滁菊HP LC特征指纹图谱研究

目的 建立滁菊HPLC指纹图谱分析方法 .方法采用C18(5μm,4.6 mm×250 mm)岛津色谱柱,流动相为乙腈-质量分数0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长336 nm,记录滁菊的HPLC图谱并生成共有模式图,进行相似度对比,并与其他4个品种的菊花进行比较.结果 滁菊各批样品HPLC图谱与共有模式相似度均在0.920以上,其余4种菊花相似度介于0.846~0.887之间.结论 滁菊HPLC指纹图谱与其余4种菊花存在一定差异,HPLC指纹图谱可用于区分滁菊与其他菊花,且本法快捷、准确、重复性好,可为滁菊的质量控制标准提供依据.     

密蒙花颗粒的急性毒性实验研究

目的 观察密蒙花颗粒对小鼠的急性毒性反应及死亡情况,为临床应用安全性提供依据.方法 将30只小鼠分别用不同浓度及最大浓度密蒙花颗粒混悬液灌胃进行预实验,观察7 d未见小鼠死亡,无法测出LD50,故进行最大耐受量(MTD)的测定.将40只小鼠随机分为给药组和空白对照组,根据小鼠可承受的最大体积分别用最大混悬浓度的密蒙花颗粒和蒸馏水1 d内灌胃2次,连续观察14 d,每天记录小鼠的一般状况、体质量,14 d后处死动物,测定小鼠的血常规指标,肝、脾、肾等主要脏器指数,观察解剖学及病理组织学改变情况.结果 给药组小鼠无死亡,与空白对照组比较,给药组小鼠的体质量变化无显著差异(P>0.05),血常规指标与空白对照组亦无显著差异(P>0.05),小鼠密蒙花颗粒日最大耐受量为114 g/kg.结论 急性毒性结果表明,密蒙花颗粒临床常用量是安全的.     

基于传统煎药工艺的野菊花饮片标准汤剂制备及其质量评价方法分析

目的:制备5个产地15批次野菊花饮片标准汤剂并确立其质量评价方法,研究其出膏率、指标成分含量及转移率、指纹图谱等数据,为野菊花饮片标准汤剂及其配方颗粒的制备提供参考。方法:参照传统煎药工艺制备标准汤剂,采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)测定指标成分蒙花苷的含量,计算该成分的转移率,绘制指纹图谱,采用真空干燥法制备浸膏粉,计算出膏率。结果:15批野菊花饮片标准汤剂中蒙花苷质量浓度0. 19～0. 74 g·L~(-1),转移率21. 95%～66. 23%,平均转移率37. 12%(RSD 11. 8%); p H 5. 1～5. 5;出膏率24. 7%～32. 5%,平均出膏率27. 87%(RSD 2. 4%)。指纹图谱共有峰有9个,确认其中2个色谱峰(2号和9号)分别为绿原酸和蒙花苷。结论:建立的制备工艺符合传统汤剂制备方法且稳定可行,可用于野菊花饮片标准汤剂的制备及质量评价。     

月季花总黄酮对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠的影响

目的:通过研究月季花总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响,探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、月季花总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg~(-1))及阳性组[尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),脑络通组(500 mg·kg~(-1))]。预先连续给药7 d,末次给药1 h后,复制大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型。造模2 h后再灌注22 h,对死亡率、神经功能缺失评分,检测血清中S-100β;脑组织中丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),三磷酸腺苷(ATP)酶;并观察脑组织形态学改变。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注模型复制成功。与模型组比较,月季花总黄酮高、中、低剂量组均可显著降低大鼠神经功能缺失的评分(P0.01),显著降低血清中的S-100β含量(P0.01),显著降低脑组织中MDA,NO,NOS活性(P0.01),显著升高脑组织中SOD活性(P0.01),显著升高脑组织中Na~+K~+-ATP酶,Mg~(2+)-ATP酶,Ca~(2+)-ATP酶活性(P0.01),显著降低脑组织中的TNF-α,IL-1β,ICAM-1含量(P0.01);显著改善脑组织的损伤(P0.01)。结论:月季花总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抗自由基,减轻脑组织的炎症反应及改善脑缺血再灌注损伤后脑组织的能量代谢有关。     

泸州古蔺山银花指纹图谱及一测多评同时检测研究

目的:建立HPLC指纹图谱及一测多评同时检测泸州古蔺山银花中9个成分的质量分析方法。方法:以绿原酸为参照物,建立泸州古蔺山银花HPLC指纹图谱,并采用斜率校正法计算其与新绿原酸、隐绿原酸、獐牙菜苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙的相对校正因子,分别用外标法和一测多评法计算含量。结果:建立了10批古蔺山银花HPLC指纹图谱,相似度均在0.99以上,标定了11个共有峰,指认了其中9个共有峰,并分别采用外标法和一测多评检测其含量,二者无显著差异。结论:实验将一测多评和指纹图谱相结合评价泸州古蔺山银花的质量,该方法准确、简便、可行,为更全面控制山银花的质量提供参考依据。     

