率为100%,明显好于西药组的14%(P0.05)。治疗前疼痛功能分级优0例,良4例,可38例,差8例。治疗3个月后优21例,良29例,可0例,差0例。治疗前CI(0.699,0.777),治疗后CI(0.224,0.300),值小的疗效好。结论自拟降酸方联合非布司他能显著降低血尿酸及C反应蛋白,并降低疼痛评分,明显优于单纯非布司他治疗,对于急性顽固性痛风性关节炎疗效显著,费用低廉,可以长期使用,值得临床推广。     

健脾养血汤对特异性皮炎小鼠模型中Toll样受体的表达影响及意义

目的:观察健脾养血汤剂对特异性皮炎小鼠模型皮肤炎症症状和Toll样受体表达的影响。方法:通过外用2,4-二硝基氟苯(DNFB)丙酮制备特异性皮炎小鼠模型,小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=10)和健脾养血汤剂治疗组(n=10)。造模后10d各组皮炎症状打分,使用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组皮肤组织中TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组和健脾养血汤治疗组皮炎症状显著,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA均明显上升,表达显著增高(P<0.05)。与模型组比较,健脾养血汤治疗组皮炎症状显著减轻,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达均降低(P<0.05)。结论:健脾养血汤剂可通过抑制TLR2、TLR3、TLR4、TLR9表达,改善特异性皮炎临床症状。     

海马补肾丸对小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的考察海马补肾丸对小鼠学习记忆障碍的改善作用,并探讨其作用机制。方法小鼠随机分为对照组、模型组、吡拉西坦组、龟龄集组和海马补肾丸组。采用腹腔注射东莨菪碱制备小鼠记忆获得性障碍模型,计算学习正确率,测定蛋白含量和乙酰胆碱酯酶活力。采用腹腔注射亚硝酸钠制备小鼠记忆巩固性障碍模型,计算训练、测定学习正确率,测定蛋白含量、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果海马补肾丸2.20 g/kg组能显著增加小鼠学习记忆的正确率(P0.05),显著降低乙酰胆碱酯酶活力(P0.01)。测定时,与模型组比较,海马补肾丸1.10、2.20 g/kg组能显著增加小鼠学习记忆正确率(P0.05),能不同程度增加小鼠大脑SOD含量,降低MDA含量(P0.05、0.01)。结论海马补肾丸能明显改善小鼠的记忆获得、记忆巩固障碍,推测其作用机制主要是通过降低乙酰胆碱酯酶活性,增加脑内乙酰胆碱的含量,改善记忆获得能力;通过抗脑组织的氧化损伤,增加大脑SOD含量,降低MDA含量,改善记忆巩固能力。     

发展监管科学，促进中药产业传承创新

2008年新药创制重大专项启动实施以来的10多年间,紧密围绕构建国家药物创新技术体系目标,为我国新药研发和公众用药安全提供了重要的保障,获得重大进展。药品监管科学是近十几年发展形成的前沿学科,受到世界科学界和管理界的重视。本文秉着中药监管科学发展与现实存在问题,需要理论创新、药物创新、技术创新、方法创新和应用创新。中药监管科学研究计划是国家推进的9个监管科学行动计划之一。启动以中药临床为导向的中药安全性评价研究,构建中药安全性和质量控制体系。作者认为通过监管科学研究,制定科学规范的中药质量标准和评价指导原则和技术指南,推进中药材、中药饮片和中成药,特别是经典名方制剂品种示范研究,有利于中药产业健康科学发展。在本文中还结合当前的中药监管科学问题,加强药材和饮片的基础研究、中药注射剂质量疗效的再评价研究、经典名方的开发和简化申请的监管科学研究,提出监管科学研究顶层设计建议,制定技术原则与技术指南,有利于药典品种和市场产品的质量和临床有效性再评价。     

小儿健脾开胃合剂联合赖氨酸维B12颗粒治疗小儿厌食症的临床研究

目的研究小儿健脾开胃合剂联合赖氨酸维B_(12)颗粒治疗小儿厌食症的临床疗效。方法选取2017年12月—2018年12月青海省妇女儿童医院收治的80例厌食症患儿为研究对象,将所有患儿随机分为对照组和治疗组,每组各40例。对照组患儿口服赖氨酸维B_(12)颗粒,1～5岁,0.5袋/次,2次/d,6～12岁,1袋/次,2次/d;治疗组患儿在对照组治疗的基础上口服小儿健脾开胃合剂,10 mL/次,2次/d。两组患儿持续治疗30 d。观察两组的临床疗效,比较两组的微量元素、生化指标水平。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为82.50%、95.00%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患儿铁、钙和锌水平均显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);并且治疗组患儿铁、钙和锌水平均明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患儿血红蛋白(Hb)、血清淀粉酶(AMS)、血清铁蛋白(SF)水平均显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);并且治疗组患儿Hb、AMS、SF水平明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论小儿健脾开胃合剂联合赖氨酸维B_(12)颗粒治疗小儿厌食症具有较好的临床疗效,能改善患儿贫血症状,调节血清微量元素水平,具有一定的临床推广应用价值。