女贞子药材及贞芪利咽颗粒中齐墩果酸和熊果酸的测定

女贞子（Fructus Ligusm lucidi）系木犀科女贞属植物女贞（Ligustrum lucidum Ait．）的果实，含有多种化学成分，如齐墩果酸（oleanolic acid，1）、熊果酸（ursolic acid，2）、乙酰齐墩果酸等。1为女贞子中的主要有效成分，含量可达1．1％～14．8％。药理实验结果表明1具有促进淋巴细胞增殖和动物巨噬细胞吞噬功能，并与白介素2（IL-2）具协同作用.2在与1相同的剂量下，亦能明显增强正常小鼠巨噬细胞的吞噬功能。贞芪利咽颗粒为六类中药新药，由女贞子、黄芪、丹参、泽漆四味药材提取加工而成，用于治疗慢性咽炎。其中女贞子为君药，在制剂中应检测其有效成分1、2含量。现行标准中采用TLC法，误差大、重现性差，且难以将二者有效分离。文献采用HPLC法测定女贞子中1、2的含量，但仍未能完全分离，在制剂中会干扰有效成分测定。本研究采用反相HPLC法，以甲醇-水（87：13，含0．2％磷酸和0．04％三乙胺）为流动相，可较好分离女贞子药材及贞芪利咽颗粒中的1、2。     

枸杞子提取物对各种常见细菌抑菌及抗炎作用实验研究

目的观察枸杞子提取物对各种常见细菌抑菌及抗炎作用实验研究。方法采用K-B扩散法和二倍稀释法观察枸杞子提取物对各种常见细菌的抑菌作用;采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致小鼠足趾肿胀模型,观察枸杞子提取物的抗炎作用。结果枸杞子提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和链球菌的抑菌作用为中度敏感,对白色念珠菌和绿脓杆菌的抑菌作用为低度敏感。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌和绿脓杆菌的最低抑菌浓度分别为0.0625、0.0625、0.0625、0.125、0.25g/ml。与生理盐水组相比,枸杞子提取物显著降低小鼠的肿胀度(P<0.01),剂量越高作用越明显。结论枸杞子提取物具有一定的体外抑菌作用和抗炎作用,还具有降脂、抗衰老、抗诱变、耐缺氧、降血糖和对内分泌激素的调节等药理作用。     

RP-HPLC法测定绿衣枳实中柚皮苷的含量

目的建立绿衣枳实中柚皮苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(30∶70);检测波长为283nm;流速为1.0mL·min-1。结果柚皮苷在0.168~2.016μg呈良好的线性关系,回归方程为Y=1964.8X-2.55(r=0.9998),平均加样回收率为100.9%,RSD为2.12%(n=6)。结论本方法操作简便,结果准确,分离效果好,可用于该药材的质量控制。     

LC-QQQ/MS结合色差技术优选炒蒺藜饮片的炮制工艺

目的 建立一种蒺藜甾体皂苷含量测定和外观颜色均匀性检测方法来优化炒蒺藜炮制工艺。方法 以LC-QQQ/MS测定蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K的总含量作为化学指标,采用色彩色差仪测定炒蒺藜饮片总色值E^* ab,以30次随机抽取样品E^* ab值的RSD值作为外观颜色均匀性指标。在此基础上,采用L₉(3⁴)正交试验法,以炒制温度、炒制时间和炒药机转速为考察因素,优选炒蒺藜饮片的炮制工艺。结果 蒺藜呋甾皂苷B和蒺藜皂苷K均具有良好的线性关系(r>0.999),检测限分别为1.28,10.44 ng·mL^-1,定量限分别为5.40,27.81 ng·mL^-1,精密度、24 h稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%,平均加样回收率分别为96.66%和97.10%。色差技术可为炒蒺藜外观颜色均匀性提供客观化的数值。炒蒺藜最佳炮制工艺为200℃以60 r·min^-1转速炒制15 min。结论 LC-QQQ/MS结合色差技术所优选的蒺藜炒制工艺稳定可行,可为其他中药炮制工艺优化提供参考。     

基于16S rDNA序列测序的川楝子肝毒性机制研究

目的 通过观察川楝子对大鼠肠道菌群的影响,初步探讨川楝子肝毒性机制。方法 以大鼠为研究对象,川楝子组灌胃川楝子溶液,连续给予21 d,末次给药后收集粪便样本,抽提粪便DNA,于Illumina MiSeq分析平台进行16S rDNA测序。结果 川楝子显著提高血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量(P<0.05),降低总胆固醇(total cholesterol,CHO)、总蛋白(total protein,TP)含量(P<0.05)。菌群多样性分析和差异分析结果显示,川楝子降低大鼠肠道菌群多样性,可升高肠道厚壁菌门、放线菌门、杆菌、丹毒丝菌、乳杆菌属丰度;可显著降低梭菌、拟杆菌、瘤胃球菌属丰度。关联性分析显示,ALT和AST含量与双歧杆菌属、瘤胃球菌、粪球菌、脱硫弧菌、罗氏菌、梭菌、拟杆菌丰度显著相关;CHO、TP与普雷沃菌、密螺旋体、气球菌丰度显著相关。结论 川楝子能明显降低肠道菌群的多样性,其肝脏毒性机制可能与增加Allobaculum和丹毒丝菌的表达有关。     