星点设计-效应面法优化金银花炭炮制工艺

目的：采用星点设计-效应面法优化金银花炭的炮制工艺。方法：以异绿原酸C和儿茶素的含量为考察指标,分烘制和炒制采用星点设计考察炮制温度和炮制时间对炮制工艺的影响,对结果进行多元线性回归和二项式拟合,用效应面法筛选最佳炮制工艺,并进行预测分析。结果：炒制的最佳炮制工艺为炒制温度230 ℃,炒制时间13 min;烘制的最佳炮制工艺为烘制温度172 ℃,烘制时间8 min。最佳工艺验证结果与二项式拟合方程预测值偏差小于3%。结论：利用星点设计-效应面法优化金银花炭炮制工艺,方法简便,预测性良好。     

基于DNA熔解曲线技术的金银花种质鉴定

将高分辨率熔解曲线(high resolution melting curve analysis,HRM)技术应用于金银花种质鉴定中,对已知7对SSR(简单重复序列,simple sequence repeats)引物进行筛选,通过熔解曲线峰型及Tm差异,确定适合鉴别引物并考察其DNA模板浓度、退火温度及循环数的适宜范围。结合SIMCA-P软件对荧光信号进行处理分析,结果表明利用其中4对引物的熔解曲线可以区分金银花的3个主栽种质,为进一步完善金银花种质鉴定方法提供了依据。     

基于两类误差检测理论金银花提取过程的MEMS-NIR在线分析建模方法研究

采用新型微机电近红外(MEMS-NIR)光谱技术,在线监测金银花提取过程中绿原酸成分的含量。以高效液相色谱法为参考方法,采用Kennard-Stone法(KS)划分样本集,运用偏最小二乘(PLS)法建立其含量与NIR光谱之间的多元分析模型。通过组合间隔偏最小二乘法(Si PLS)对建模波段进行筛选,建立PLS模型。运用相对预测偏差(RPD)来评价模型的预测能力,并基于两类误差检测理论计算模型的多变量检测限(MDL),以MDL值进一步科学表达金银花提取过程的在线分析建模方法。结果表明应用MSC预处理方法所建模型最好,其交叉验证均方根误差(RMSECV)、校正均方根误差(RMSEC)和预测均方根误差(RMSEP)分别为1.707,1.487,2.362,校正集决定系数Rcal2为0.998 5,预测集决定系数Rpre2为0.988 1,且其RPD值为9.468,表明模型具有良好的预测性能。经Si PLS法筛选的多变量检测限MDL(0.042 15 g·L-1)小于未经变量筛选的MDL值,表明经Si PLS筛选有利于提高模型的预测性能。该研究从两类误差检测理论更加准确表达模型的预测能力,进一步说明MEMS-NIR光谱技术可用于金银花提取过程的在线监测。     

施用氮磷钾肥对渝丘陵地区槐米产量与品质的影响

以盛产期双季米金槐为研究对象,考察氮磷钾肥用量对渝丘陵山区槐米的产量(包括构成因素)和品质的影响。结果表明,尿素、过磷酸钙和氯化钾施用量对槐米产量、产量构成因素和品质影响显著,施用尿素1.0~2.0 kg/株时可显著增加花枝上的圆锥花序、总状花序、花蕾数、单株产量及品质(总黄酮、芦丁、槲皮素、染料木素、山奈酚和异鼠李素的含量),过磷酸钙1.0~1.5 kg/株时也可显著增加花蕾数、单株产量和品质,氯化钾施用量处理没有表现出显著增加产量及产量构成因子的现象,但是施用氯化钾0.6~0.9 kg/株处理的各指标均优于低钾或不施钾的处理。从槐米高产和优质角度综合考虑,确定在渝丘陵山区槐米规范化生产上施尿素1.5~2.0 kg/株、过磷酸钙1.5~2.0 kg/株和氯化钾0.6~0.9 kg/株为佳。     

伤风咳茶质量标准提高研究

目的研究提高伤风咳茶的质量标准,建立菊花的薄层色谱鉴别和连翘的高效液相含量测定。方法采用薄层色谱法,鉴别伤风咳茶中菊花药材的绿原酸;用高效液相法测定连翘中的连翘苷含量。结果鉴别方法:薄层斑点清晰,专属性和重复性强,阴性对照无干扰;含量测定方法:操作简单,准确,连翘苷在0.02466～0.78896mg之间呈良好的线性关系,连翘苷的回收率为99.88%。结论定性、定量方法准确、简便,可用于控制伤风咳茶的质量。