健脾消癌方对小鼠大肠癌皮下移植瘤细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:通过体内实验研究健脾消癌方对小鼠大肠癌皮下移植瘤细胞凋亡及相关蛋白表达的影响,探讨其抗大肠癌复发转移的作用机制。方法:通过皮下注射结肠癌细胞CT-26构建大肠癌皮下移植瘤小鼠模型,随机分为模型组,健脾消癌方低(15.75 g·kg~(-1)),中(31.5 g·kg~(-1)),高(63 g·kg~(-1))剂量组及5-氟尿嘧啶(5-Fu)组,分别给药14 d后,处死小鼠,剪取瘤体、称取瘤质量后剪碎瘤组织,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,并采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果:与模型组比较,健脾消癌方(15.75,31.5,63 g·kg~(-1))组瘤质量均减轻(P0.05),细胞凋亡率均升高(P0.05);B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)表达增高(P0.05),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达降低(P0.05);与健脾消癌方(15.75,31.5 g·kg~(-1))组比较,健脾消癌方(63 g·kg~(-1))组Bax,Caspase-3,Caspase-8增高明显(P0.05)。结论:健脾消癌方可通过促进小鼠大肠癌皮下移植瘤细胞凋亡实现抑瘤作用,其机制可能与其调节细胞凋亡相关蛋白表达有关。     

补肾调冲方联合常规西药治疗复发性流产肾虚血瘀型疗效及对患者血清Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响

目的:探讨补肾调冲方联合常规西药治疗肾虚血瘀型复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)疗效及对患者血清Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响。方法:以西南医科大学附属医院2015年3月—2016年8月收治的122例RSA肾虚血瘀型患者为研究对象,遵循成组序贯设计分为治疗组与对照组,各61例。两组患者同时给予地屈孕酮片,在此基础上,治疗组加服补肾调冲方,待妊娠12周末,对两组患者临床疗效,血清β-绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-HCG),孕酮(progesterone,P),白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),IL-2/IL-10以及血液流变学进行比较。结果:治疗组患者总有效率为91.80%,对照组为80.33%,治疗组优于对照组(P0.05);与治疗前比较,治疗后,两组RSA患者血清β-HCG与P明显升高,且治疗组明显高于对照组(P0.05);与治疗前比较,治疗后,两组RSA患者血清中IL-10水平明显升高,IL-2水平,IL-2/IL-10明显降低,且治疗组明显优于对照组(P0.05);经治疗,两组CPID患者全血高、低切黏度,红细胞聚集指数与红细胞压积均明显降低,且治疗组明显低于对照组(P0.05)。结论:补肾调冲方联合常规西药对RSA肾虚血瘀型患者具有积极的治疗效果,可以显著提高患者血清P与β-HCG水平,调节患者Th1/Th2细胞因子平衡,改善微循环障碍,因此值得在临床上推广。     

扶正抑瘤方联合新辅助化疗、腹腔镜辅助胃癌根治术治疗进展期胃癌痰瘀毒结证患者的疗效观察

目的:观察扶正抑瘤方联合新辅助化疗、腹腔镜辅助胃癌根治术治疗进展期胃癌痰瘀毒结证患者的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:选择2012年1月至2014年6月于南华大学附属第一医院住院治疗的进展期胃癌痰瘀毒结证患者106例,采用随机数字表法将患者随机分为观察组和对照组,各53例。对照组患者给予新辅助化疗联合腹腔镜辅助胃癌根治术,新辅助化疗方案采用奥沙利铂(OXA)+亚叶酸钙(CF)+氟尿嘧啶(5-Fu)(FOLFOX6)方案进行,观察组在对照组治疗基础上,给予扶正抑瘤方治疗。观察并比较两组患者的临床反应率和疾病控制率,不良反应发生情况,Karnosfsky评分,生存时间,肿瘤复发及转移情况。同时,检测并比较两组患者的CD3+,CD4+,CD8+,阳性T细胞以及NK细胞(CD16+CD56+),炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-6,急性期反应蛋白(CRP)及血红素氧化酶-1(HO-1)的水平,并比较两组患者肿瘤标志物癌胚抗原(CEA),癌抗原(CA)724,CA50及复发转移相关指标基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9,血管内皮生长因子(VEGF)-A,VEGF-C的水平变化。结果:观察组的临床反应率明显高于对照组(P0.05),疾病控制率略高于对照组,但差异不具有统计学意义。观察组KPS增加≥10分,或减少10分37例,有效率为69.8%,明显高于对照组的39.6%(P0.05)。且经手术后,两组患者TNF-α,IL-6,CRP及HO-1等应激指标水平均较术后1 d明显降低(P0.05),且观察组治疗后各项指标降低程度较对照组更明显(P0.05)。观察组患者的CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+,NK细胞水平均较本组治疗前明显增高(P0.05);而CEA,CA724,CA50等肿瘤标志物水平,MMP指标,VEGF指标水平明显降低(P0.05)。观察组患者白细胞减少、恶心呕吐、黏膜反应、乏力的发生率低于对照组(P0.05)。结论:扶正抑瘤方联合新辅助化疗、腹腔镜辅助胃癌根治术治疗进展期胃癌痰瘀毒结证患者临床疗效确切,可明显减轻因化疗引起的不良反应,改善术后患者的应激水平,提高患者免疫防御功能,提高患者生存质量,抑制肿瘤的复发与转移,值得临床借鉴应用。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠脑海马细胞凋亡及ERK2，CREB表达的影响

