高效液相色谱法同时测定杜仲叶中4种有效成分的含量

目的：测定杜仲叶中4种有效成分的含量。方法采用HPLC测定绿原酸、槲皮素、山奈酚、芦丁的含量,色谱柱为WondaSil C18 Superb色谱柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）,流动相：0.4%磷酸溶液（A）-甲醇（B）进行梯度洗脱,流速1 ml/min,进样量10μl,检测波长262 nm。结果绿原酸的质量在0.825~4.123μg（R2=0.9999）范围内呈良好线性关系,平均回收率为101.89%,RSD为0.49%;槲皮素的质量在0.165~0.824μg（R2=0.9998）范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.88%,RSD为2.64%;山奈酚的质量在0.021~0.104μg（R2=0.9999）范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.0%,RSD为0.89%;芦丁的质量在0.002~0.012μg（R2=0.9991）范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.0%,RSD为0%。结论本方法简便、快速、准确、重复性好,适用于杜仲叶中各成分的含量测定。     

药食同源植物杜仲化学成分、药理作用及产品开发的研究概况

杜仲（Eucommia ulmoides），又称胶木，为杜仲科杜仲属植物，在我国已有超过两千年的药用历史。杜仲通常使用其干燥的树皮和叶子入药。由于其在临床应用中的较高安全性，杜仲叶已在2019年通过食用安全性评价正式列为药食同源物质，成为食品和保健品开发的有力资源。根据中医理论，杜仲具有补肝肾、强筋骨、安胎等功效。现代研究表明，杜仲的不同部位，如皮、叶、花和种子等，含有类似的化学成分，主要包括苯丙素类、萜类、黄酮类、酚酸类、甾体和多糖类等物质。杜仲因其丰富的成分，具有降血压、降血脂、降血糖、预防骨质疏松、抗肿瘤、抗菌抗病毒、抗炎、抗氧化、肝保护等多种药理作用，因此具有开发多样化药食同源产品的潜力。该文对杜仲不同部位的化学成分、药理作用及代表性的药食同源产品进行了系统整理，旨在为杜仲及其活性成分的临床应用及药食同源产品的开发利用提供理论参考。这将有助于深入了解杜仲的药用特性，并为进一步探索其在健康领域的应用提供指导。作为一种传统药食同源植物，杜仲将在未来的研究中引起更多关注，并有望为人们的健康作出更多贡献。     

杜仲叶醇对糖尿病大鼠骨密度的影响

目的 :观察杜仲叶醇对糖尿病大鼠骨密度改变的阻断作用 ,并探讨其机制。方法 :雌性Wistar大鼠 30只随机分成正常对照组、糖尿病 ( DM)模型组和模型加中药组 ,以腹腔注射链脲佐菌素 ( STZ)法制备糖尿病动物模型 ,模型加中药组给予杜仲叶醇灌胃 ,正常对照组和糖尿病模型组给予蒸馏水灌胃 ,每日 1次 ,连续 8周。结果 :杜仲叶醇能提高糖尿病大鼠股骨线密度 ( BWD)和面密度 ( BMD) ,提高血清雌二醇 ( E2 )含量。结论 :杜仲叶醇可阻断糖尿病大鼠的骨丢失 ,其部分机制是通过调节性激素而降低骨转换 ,抑制骨吸收。     

Effects of Eucommia ulmoides Extract on Longitudinal Bone Growth Rate in Adolescent Female Rats

Eucommia ulmoides is one of the popular tonic herbs for the treatment of low back pain and bone fracture and is used in Korean medicine to reinforce muscles and bones. This study was performed to investigate the effects of E. ulmoides extract on longitudinal bone growth rate, growth plate height, and the expressions of bone morphogenetic protein 2 (BMP‐2) and insulin‐like growth factor 1 (IGF‐1) in adolescent female rats. In two groups, we administered a twice‐daily dosage of E. ulmoides extract (at 30 and 100 mg/kg, respectively) per os over 4 days, and in a control group, we administered vehicle only under the same conditions. Longitudinal bone growth rate in newly synthesized bone was observed using tetracycline labeling. Chondrocyte proliferation in the growth plate was observed using cresyl violet dye. In addition, we analyzed the expressions of BMP‐2 and IGF‐1 using immunohistochemistry. Eucommia ulmoides extract significantly increased longitudinal bone growth rate and growth plate height in adolescent female rats. In the immunohistochemical study, E. ulmoides markedly increased BMP‐2 and IGF‐1 expressions in the proliferative and hypertrophic zones. In conclusion, E. ulmoides increased longitudinal bone growth rate by promoting chondrogenesis in the growth plate and the levels of BMP‐2 and IGF‐1. Eucommia ulmoides could be helpful for increasing bone growth in children who have growth retardation. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达防治关节炎的作用机制研究

