川芎提取物对胰腺癌HS 766T细胞体外粘附影响的实验研究

目的:研究川芎提取物对胰腺癌HS 766T细胞体外粘附的影响.方法:采用细胞培养方法建立稳定传代的胰腺癌HS 766T细胞系,体外培养人脐带静脉内皮细胞.采用CCK-8法检测川芎提取物对HS 766T细胞与层粘连蛋白及血管内皮细胞粘附作用的影响.结果:低浓度的川芎提取物(0.06 g/mL)即可以抑制HS 766T细胞的体外侵袭,抑制HS 766T细胞同层粘连蛋白及血管内皮细胞的粘附作用.结论:川芎提取物对胰腺癌HS 766T的侵袭和粘附行为有抑制作用.     

洋川芎内酯I在大鼠尿液和胆汁中的排泄

目的:研究洋川芎内酯I在灌胃和静脉注射后在大鼠体尿液和胆汁中的排泄特征,为该成分的临床前研究和评价提供参考。方法:大鼠按剂量72 mg·kg^-1灌胃和尾静脉给与洋川芎内酯I溶液,收集不同时间段尿液和胆汁,采用高效液相色谱-紫外检测器法(HPLC-VWD)测定大鼠尿液和胆汁中洋川芎内酯I的含量,检测波长均为278 nm,流动相均为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱。结果:灌胃和尾静脉给药48 h后累积经尿液排泄的原形药物量分别为(179.8±33.68),(264.8±87.28) μg,累积排泄率分别为(0.77±0.15)%和(1.35±0.26)%;给药36 h后累积经胆汁排泄的原形药物量依次为(359.4±75.66),(426.3±140.90) μg,累积排泄率分别为(1.22±0.49)%和(1.72±0.59)%。结论:洋川芎内酯I在大鼠尿液和胆汁内以原形药物的形式排出量较少,且排泄迅速。     

基于药效成分丹酚酸B和阿魏酸在大鼠血浆的药代动力学研究丹参与川芎配伍

通过研究丹参和川芎的药效成分丹酚酸B与阿魏酸在大鼠体内的药代动力学规律,进而探讨丹参和川芎配伍机制.将大鼠随机分为3组尾静脉推注给药:丹参纯化物组(以丹酚酸B计给药50 mg·kg-1)、川芎纯化物组(以阿魏酸计给药0.5mg·kg-1)、丹参与川芎纯化物联合用药组(以阿魏酸计给药0.5mg.kg-1+丹酚酸B计给药50 mg·kg-1);于不同时间点采集血样,血浆经乙酸乙酯液液萃取纯化;以氯霉素为内标,采用超高效液相色谱(UPLC)测定血浆中丹酚酸B和阿魏酸的血药浓度;利用WinNonlin 6.2软件计算动力学参数,并用SPSS 19.0统计软件进行分析.建立包括线性方程、稳定性、重复性、精密度及回收率等在内的测定大鼠血浆中阿魏酸与丹酚酸B的UPLC分析方法,所建立的样品处理和分析方法均稳定可靠;所得到的主要药代动力学参数如药时曲线下面积(AUC)、平均滞留时间(MRT)、半衰期(t1/2)等均有显著性差异.实验结果表明丹参和川芎配伍能显著影响药效成分在大鼠体内的药动学过程,2药配伍可以促进丹酚酸B分布更广泛、消除减缓、体内作用时间延长;能促使阿魏酸的血药浓度提高,体内清除加快.     

川芎、黄芪有效成分配伍对缺氧脑微血管内皮细胞的影响

目的观察黄芪、川芎中的有效成分黄芪甲苷、川芎嗪、阿魏酸、毛蕊异黄酮、藁本内酯的正交组合配伍对SD乳鼠脑微血管内皮细胞(rBMVECs)缺氧损伤的保护作用,并找出较优组合。方法 rBMVECs原代传代培养,并建立缺氧模型,4h后观察细胞形态,MTT法测定各成分的最大耐药质量浓度,以L_(18)(3~5)正交表设计安排成分配伍给药,采用黄嘌呤氧化酶显色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法测定caspase-3与caspase-8基因在细胞中的表达。采用极差分析法分析正交试验结果。结果药物正交配伍组合可显著改善缺氧rBMVECs的形态,有效增强SOD活性,有效抑制缺氧诱导的rBMVECs发生Gl/S期阻滞,明显减少了细胞的凋亡,减弱细胞中caspase-3和caspase-8基因表达。正交试验结果分析显示其较优组合为藁本内酯5μg/mL、川芎嗪10μg/mL、阿魏酸20μg/mL、毛蕊异黄酮10μg/mL、黄芪甲苷10μg/mL。结论黄芪、川芎有效成分组合配伍对内皮细胞缺氧损伤有明显的保护作用。     

川芎散剂体外溶出特征研究

目的比较川芎散剂在不同介质中的溶出度,探讨川芎散剂的溶出特征。方法采用桨法,以阿魏酸为指标,利用紫外分光光度法测定川芎散剂在5种介质(水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐)中的溶出量,绘制溶出曲线,以相似因子法和威布尔模型评价。结果川芎散剂在5种介质中的溶出量具有差异性。在水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐和pH 6.8磷酸缓冲盐中的溶出具有相似性且符合威布尔模型,在pH 7.4磷酸缓冲盐中的溶出则发生突变,30 min即达最大溶出量。结论川芎散剂在酸性到中性再到碱性介质中溶出量逐渐增多且溶出时间缩短,在酸性和中性介质中溶出曲线相似,在碱性介质中溶出快而完全。     

坎离砂中当归川芎的鉴别

目的 建立坎离砂中当归川芎同时鉴别的方法.方法 采用TLC法同时鉴别当归、川芎,展开剂为正己烷-乙酸乙酯-甲酸(5:5:0.4).结果 供试品TLC图谱中,在与当归川芎对照药材及阿魏酸(FA)对照品色谱相应的位置上,显示相同颜色斑点.结论 该方法快速、准确、专属性强、重现性好,可用于坎离砂的质量控制.     

