Combined antihypertensive effect of luteolin and buddleoside enriched extracts in spontaneously hypertensive rats

Ethnopharmacological relevance

Flos Chrysanthemi is used in a variety of diseases in traditional Chinese medicine including hypertension, and the total flavonoids (rich in luteolin (LUT) and buddleoside (BUD)) of Flos Chrysanthemi is known to modulate vascular functions and reduce the blood pressure. However, the active flavonoids and their synergistic effects on anti-hypertension are still unclear. To investigate the combined anti-hypertension effects of LUT and BUD enriched extracts on spontaneously hypertensive rats (SHR), as well as the anti-hypertensive mechanism of LUT&BUD mixture.

Materials and methods

CODA Mouse & Rat Tail-Cuff Blood Pressure System was used to measure the systolic blood pressure (SBP) and diastolic blood pressure (DBP) of SHR after treated with extracts contains with LUT and/or BUD. The expressions of Ang II, PRA, ALD, ET, PGI₂ and TXB₂ were investigated by ELASA. Serum NO concentration was measured by the method of Nitric acid reductase.

Results

A single administration of LUT, BUD, or LUT:BUD=1:1 significantly reduced SBP by about 3.35 mmHg, 4.39 mmHg and 15.42 mmHg, respectively. Chronic administration of LBM (at 60 mg/kg; p.o. for 30 days) reduced both SBP and DBP by 4.04% and 5.24% of the vehicle group, respectively. Oral administration of LBM at 60 mg/kg inhibited the serum levels of ANG, ALD and ET, but increased serum NO concentration.

Conclusion

This study shows the synergistic anti-hypertension effects of LUT and BUD in SHR. The effects of LBM on blood pressure are associated with RAAS and endothelial system. Thus, our experiments suggest that the combination of luteolin and buddleoside from Flos Chrysanthemi are potentially useful for the therapeutic treatments for hypertension.     

从金银花中提取绿原酸生产工艺的改进

目的：对金银花的提取工艺进行改进，以提高得率及降低溶剂消耗量。方法：首先用少量乙醇水溶液润湿金银花，然后加沸腾热水搅拌提取。结果：绿原酸得率为7．89％，浸膏中绿原酸含量为16．7％，均高于传统醇提及水提，但乙醇用量仅为醇提的6％。结论：新工艺对绿原酸的提取具有较大的应用价值。     

三七花对高血压患者血压及血浆t-PA、PAI、vWF的影响

目的观察三七花对轻度高血压患者血压及血栓前状态的影响。方法将88例Ⅰ级原发性高血压患者随机分为治疗组、对照组,每组44例。治疗组给予三七花水煎液口服,对照组予苯磺酸氨氯地平片,连续治疗8周,观察两组患者治疗前后的血压、中医证候积分及血浆t-PA、PAI、vWF水平的变化。结果与治疗前比较,治疗后两组收缩压、舒张压、中医证候积分差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),治疗组治疗前后血浆t-PA、PAI和vWF水平差异有统计学意义(P<0.05)。组间治疗后比较,收缩压、舒张压、中医证候积分及PAI、vWF水平差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论三七花对Ⅰ级原发性高血压病患者有降低血压、缓解临床症状、改善血栓前状态的作用。     

不同储存期金莲花中4种药效组分的测定△

目的:考察不同储藏期的金莲花中各药效组分的变化情况,从而为金莲花药效组分的确定奠定基础.方法:以中药药效组分理论为指导,采用HPLC对3个不同储存期金莲花中4种药效组分进行含量测定.结果:测得3个储存期金莲花药材中荭草苷平均含量分别为2.922,2.268,2.063mg·g-1,牡荆苷平均含量分别为0.930,0.781,0.644mg·g-1,牡红草素-2"-O-β-L-半乳糖苷平均含量分别为8.945,12.217,24.433mg·g-1,藜芦酸的平均含量分别为0.865,0.876,0.896mg·g-1.结论:初步确定了3个不同储存期金莲花中4种药效组分的量的变化区间分别为:荭草苷(2.922～2.063mg·g-1);牡荆苷(0.930～0.644 mg·g-1);红草素-2"-O-β-L-半乳糖苷(8.945～24.433mg·g-1);藜芦酸(0.865～0.896mg·g-1)     

花蕾期延长型金银花挥发性成分研究

以传统金银花品种大毛花为对照,采用顶空固相微萃取气相色谱质谱联用技术,分析比较花蕾期延长型北花1号品种金银花的挥发性成分。采用面积归一化法测定其挥发性成分相对含量,共鉴定出52种挥发性成分,其中北花1号39种,大毛花33种,二者共有成分20种。北花1号在醇类、烃类含量上显著高于大毛花,而在酮类含量上显著低于大毛花,其中烟酸甲酯,棕榈酸甲酯,苯乙酮,己酸等20种化合物只在北花1号品种检测到。     