目的 研究“杜仲-当归”介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP13表达防治骨性关节炎（osteoarthritis,OA）的作用机制。方法 取SD大鼠,随机分为Sham组、OA组、OA+补肾组（杜仲40 mg·kg^-1）、OA+活血组（当归40 mg·kg^-1）、OA+补肾活血组（杜仲-当归药液40 mg·kg^-1）、OA+阳性药物组（西乐葆10 mg·kg^-1+奥泰灵1.2 mg·kg^-1）共6组。OA模型制备成功后,各组大鼠给予对应药物治疗,连续给药8周。番红O染色检测软骨组织变化,免疫组织化学检测软骨组织中MMP-13表达,ELISA检测大鼠血清IL-6、IL-8含量,Western blotting检测软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。分离正常SD大鼠软骨细胞,IL-1β（10 ng·mL^-1）干预诱导体外OA炎症模型并进行药物干预。番红O染色检测软骨细胞表型变化,ELISA检测软骨细胞IL-6、IL-8含量,免疫荧光染色检测软骨细胞β-catenin表达,qRT-PCR检测软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9和MMP-13的mRNA表达,Western blotting检测软骨细胞中MMP-3、MMP-9、MMP-13、β-catenin蛋白表达。结果 药物处理对OA导致的软骨组织损伤有不同程度的修复作用;杜仲-当归可下调血清中IL-6、IL-8水平,下调软骨组织中MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。与IL-1b组相比,杜仲-当归可提高软骨细胞存活率,改善细胞形态,下调软骨细胞IL-6、IL-8水平,降低软骨细胞中b-catenin荧光强度,并下调软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP-3、MMP-9、MMP-13的mRNA表达和MMP-3、MMP-9、MMP-13、b-catenin的蛋白表达。结论 体内、体外试验表明补肾活血中药“杜仲-当归”可以通过促进软骨细胞增殖、调控炎症因子水平、改善软骨基质降解、改善软骨病理损伤起到对OA的防治作用,且作用机制可能与介导Wnt/β-catenin信号转导调控MMP-13表达有关。     

杜仲的血清药物化学研究

目的对杜仲Eucommia ulmoides进行血清药物化学研究。方法采用UHPLC-Q-TOF-MS技术,通过比较杜仲提取物、给药组及空白组大鼠血清的指纹图谱,确定口服杜仲提取物后大鼠血中移行成分。结果给药组大鼠血清指纹图谱与空白组血清指纹图谱对比有明显不同。含药血清中出现7个移行成分,与杜仲提取物指纹图谱在相同保留时间出峰,为原型成分。采用对照品对照,确定5个色谱峰所表征的化学成分为原型吸收入血成分,依次为京尼平苷酸、原儿茶酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷。通过查阅文献,推断了2个色谱峰所表征的化学成分可能为1-羟基松脂醇二葡萄糖苷、杜仲醇。结论血中移行成分可能为杜仲的体内直接作用物质,为明确杜仲药效物质基础提供了科学依据。     

