HPLC法测定威喜丸中猪苓酮B、猪苓酮A、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸

目的建立HPLC波长切换法同时测定威喜丸中猪苓酮B、猪苓酮A、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸的方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;0～24.0 min在248 nm波长下检测猪苓酮B和猪苓酮A,24.0～50.0 min在210 nm波长下检测去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸;体积流量1.0m L/min;柱温30℃;进样量为10μL。结果猪苓酮B、猪苓酮A、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸分别在5.79～115.80、1.66～33.20、3.28～65.60、7.07～141.40、1.46～29.20、0.88～17.60μg/mL与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为98.75%、97.60%、98.23%、99.49%、97.10%、96.81%,RSD值分别为0.75%、1.66%、1.44%、0.90%、1.15%、1.38%。结论本方法简便、准确、重复性好,为威喜丸的质量控制提供了实验依据。     

滋癸益经汤联合滋肾育胎丸治疗卵巢早衰的研究

【目的】观察滋癸益经汤联合滋肾育胎丸治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效。【方法】将66例POF患者随机分为治疗组和对照组,每组各33例。治疗组给予口服滋癸益经汤加滋肾育胎丸治疗,对照组给予口服滋癸益经汤加维生素E胶囊治疗,3个月为1个疗程,共治疗2个疗程。观察2组患者治疗前、治疗3个月及6个月后的各项证候积分、月经情况、血清性激素水平[促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、抗苗勒氏管激素(AMH)]及彩超检查指标[子宫内膜厚度、卵巢体积、卵泡数量、卵巢最大血流速度(PSV)和卵巢阻力指数(RI)]的变化情况,并评价2组患者的疗效。【结果】(1)疗效方面:治疗6个月后,治疗组的总有效率为63.6%,对照组为39.4%,治疗组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)证候方面:治疗3个月后,治疗组在改善心烦失眠、潮热盗汗、咽干口燥方面明显优于对照组(P<0.05);而治疗6个月后,治疗组在改善咽干口燥、大便异常方面明显优于对照组(P<0.05)。(3)月经方面:治疗3个月后,治疗组在改善月经周期和经质方面明显优于对照组(P<0.05);而治疗6个月后,治疗组在改善经量和痛经方面明显优于对照组(P<0.05)。(4)彩超方面:治疗3个月后,治疗组在降低RI和增加PSV方面明显优于对照组(P<0.05);而治疗6个月后,治疗组在增加子宫内膜厚度方面明显优于对照组(P<0.05)。(5)性激素水平方面:治疗3个月后,2组患者血清FSH、LH、E2、AMH水平差值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而治疗6个月后,治疗组在提高患者血清AMH水平方面明显优于对照组(P<0.05)。【结论】滋癸益经汤联合滋肾育胎丸治疗POF疗效确切,不仅能改善患者症状和月经情况,还可提高患者血清AMH水平,增加子宫内膜厚度,改善双侧卵巢血供,降低卵巢血流阻力。     

五子衍宗丸对少弱精子症模型大鼠精子线粒体膜电位及超微结构影响

目的:研究五子衍宗丸对少弱精子症模型大鼠精子线粒体膜电位(MMP)水平及线粒体超微结构的影响。方法:取体重为200～220 g雄性SD大鼠60只,随机分成正常组,模型组,对照组(黄精赞育胶囊组),五子衍宗丸低、中、高剂量组,除正常组外,其他各组大鼠灌服雷公藤多苷[30 mg/(kg.d)],连续8周,制备少弱精子症模型。造模结束后,正常组、模型组给予等容量蒸馏水[10 ml/(kg.d)],对照组给予黄精赞育胶囊溶液[3.01 g/(kg.d)],五子衍宗丸各组分别给予水提液,低剂量组[2.30 g生药/(kg.d)],中剂量组[4.60 g生药/(kg.d)],高剂量组[9.20 g生药/(kg.d)],连续30 d。末次给药后30 min,采用荧光流式细胞技术(JC-1染色)测定精子MMP水平(JC-1+%),并通过透射电镜观察精子线粒体超微结构的改变。结果:①MMP:JC-1+%和强度分别为:正常组70.80±4.92、4 360±945;模型组33.77±6.19、1 4685±496;对照组56.34±10.35、3 277±895;五子衍宗丸低剂量组40.80±10.40、2 016±767;中剂量组59.40±6.51、3 897±643;高剂量组60.71±7.81、3 371±6467。造模各组大鼠精子线粒体JC-1+%及强度均明显下降,与正常组比较差异有显著性意义(P均<0.05);连续给药30 d后,给药各组均能明显提高精子MMP,增加JC-1+%,除低剂量组外,其他用药各组与模型组比较差异有显著性意义(P均<0.05)。②精子线粒体超微结构:雷公藤造模后,精子外膜松散、变性,线粒体肿胀、大小不一、线粒体膜不完整,轴丝结构不清或出现断裂。给予五子衍宗丸30 d后,精子外膜及线粒体膜结构完整,减少线粒体肿胀,轴丝及微管结构基本正常。结论:雷公藤多苷能降低精子MMP水平,破坏线粒体的结构。五子衍宗丸能明显提高少弱精子症模型大鼠精子MMP水平,减轻精子线粒体结构损伤。保护精子线粒体结构与功能的完整是五子衍宗丸治疗少弱精子症的机制之一。     