目的:探讨补肾活血方治疗血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠脑海马细胞凋亡的作用与机制。方法:75只SD雄性大鼠经水迷宫筛选后,随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,补肾活血方高、低剂量(10.14,5.07 g·kg~(-1)·d~(-1))组,共5组,除假手术组外,其余各组采用两血管阻断法制备VD大鼠模型。补肾活血方高、低剂量组和尼莫地平组分别予补肾活血方药及尼莫地平片治疗30 d,各组大鼠进行Morris水迷宫测试,并采用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)测定脑海马细胞凋亡情况,免疫组化法及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠脑海马细胞外信号调节激酶2(ERK2),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P0.05),穿越平台次数及原平台停留时间均减少(P0.01),脑海马细胞凋亡积分吸光度(IA)显著升高,平均灰度值显著下降(P0.01),脑海马ERK2,CREB(免疫组化)表达的IA明显下降,平均灰度值明显升高(P0.05),蛋白表达量(Western blot)显著下降(P0.01);与模型组比较,补肾活血方高、低剂量组能提高大鼠水迷宫学习记忆能力,降低细胞凋亡IA(P0.01),升高平均灰度值(P0.01),提高脑海马组织ERK2,CREB的IA和蛋白表达量(P0.05,P0.01)。结论:补肾活血方药可能通过调控大鼠海马ERK/CREB信号通路,抑制海马细胞凋亡,从而改善VD大鼠学习记忆能力。     

韩冰教授补肾活血化痰汤治疗多囊卵巢综合征经验

韩冰教授擅用补肾活血化痰法治疗多囊卵巢综合征,认为该病病位在肾及冲任,病性虚实兼夹,临床常见肾虚兼痰瘀互结、湿热熏蒸、痰气交阻3种证型,治重温补肾阳,兼顾活血除痰、清利湿热、化痰行气,并随证对应月经周期有所侧重,予以加减。     

扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质TGF-β1、E-cadherin和α-SMA表达的影响

[目的]探讨扶肾方对尿毒症大鼠腹膜间充质转化生长因子-β1（TGF-β1）、E-钙黏素（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。[方法]采用SD大鼠切除5/6肾脏+1.5%百特腹透液的方法复制大鼠腹膜纤维化模型。扶肾方干预6周后,检测血清学指标肌酐和尿素氮的含量;苏木精-伊红（HE）染色观察腹膜病理改变;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组腹膜间皮标志物E-cadherin和α-SMA的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法检测TGF-β1含量的变化。[结果]扶肾方干预后,各组血清肌酐及尿素氮均呈现下降趋势,尤其以高剂量组最为明显（P<0.05）;扶肾方组腹膜间皮细胞变性、脱落,炎症细胞浸润以及血管新生现象明显减少;RT-PCR检测结果显示,模型组E-cadherin较正常组表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）,TGF-β1、α-SMA较正常组表达上调,差异有统计学意义（P<0.01）,与模型组相比,扶肾方干预后的各组E-cadherin表达均有所上调,且以高剂量组上调最为明显（P<0.01）;TGF-β1、α-SMA中、高剂量组有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,其他组较正常组有下调趋势,低剂量组结果无统计学意义,中、高剂量组结果有统计学差异（P<0.05）。[结论]扶肾方很可能通过抑制TGF-β1,调节E-cadherin和α-SMA表达,从而抑制腹膜间皮细胞间质转化的发生。     