烘制法与常规炮制工艺对杜仲药效成分影响的比较

目的考察烘制法与常规炮制工艺对杜仲药效成分的影响。方法采用烘制、砂烫、煅炭的炮制方法,对成品收率、绿原酸含量、水溶性浸出物进行比较实验。结果烘制法炮制杜仲工艺以断丝为度,用温度计控制温度,受热均匀,减少了炭化的损失,温度达180～200℃范围内,可使杜仲丝片达到炮制要求,缩短了炮制过程中的受热时间,减少了药效成分的破坏。烘制法平均收率为84.25%,而砂烫杜仲平均收率为76.63%,炒杜仲炭平均收率为64.18%,烘制杜仲收率高于炒杜仲炭20.07%。烘制法炮制杜仲的绿原酸含量高于砂烫杜仲和炒杜仲炭,其由高到低的顺序为烘制杜仲≥砂烫杜仲≥炒杜仲炭;三者的水溶性浸出物含量比较基本一致。结论烘制法炮制杜仲操作简便,条件容易控制,不论在成品收率还是对药效成分的影响均好于常规砂烫、煅炭炮制工艺,值得推广应用。     

盐制对杜仲治疗去卵巢大鼠骨质疏松症影响的研究

目的：研究杜仲及其盐制品对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用,并探讨盐制对其治疗作用的影响。方法40只SD雌性大鼠分为伪手术组、模型对照组、杜仲生品治疗组和杜仲盐制品治疗组,除假手术组施行假手术外,其余均行手术彻底摘除卵巢,术后4周开始杜仲生品及盐制品水提液灌胃给药（4．0 g／kg?d）,实验过程称体质量,连续给药12周后,颈动脉取血,测定血钙（S－Ca）、血磷（S－P）含量,ELISA试剂盒双抗体夹心法测定血清碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）、雌二醇（E2）含量;动物处死后剥取完整子宫称重,采用HE染色法进行子宫病理学检查,剥离双侧股骨,双能X射线衍射法测定大鼠股骨骨密度。 HE染色法观察股骨骨小梁形态和成骨细胞数量,micro－CT扫描观察股骨骨小梁微体系结构。结果杜仲生品及盐制品能有效抑制去卵巢所致的大鼠体重增加,升高血清钙、雌二醇的含量,降低血磷、碱性磷酸酶和骨钙素的含量。增加大鼠股骨骨密度,改善股骨骨小梁微体系结构,增加股骨骨小梁成骨细胞数量,且长期用药对子宫无明显刺激作用。结论杜仲生品及盐制品对于大鼠去卵巢所引起的骨质疏松症有良好治疗作用,且盐制品效果优于生品。     

杜仲叶有效成分的地理学研究(Ⅰ)

通过测定七个产区杜仲叶中５种有效成分（次生代谢物）的含量,得出生态因素是调控药用植物有效成分合成与积累的重要因素。并对各种生态因素进行了逐步回归和通径分析,结果表明：影响杜仲叶有效成分合成与积累的主要因素是土壤中的微量元素,而气象因素影响不大。     

基于GMPGIS 的杜仲全球产地生态适宜性分析

目的：借助GMPGIS系统平台对杜仲的全球生态适宜性进行分析,以期对杜仲的全球引种提供科学的数据支持。方法：借助公开发表的文献、数据库网站等资源,选取杜仲道地产区、野生分布区和主产区等一共337个样点,确定经纬度信息。以最冷季均温、最热季均温、年均温、年均相对湿度、年均降水量、年均日照和土壤,共7个生态因子类型作为生态指标,运用药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统（GMPGIS）系统进行分析。结果：从全球范围来看,杜仲生态相似度区域广泛分布全球主要大洲。其中,东亚、欧洲大部、北美洲拥有的杜仲生态相似度区域的面积最大。以国家面积来看,亚洲的中国和北美洲的美国所拥有的面积最大。从中国国内来看,华东、东南沿海、华中、华南、西南地区及西藏藏南地区和台湾极少数地区都具有杜仲生态相似度区域。面积前三位的省份是云南省、四川省、湖南省。结论：最适合杜仲栽培的区域应符合以下条件：年均温度12 ℃-18 ℃,年均相对湿度60%-80%,年均降水量1000-1500 mm,年均日照强度130-160 W·m-2,最适土壤为淋溶性土壤。拥有杜仲生态相似度区域面积前三的国家分别是中国、美国以及阿根廷。运用GMPGIS系统能够获取杜仲最大生态相似度区域信息,并为今后杜仲合理引种提供可靠的数据支撑。