HPLC法测定调中四消丸中咖啡酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、圆柚酮和α-香附酮

目的建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定调中四消丸中咖啡酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、圆柚酮、α-香附酮。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;0~21 min在325 nm波长下检测咖啡酸;21~37 min在254 nm波长下检测芦荟大黄素、大黄酸和大黄素甲醚,37~55 min在242nm波长下检测圆柚酮和α-香附酮;体积流量:0.9 mL/min;柱温:30℃;进样量为10μL。结果咖啡酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、圆柚酮、α-香附酮分别在2.48~49.60、17.56~351.20、4.59~91.80、6.76~135.20、1.92~38.40、4.26~85.20μg/mL与峰面积线性关系良好;平均回收率分别为98.01%、99.27%、97.61%、99.41%、96.90%、98.58%,RSD值分别为0.77%、1.18%、0.96%、1.25%、1.48%、1.17%(n=6)。结论本方法简单快速,可作为调中四消丸的质量控制方法。     

滋肾育胎丸联合氯米芬治疗排卵障碍性不孕症的疗效观察

目的探究滋肾育胎丸联合氯米芬治疗排卵障碍性不孕症的临床疗效。方法选取2015年2月—2016年12月海南省妇幼保健院生殖医学中心门诊收治的141例排卵障碍性不孕症患者,随机分为对照组(70例)和治疗组(71例)。对照组患者口服枸橼酸氯米芬胶囊,月经规律者在月经第5天开始服药,闭经或月经无规律者则在黄体酮诱导撤退性出血后第5天开始服药,50 mg/次,1次/d,连续服用5 d;月经周期的第10天开始隔日超声监测卵泡及子宫内膜生长情况,当优势卵泡直径18 mm时,肌肉注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10 000 U。治疗组在对照组的治疗基础上口服滋肾育胎丸,自月经周期第5天开始,5 g/次,3次/d,连续治疗20 d。所有患者均连续治疗4~6个月经周期。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后成熟卵泡数、子宫内膜厚度、宫颈黏液评分及内分泌激素变化情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为81.43%、94.37%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者成熟卵泡数、宫颈黏液评分均显著升高,治疗组子宫内膜厚度显著升高,同组治疗前后差异有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组成熟卵泡数、子宫内膜厚度、宫颈黏液评分显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。肌肉注射HCG当日,两组患者血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平均显著高于月经周期第5天时水平,而血清睾酮(T)水平显著降低,同组治疗前后差异有统计学意义(P0.05);HCG日,治疗组E_2、LH、FSH水平高于对照组,T水平低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。对照组和治疗组的不良反应发生率分别为20.00%、7.04%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论滋肾育胎丸联合氯米芬治疗排卵障碍性不孕症具有较好的临床疗效,可明显改善患者的内分泌水平,安全性较高,具有一定的临床推广应用价值。     

荣心丸治疗儿童病毒性心肌炎(气阴两虚或兼心脉瘀阻证)的多中心临床研究

目的 观察荣心丸治疗儿童病毒性心肌炎（气阴两虚或兼心脉瘀阻证）的有效性以及临床应用的安全性。方法 采用随机、双盲双模拟法试验,从6家中心选择儿童病毒性心肌炎（气阴两虚或兼心脉瘀阻证）患者280例,按3∶1比例分为试验组210例、对照组70例。试验组口服荣心丸每次4.5~9 g,3次/d;对照组口服辅酶Q10胶囊每次10~20 mg,2次/d。疗程均28 d。观察治疗前后心肌炎症状积分和、心电图、超声心动图、心肌酶,以及中医证候疗效、疾病疗效的改善情况。结果 疗后28 d的FAS（PPS）分析结果显示,试验组、对照组的心肌炎症状积分和下降均值分别为5.975（6.000）、4.721（4.788）,证候疗效的总有效率分别为91.62%（90.59%）、70.59%（71.21%）,疾病疗效的总有效率分别为90.14%（92.08%）、72.06%（72.73%）,试验组高于对照组,组间差异有统计学意义（P<0.05）。研究者共报道临床不良事件3例,经研究者判断,与试验药物均不可能有关,均不属于药物不良反应。结论 荣心丸治疗儿童病毒性心肌炎（气阴两虚或兼心脉瘀阻证）疗效优于辅酶Q10,并且未提示更高临床应用风险。     