川芎抗脑缺血的神经胶质细胞Ube3a-as机制研究

目的观察川芎抗脑缺血的神经胶质细胞Ube3a-as机制。方法取清洁级昆明种小鼠66只,随机分为川芎组(n=22)、模型组(n=22)、对照组(n=22)。川芎组、模型组采用线栓法建立昆明种小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性缺血再灌注模型。川芎组利用立体定位仪在侧脑室注射川芎提取物治疗,模型组不接受任何治疗。采用Bederson评分法对小鼠神经学进行评估,并分离培养海马神经胶质细胞,通过GFAP免疫化学分析鉴定原代神经胶质细胞的纯度,分析川芎抗脑缺血的神经胶质细胞Ube3a-as机制。结果 3组小鼠建模前Bederson评分比较差异无统计学意义(P0.05)。川芎组与模型组建模后1天Bederson评分均显著高于对照组(P0.05)。建模后1 d、2 d以及处死前,川芎组经治疗后小鼠Bederson评分明显低于模型组(P0.05)。川芎组昆明小鼠梗死面积明显小于模型组(P0.05),对照组昆明小鼠未建立模型,未见梗死面积。镜下可见原代小鼠海马星形胶质细胞生长良好,所有细胞均贴壁生长。免疫组化染色法鉴定结果显示,海马星形胶质细胞的GFAP免疫阳性反应率均在98.0%以上。PCR检测结果显示,川芎组小鼠海马组织中神经胶质细胞Ube3a-as水平显著高于模型组(川芎组:2.47±1.21;模型组:1.01±0.27,P0.05)。结论脑缺血昆明种小鼠采用川芎提取物治疗效果良好,药物能直接影响神经胶质细胞Ube3a-as基因水平。     

应用数据挖掘技术筛选的抗癌中药对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移的影响

【目的】基于数据挖掘技术筛选具有较明显抑制三阴性乳腺癌作用的中药。【方法】收集近15年关于乳腺癌中医治疗的有效文献,采用频次和聚类分析确定高频中药,制备其含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和Transwell小室侵袭、迁移实验,分别观察各高频中药含药血清作用三阴性乳腺癌细胞(MDB-MB-231)12、24 h后细胞增殖、迁移和侵袭能力变化。【结果】筛选出的高频使用中药为川芎、蒲公英、白花蛇舌草、天花粉、牛膝。这5种中药的含药血清对MDB-MB-231细胞的增殖能力均具有不同程度的抑制作用,其中蒲公英、白花蛇舌草、牛膝对MDB-MB-231细胞迁移能力具有较强的抑制作用,蒲公英、川芎、白花蛇舌草对MDB-MB-231细胞侵袭能力具有明显抑制作用。【结论】运用数据挖掘技术得到的高频中药川芎、蒲公英、白花蛇舌草、天花粉、牛膝等具有明显的抑制三阴性乳腺癌作用。     

均匀设计法优选川芎提取物的提取工艺研究

目的:筛选优化川芎提取物的提取工艺.方法:采用均匀设计法,以提取物收率和总内酯含量为指标,对川芎提取物的提取工艺进行优选.结果:最佳提取工艺条件为:采用渗漉法,粉碎粒度为20目,以90%的乙醇为溶剂,用量为6倍量,浸泡时间为24 h,渗漉速度为2 mL/min.验证试验结果表明提取物收率为7.36%,总内酯含量为3.55%.结论:建立的川芎提取物的提取工艺稳定、可行,适合放大生产.     

基于CUMS大鼠川芎挥发油抗抑郁症作用研究

目的:研究川芎挥发油对抑郁模型大鼠行为学及脑内多巴胺、去甲肾上腺素的影响。方法:将72只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、川芎挥发油低、中、高剂量组,通过应激实验建立大鼠CUMS抑郁模型,对其进行相关治疗后,考察行为学变化,同时采用LC-MS/MS检测脑组织中DA、NE含量。结果:与模型组比较,各剂量川芎挥发油组均能不同程度改善CUMS抑郁模型大鼠旷场实验水平得分和糖水偏爱百分比,减少强迫游泳静止不动时间和增加大鼠体质量;川芎挥发油中剂量组可极显著提高CUMS抑郁模型大鼠海马区DA的含量(P 0. 01),川芎挥发油低、高剂量组可显著增加CUMS抑郁模型大鼠海马区DA的含量(P 0. 05);川芎挥发油低剂量组可极显著增加CUMS抑郁模型大鼠纹状体NE的含量(P 0. 01),川芎挥发油中、高剂量可显著增加CUMS抑郁模型大鼠前额叶和纹状体NE的含量(P 0. 05)。结论:川芎挥发油能改善CUMS抑郁模型大鼠旷场实验水平得分和糖水偏爱百分比,减少强迫游泳静止不动时间和增加大鼠体质量,显著提高CUMS抑郁模型大鼠海马区DA含量,前额叶和纹状体NE的含量,表明川芎挥发油抗抑郁作用可能与提高前额叶、纹状体NE含量及海马区DA含量有关。