硫磺熏蒸前后菊花的HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立菊花药材指纹图谱检测方法,并对硫磺熏蒸前后菊花药材的指纹图谱进行分析比较。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱;柱温35℃,检测波长268 nm。结果:测定未经硫磺熏蒸和经过硫磺熏蒸的菊花药材样品共11批,建立了菊花药材HPLC指纹图谱的共有模式,确立12个共有峰,并且采用聚类分析方法对11批样品进行分析比较。结论:该方法准确可靠,重复性好,可用于硫磺熏蒸前后菊花药材的质量评价与控制。     

金银花多酚类物质的纯化研究

目的考察常用的大孔吸附树脂对金银花多酚类物质的纯化效果,筛选纯化工艺条件。方法以总酚的质量分数和回收率作为指标,采用静态吸附及动态吸附考察树脂的吸附、解吸性能。结果 NKA-2型树脂对多酚类物质的吸附能力明显强于其他树脂,其载药量为7倍树脂体积,水洗5倍树脂体积,60%乙醇洗6倍树脂体积。此条件下,浸膏量减少40%左右,总酚质量分数提升近一倍,达到60%左右,样品回收率达到55%。结论 NKA-2型树脂对金银花多酚类的纯化效果较好,适用于金银花多酚类物质的分离纯化。     

HPLC-ICP-MS测定泽泻、金银花、鸡血藤中可溶性价态砷及残留限度

目的 建立高效液相色谱-电感耦合等离子质谱(HPLC-ICP-MS)测定方法,分析金银花、泽泻、鸡血藤中4种不同价态砷,评估泽泻、金银花、鸡血藤中4种价态砷的残留情况,为制定相关残留限度提供依据。方法 采用0.05 mol·L^-1 EDTA溶液超声提取样品中可溶性砷,采用HPLC-ICP-MS分析样品中可溶性砷的形态。结果 As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)在5~200 μg·L^-1内线性良好,平均回收率(n=9)为105.1％~108.4％,方法检测限为0.01 mg·kg^-1。泽泻检出少量As(Ⅲ)、As(Ⅴ),金银花检出少量As(Ⅲ)、DMA、As(Ⅴ),鸡血藤则均未检出As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)。结论 该方法操作简便、结果准确、重复性好,能满足4种不同价态砷的残留限度分析。     

杨树花高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立杨树花HPLC指纹图谱以控制杨树花质量。方法 采用HPLC对10批不同产地的杨树花进行指纹图谱构建和方法学考察,运用指纹图谱参数共有峰和相似度进行分析,并对图谱进行聚类分析和主成分分析。结果 建立了杨树花HPLC指纹图谱评价方法,确定了Unitary C₁₈（4.6 mm×250 mm,5µm）色谱柱和乙腈-0.1%甲酸为流动相洗脱系统,在290 nm检测波长下优化了梯度洗脱程序,得到了峰形、分离度较理想的色谱图。通过杨树花HPLC指纹图谱的构建,得到了12个色谱峰,10批杨树花的相似度均在0.9~1.0之间,聚成2类。结论 经方法学考察和统计分析,建立的杨树花HPLC指纹图谱方法稳定、可行。     

HPLC法同时测定款冬花中9个主要成分的含量

目的:建立HPLC-DAD法同时测定生药款冬花和蜜炙款冬花中绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个主要成分的含量。方法:采用正交设计优化提取方法,以提取时间、方法、溶剂、溶剂用量为主要影响因素,以9个分析物的总量为评价指标。分析物的色谱分离用Dikma DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)、Dikma Easy Guard C18保护柱(20 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为240 nm;柱温为25℃。结果:确定最佳提取方法为1.00 g生药样品用20 mL 95%乙醇超声提取1 h。绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个分析物的线性范围分别为62.5～2000μg.mL-1(r=0.9999),2.5～80μg.mL-1(r=0.9994),15.62～500μg.mL-1(r=0.9995),25～800μg.mL-1(r=0.9995),50～1600μg.mL-1(r=0.9992),37.5～1200μg.mL-1(r=0.9994),0.195～12.5μg.mL-1(r=0.9991),15.62～500μg.mL-1(r=0.9991),125～4000μg.mL-1(r=0.9995);平均加样回收率均在95.42%～105.0%范围内,RSD均在0.45%～4.5%范围内。结论:该方法准确,灵敏度高,重复性好,成本低,可用于款冬花中9个主要有效成分的含量测定。