固肾安胎丸联合保胎无忧片治疗早期先兆流产的疗效观察

目的探讨固肾安胎丸联合保胎无忧片治疗早期先兆流产的临床疗效。方法选取2014年4月—2016年8月衡水市第二人民医院收治的早期先兆流产患者178例,随机分为对照组和治疗组,每组各89例。对照组患者口服保胎无忧片,4片/次,3次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服固肾安胎丸,1袋/次,3次/d。两组均连续治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后血人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)和孕酮的变化情况。于妊娠12周及治疗后12周对患者进行随访,观察其远期疗效。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为75.28%、87.64%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组β-HCG和孕酮水平均显著上升,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组β-HCG和孕酮水平高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。妊娠12周对照组和治疗组的有效率分别为70.79%、83.15%。于治疗后12周两组有效率分别为69.66%、79.78%,两组妊娠12周,治疗后12周的有效率比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论固肾安胎丸联合保胎无忧片治疗早期先兆流产具有较好的临床疗效,可提高血清β-HCG和孕酮水平,具有一定的临床推广应用价值。     

玉泉丸HPLC指纹图谱的建立及6个成分定量分析

目的建立玉泉丸HPLC指纹图谱,并同时测定玉泉丸中6种成分含量,为玉泉丸质量控制提供科学依据。方法采用HPLC法,Symmetery C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0m L/min,柱温30℃。建立11批玉泉丸HPLC指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)、聚类分析及主成分分析进行评价,同时测定葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷的含量。结果建立了玉泉丸的HPLC指纹图谱,标定了共有峰12个,各批相似度均在0.9以上。多成分定量分析条件通过方法学考察,6个成分加样回收率均在92.06%～109.34%,RSD均在0.22%～2.76%。11批玉泉丸中葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷含量范围分别为0.838～2.777、0.550～1.014、0.312～0.618、0.023～0.092、1.154～1.674、0.035～0.052 mg/g。结论 HPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法,快速、简便、重复性好,可为玉泉丸的质量控制提供方法学参考。     

液质联用法测定七宝美髯丸中5种成分的含量

目的：建立UPLC-PDA-MS/MS法同时测定七宝美髯丸中二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量。方法：采用InertSustain^® C₁₈（3.0 mm×100 mm,3.0 μm）色谱柱,甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,进样量10 μL;PDA扫描范围：200~400 nm;质谱采用电喷雾离子源（ESI源）,正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果：七宝美髯丸中5种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为99.06%~102.24%,精密度RSD值小于2%。在所设定的色谱条件下,七宝美髯丸中5个成分（二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素和异补骨脂素）于10 min内完全分离。结论：建立的UPLC-PDA-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于七宝美髯丸中多种成分的含量测定和质量控制。     

高效液相色谱法同时测定六君子丸中7种成分的含量

目的：采用高效液相色谱法同时测定六君子丸中橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸共7种成分的含量。方法：色谱柱为Venusil MP-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5.0 μm）;流动相为甲醇-乙腈（45∶55,A）和0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速：1.0 mL·min^-1;柱温：40 ℃。结果：7种有效成分橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸分别在3.010~301.0 μg·mL^-1（r=0.999 6）、0.154~15.4 μg·mL^-1（r=0.999 4）、0.202~20.2 μg·mL^-1（r=0.999 2）、1.025~102.5 μg·mL^-1（r=0.999 5）、1.240~124.0 μg·mL^-1（r=0.9993）、5.030~503.0 μg·mL^-1（r=0.999 5）、0.412~41.2 μg·mL^-1（r=0.999 3）范围内含量与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率在96.59%~98.34%之间。6批次供试品中橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸的含量分别为：5.126~5.773,0.058~0.078,0.105~0.132,1.257~1.514,2.012~2.241,8.256~8.425,0.235~0.334 mg·g^-1。结论：所建立的方法简便、快速、准确,可用于六君子丸的质量控制。