Evaluation of an immunoenzimatic test (ELISA) for the diagnosis of leptospirosis in Italy

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was assessed to detect in humans IgM and IgG against the main serogroups/serovars of Leptospira present in Italy. Sonicated antigens from strain Wijnberg, serogroups Icterohaemorrhagiae and Riccio 2, serogroup Australis, were used in ELISA and the results were compared to microagglutination test (MAT). IgM were confirmed to be the predominant class of antibodies; the total sensitivity obtained by Wijnberg/ELISA with the sera of patients infected by different serogroups was 81.5% in relation to MAT, better sensitivity was achieved by the use of Riccio 2/ELISA; no reaction occurred with the control sera. Cross-reactivity was noted with some sera of patients with Lyme disease (IgM) and with few sera of patients with autoimmune disease (IgM and IgG).To improve the sensitivity of the ELISA both antigens Wijnberg and Riccio 2 must be employed in the immunoenzimatic assay, since serogroup Australis must be considered as a new emerging serogroup causing human leptospirosis in our country.Corresponding author.     

鸡血藤提取物的抗肿瘤作用研究

目的：研究鸡血藤提取物的体内与体外抗肿瘤作用。方法：采用mT法检测鸡血藤提取物对体外培养的5种肿瘤细胞增殖的抑制作用;体内试验采用小鼠实体瘤S180细胞株接种小鼠,建立实体瘤与腹水瘤模型。计算抑瘤率与生命延长率。结果：鸡血藤提取物在5μg／ml-80μg/ml剂量的范围内对5种肿瘤细胞均有抑制作用。体内试验小鼠分另吐灌胃给予20mg/kg、50mg／kg、100mg／kg,能抑制小鼠体内肿瘤增长。也能明显提高腹水瘤小鼠的生命延长率。结论：鸡血藤提取物在体外对不同组织来源的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用;在体内能抑制小鼠体内瘤体生长,明显延长小鼠的生存期。     

鸡血藤高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立鸡血藤的高效液相色谱指纹图谱，以评价鸡血藤的质量。方法 用HPLC法获得鸡血藤药材的色谱图，再用聚类分析方法进行考察。结果 鸡血藤共有11个峰，其中非共有峰6个，共有峰5个，共有峰的相对保留时间分别为：0．046，0．664，1．000，1．198，1．383；相对峰面积分别为：0．819，0．221，1．000，0．331，0．458。鸡血藤及其混淆品种的色谱指纹图谱存在明显差异，所提取的11个色谱峰可作为指纹特征。结论 HPLC色谱指纹图谱分析技术可用于鸡血藤药材的鉴别。     

首乌藤多糖的分离纯化及初步结构解析

目的:精制首乌藤中多糖并对其化学结构进行初步解析.方法:经脱脂、水提、分级醇沉、脱色、透析等工艺制备首乌藤粗多糖,通过纤维树脂柱和凝胶柱进行分离和纯化.采用化学分析方法对得到的多糖进行理化性质分析,并通过高效凝胶渗透色谱(HPGPC),气相色谱(GC),紫外光谱(UV)及红外光谱(IR)等对样品进行纯度鉴定、相对分子质量测定、单糖组成及结构分析.结果:分离纯化得到6种均一多糖(SWTPA-1,SWTPB-1,SWTPB-2,SWTPB-3,SWTPC-1,SWTPC-2),相对分子质量分别为9 162,56 314,44 502,37 278,40 558,61 000.均不含大分子蛋白质、多肽、核酸、淀粉类物质、酚类化合物,均含有糖类物质的IR特征吸收峰.SWTPA-1,SWTPC-1和SWTPC-2为中性多糖,SWTPB-1,SWTPB-2和SWTPB-3可能为酸性多糖,SWTPA-1,SWTPB-1,SWTPB-3,SWTPC-1和SWTPC-2为吡喃糖且含有β型糖苷键,SWTPB-2为吡喃糖且含有β型和α型2种糖苷键,SWTPB-2,SWTPB-3,SWTPC-1和SWTPC-2还含有呋喃糖环.结论:首次从首乌藤中分离纯化出了6种均一多糖,聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶S-300可用于多糖的分离与纯化,糖醇乙酸酯衍生化法可较好地实现首乌藤多糖水解产物的衍生化.     