益气养阴解毒方含药血清对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡影响的体外实验

目的观察益气养阴解毒方含药血清对体外培养Lewis肺癌细胞(LLC)增殖和凋亡的影响。方法采用血清药理学方法,用SD大鼠制备益气养阴解毒方低、中、高剂量、顺铂(DDP)、益气养阴解毒方联合DDP、0.9%氯化钠溶液(NS)含药血清,体外培养LLC,采用MTT法测各组血清对LLC增殖的影响,流式细胞仪(FCM)Annexin V- FITC/PI标记法检测细胞凋亡率,免疫组织化学(SP法)测Caspase-3表达水平。结果益气养阴解毒方含药血清能够抑制体外培养LLC生长,且呈浓度和时间依赖性,高浓度作用72h抑制率达50%,中药联合DDP抑制率最高达94.67%;与对照组比较,各组含药血清均具有诱导LLC细胞凋亡的作用,并呈剂量和时间依赖关系,中药联合DDP作用最强,作用72h时,细胞凋亡率下降,而坏死率升高;凋亡相关蛋白Caspase-3的表达与药物剂量及作用时间呈依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),与其他各组比较,中药联合DDP作用最强(P<0.05)。结论益气养阴解毒方具有抑制LLC增殖及诱导其凋亡的作用,促进Caspase-3蛋白表达可能是其诱导LLC凋亡机制之一。     

基于“治未病”思想观察中药补肾调冲方对卵巢早衰大鼠2种相关生长因子表达的影响

目的 探讨中药补肾调冲方对卵巢早衰(POF)大鼠的防治作用及通过调控血管内皮生长因子(VEGF)、碱性纤维母细胞生长因子(b FGF)的表达调节卵巢功能及预防机制。方法 随机选取SD雌性大鼠60只,分别设空白、模型、中药低、中、高剂量组和西药组,每组10只。空白组自由饮水;模型组给予雷公藤多苷片造模14 d;中药组先给予低、中、高不同剂量补肾调冲中药36 d,再给予雷公藤多苷片造模14 d;西药组先给予结合雌激素36 d,再给予雷公藤多苷片造模14 d。实验结束后观察大鼠的卵巢指数、子宫指数;光学显微镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目;ELISA检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)的水平;免疫组织化学法检测VEGF及b FGF蛋白的表达;实时荧光PCR法检测VEGF、b FGF m RNA的表达。结果 模型组大鼠卵巢指数、子宫指数明显低于空白组、各给药组(P0.01);中药低剂量组卵巢指数与西药组比较有统计学差异(P0.05);与模型组比较,各给药组及空白组大鼠始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目明显增多,闭锁卵泡的数目明显减少(P0.01);中药低剂量组与西药组比较大鼠始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目明显减少,闭锁卵泡的数目明显增多(P0.05);与模型组比较,各给药组及空白组血清FSH、LH水平明显降低(P0.01),血清E2、AMH水平明显升高(P0.01);与模型组比较,各给药组及空白组VEGF、b FGF蛋白及m RNA表达明显降低(P0.01),中药低剂量组与西药组比较b FGF蛋白表达及m RNA明显降低(P0.05)。结论 中药补肾调冲方对卵巢具有一定的保护作用,预防效果明显,其作用机制可能与补肾调冲方中某些中药能够上调VEGF、b FGF的表达,为卵泡发育提供基础,复苏即将凋亡的卵泡,增强卵巢功能有关。     

滋肾通络方对MCAO大鼠神经行为及颅脑CT的影响

目的:观察滋肾通络方对MCAO大鼠颅脑CT的影响。方法:制作MCAO大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组。灌胃前后,分别行颅脑CT扫描并观察大鼠神经行为评分的变化,比较药物对其影响。结果:中药高、低剂量组、西药组大鼠颅脑CT缺血程度及神经行为评分均好于模型组;中药高、低剂量组缺血程度及神经行为评分好于西药组。结论:滋肾通络方可改善MCAO大鼠脑缺血程度及神经行为评分,从而对脑缺血损伤具有保护作用。     

围刺联合自拟养络镇痛方对抗带状疱疹后遗神经痛的疗效观察

目的 探讨围刺联合自拟养络镇痛方对抗带状疱疹后遗神经痛的疗效.方法 选取2019年4月至2020年4月于本院就诊的带状疱疹后遗神经痛患者200例作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组100例.对照组采用普瑞巴林治疗,观察组采用围刺联合自拟养络镇痛方治疗.比较两组临床疗效、简易Mcgill疼痛问卷(SF-MPQ)评分...