衢枳壳黄酮类成分调节胃肠动力的谱效关系研究

目的 研究衢枳壳甲醇提取物的HPLC指纹图谱及其调节胃肠动力的谱效关系。方法 采用小肠炭末推进模型和离体回肠收缩模型得到调节胃肠动力的药效结果,经LC-MS分析并指认衢枳壳甲醇提取物中的各色谱峰,运用多元回归分析(multiple regression analysis,MRA)和双变量相关分析(bivariate correlation analysis,BCA),将衢枳壳甲醇提取物的药效数据与指纹图谱共有峰的相对峰面积相关联,分析谱效相关性。结果 采用LC-MS指认出12个色谱峰,经MRA和BCA,得出谱效方程(Y₁=52.379–0.255X₂+0.335X₃–4.499X₄+4.308X₅+0.750X₆,R²=0.959;Y₂=0.250+0.013 5X₂+0.023 0X₃+ 0.076 9X₆,R²=0.921),其中5个是相关峰,2个色谱峰呈现极显著的相关性。采用不同样品代入谱效方程做拟合验证后,该拟合方程的预测值与实测值的拟合误差均<3%。结论 衢枳壳甲醇提取物中芸香柚皮苷(峰2)、柚皮苷(峰3)、柚皮素(峰4)、橙皮苷(峰5)、新橙皮苷(峰6)可能是衢枳壳中调节胃肠动力的效应物质,其中柚皮苷(峰3)和新橙皮苷(峰6)呈现极显著的相关性,与调节胃肠动力密切相关。     

基于指纹图谱和网络药理学预测经典名方温胆汤中枳实的质量标志物

目的 基于指纹图谱和网络药理学预测经典名方温胆汤(Wendan decoction,WDD)中药材枳实的质量标志物(Q-Marker)。方法 建立枳实药材和WDD基准样品的指纹图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年A版)进行相似度分析和共有成分指认;采用网络药理学筛选共有成分的相关靶点和关键通路,并建立成分-靶点-通路网络,预测枳实发挥祛痰止呕,清胆和胃功效潜在的Q-Marker,并测定其含量。结果 建立了15批枳实药材和15批WDD基准样品的指纹图谱,15批枳实药材和WDD基准样品指纹图谱相似度>0.9,指认出5个化学成分,分别为柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素;网络药理学筛选分析得到5个化合物的TP53、MAPK8、EGFR、JUN、MMP9等32个核心靶点和癌症通路、内分泌抵抗通路等10条关键通路,构建了“成分-靶点-通路”网络图,预测柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素为WDD中枳实的Q-Marker。WDD中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量≥0.011 7%,0.025 3%,0.025 7%,0.010 4%,0.010 7%。结论 WDD中枳实的Q-Marker预测分析为建立完整的WDD质量评价体系提供参考,也为阐明其药效物质基础的作用机制奠定了基础。     

基于经典名方的山茱萸本草考证

山茱萸作为临床常用中药,具有补益肝肾,收涩固脱之效。鉴于历代医药学家对山茱萸药用部位颇有争议,笔者通过查阅历代本草、医学典籍,结合现代相关文献、标准等资料,对山茱萸名称、基原、产地变迁及品质、药用部位、采收加工及炮制、性味功效、用法用量等内容进行本草学考证,为确保含有山茱萸的经典名方能够精准用药以及为进一步开发利用提供参考。经考证可知,山茱萸从古至今来源为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.,最早产于山东、陕西一带,后延伸至河南、浙江等地大量栽培,现商品多以浙江所产品质为佳。山茱萸最初应是以全果实入药,但由于“核能滑精”说的影响致使山萸肉(去核之果肉)成了历代主流品规,但在临床实际应用中,2种规格均存在,应根据患者类型辨证使用。山茱萸在历代本草、医学典籍中记载的炮制方法也较多,但主流品种为山茱萸生品和酒萸肉。此外,山茱萸性味也从最初“味酸,平、微温无毒”演变为“味酸、涩,性微温”,历代用药剂量更是与药典规定的剂量范围出入较大,建议临床医师在条件允许的情况下,应根据患者及病证类型,选择合适的经方剂量,以最大限度保证山茱萸应有的临床疗效。     

桑椹子的提取工艺研究

目的:比较不同提取法对桑葚多糖提取的影响。方法:以桑葚多糖得率为目标,比较水提取与超声提取的优劣,并采用正交试验优化两种试验条件。结果:两种提取工艺中,超声波提取得率较高,水提取次之。结论:超声提取是较好的提取方法,可用于桑葚多糖的提取。     

基于BP神经网络和遗传算法优化茺蔚子水苏碱提取工艺的研究

【目的】优化茺蔚子中水苏碱的提取工艺。【方法】采用正交设计,应用误差反向后传（BP）人工神经网络建立茺蔚子水苏碱提取时间、乙醇浓度、料液比与盐酸水苏碱含量之间的关系模型,再结合遗传算法优化提取工艺参数。【结果】提取工艺优化参数为：提取时间62 min、乙醇浓度体积分数69%、料液比11倍,网络模型优化结果稍优于正交试验结果。【结论】 BP神经网络结合遗传算法寻优,能较好地实现茺蔚子水苏碱提取工艺参数的优化,可为解决多维非线性系统的工艺参数优化问题提供崭新而有效的途径。