星点设计-效应面法优选石斛酒润蒸制工艺

目的: 采用星点设计-效应面法优选优选石斛的酒润蒸制工艺。方法: 采用HPLC测定石斛碱含量,色谱条件为Diamonsil 钻石二代 C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-水(0.1%三乙胺)梯度洗脱(0~30 min,30%~80%乙腈;30~40 min,80%乙腈),流速1 mL·min^-1,检测波长240 nm,柱温30℃,进样量10 μL。利用UV测定石斛多糖含量,以白酒体积分数、白酒加入量、蒸制时间为自变量,石斛碱与石斛多糖含量的总评归一值为因变量,通过星点设计-效应面法优选石斛的炮制工艺。结果: 石斛碱线性范围0.336~3.36 μg(R²=0.999 8),精密度RSD 1.24%,重复性RSD 1.06%,平均加样回收率97.62%(RSD 1.45%);石斛多糖线性范围0.020 32~0.101 6 g·L^-1(R²=0.997 1),精密度RSD 1.71%,重复性RSD 1.90%。最佳炮制工艺为白酒体积分数48%,白酒加入量17%,蒸制时间6.78 h。石斛碱平均质量分数0.303%,预测值0.292%,相对偏差3.76%;多糖平均质量分数12.3%,预测值11.8%,相对偏差4.24%,建立的模型预测性良好。结论: 优选的石斛酒润蒸制工艺简便、稳定。     

石斛类药材的红外光谱鉴别研究及其抗氧化活性比较

目的：探讨石斛类药材的红外光谱鉴别方法及其抗氧化活性。方法：对12种石斛的水浸出物粉末的KBr压片进行了红外光谱测定,采用比色法比较它们对超氧阴离子和羟自由基的清除作用。结果：不同来源石斛的红外光谱和抗氧化活性有一定的差别,除报春石斛、流苏石斛有促进超氧阴离子自由基生成作用外,其余10种石斛类药材均有清除超氧阴离子和羟自由基的作用。结论：石斛类药材的红外光谱可以作为其种间鉴别的辅助手段。     

温度对铁皮石斛组培苗质量的影响

目的: 考察温度对铁皮石斛组培苗质量的影响,为该药材的人工栽培提供参考。方法: 将增殖阶段和生根阶段的铁皮石斛组培苗在湿度、光照强度、光照时间可控的环境条件下,设置温度分别为15,20,25,30,35 ℃共5个梯度进行实验,观察组培苗生长状况,利用Pearson相关性分析增殖阶段温度与苗株数、株高,生根阶段温度与株高、茎粗、叶片数、根数、根长的相关性,并对每个温度间生长指标差异性进行方差分析。结果: 25~30 ℃的组培苗质量较好,表现出良好的生长和繁殖能力;Pearson相关性分析显示在增殖阶段温度跟苗株数和株高在0.01水平上显著相关;在生根阶段温度跟株高、叶片数、根数在0.01水平上显著相关。LSD多重比较显示在增殖阶段苗株数、株高的差异性明显;生根阶段叶片数、根数、株高差异性明显。结论: 温度是影响铁皮石斛组培苗质量的关键因子,最适温度25 ℃。     

苍术、买麻藤抗高尿酸活性部位筛选

目的 筛选苍术、买麻藤中降低尿酸的活性部位.方法 分别提取分离苍术、买麻藤的不同化学部位,连续给药一周,测定高尿酸模型小鼠体内尿酸水平及黄嘌呤氧化酶活性.结果 苍术各部位均能显著降低模型小鼠的血尿酸水平,其中总提取液(Ⅲ)效果最佳;买麻藤部位(Ⅳ)可显著抑制黄嘌呤氧化酶的活性,降低模型小鼠的血尿酸水平.结论 苍术总提取...     

不同产地通关藤中总皂苷的含量测定

目的：建立了以通关藤苷D为对照,采用比色法测定通关藤中总皂苷含量的方法,比较了不同产地通关藤药材中总皂苷的含量,为通关藤药材的质量控制提供依据。方法：以通关藤苷D作为对照品,采用香草醛一高氯酸法显色,在462nm处测定通关藤中总皂苷的含量,并对其方法学进行系统考察。结果：本品在16．08μg～160．μ8嵋范围内吸光度与含量成良好的线性关系,r=O．9993（n=5）,重复性良好,回收率RSD小于3％（n=6）。结论：此方法稳定可靠、重复性好,可控制药材质量,且其4个不同产地通关藤中云南的总皂苷含量为最高,这与云南为通关藤地道药材相一致。     

高效液相色谱法测定导赤散及其配伍组中马兜铃酸A的含量

目的通过比较导赤散及其配伍组中马兜铃酸A的含量,探索方剂配伍减毒的作用。方法采用色谱法,色谱柱为Diamon TmC18（250mm×4．6mm,51μm）,甲醇-水-冰乙酸（72：27：1）为流动相;柱温：室温;检测波长315nm;流速1．0mL／min。结果关木通组、导赤散组、配伍一组、配伍二组的马兜铃酸A含量分别为：0．549mg／g、0．357mg／g、0．226mg／g、0．316mg／g。结论生药关木通经过配伍后,马兜铃酸A的含量能显著降低。