龙牙楤木三萜皂苷合成途径关键酶AeFPS基因的克隆及原核表达

目的 克隆龙牙楤木法呢二磷酸合成酶（AeFPS）基因并进行原核表达。方法 以龙牙楤木为材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,克隆AeFPS基因,并将该基因定向插入Sca I/BamH I切开的原核表达载体pET-28a上,转化大肠杆菌BL21,于28 ℃,IPTG诱导5 h,经SDS-PAGE电泳分析,检测出明显的差异条带,Western blotting进一步检测其为目的基因。结果 克隆到AeFPS基因cDNA全长为1 040 bp,含有1 029 bp的开放阅读框（ORF）,编码342个氨基酸,GenBank登录号为HM219226.1。成功构建了原核表达质粒pET28a/AeFPS、AeFPS蛋白在BL21中高度表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定了目标蛋白。结论 首次获得了AeFPS基因,并将其连入原核载体中成功表达,为研究AeFPS蛋白的活性及生化功能奠定了基础。     

龙牙楤木中多糖含量的测定

目的:分别从龙牙木忽木茎皮及心材、芽、叶中提取龙牙木忽木多糖并测定其含量.方法:采用水提醇沉法提取龙牙木忽木多糖,用改良的硫酸-苯酚法测定其含量.结果:测定龙牙木忽木多糖在四个不同部位的含量分别为:茎皮:20.39%,茎心材:11.17%,芽:20.21%,叶:13.29%.结论:改进的硫酸-苯酚法操作简单、准确度高、灵敏度好.     

楤木皂苷抗肝纤维化的实验研究

目的 研究楤木皂苷对四氯化碳（CCl4）致大鼠实验性肝纤维化的防治作用.方法 采用40% CCl4皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,检测各组大鼠血清肝功能及肝脾指数的变化,HE染色观察肝组织病理学改变.结果 楤木皂苷可改善肝功能、肝脾指数,抑制肝假小叶的形成和胶原纤维沉积.结论 楤木皂苷对CCl4致大鼠实验性肝纤维化有保护作用.     

黔产棘茎楤木抗炎作用及部分机制研究

目的:研究黔产棘茎楤木的抗炎作用及部分机制.方法:采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导小鼠足爪肿胀、棉球诱导小鼠肉芽肿.弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎(AA)模型:设正常对照组、模型对照组、阳性药对照组(雷公藤多苷片12 mg·kg-1)、黔产棘茎楤木高、中、低剂量组(剂量分别为3.5,1.75,0.88 g·kg-1);除正常对照组外,其余各组均采用弗氏完全佐剂足跖sc复制AA模型;各组于造模当天ig给药,连续35 d,采用硝酸还原法检测各组血清中一氧化氮(NO)含量;放免法检测各组血清中白介素-1β( IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:黔棘茎楤木高、中剂量组对小鼠耳肿胀、足爪肿胀有明显抑制作用(P＜0.01,P＜0.05);对小鼠棉球肉芽肿亦有较好的抑制作用(P＜0.05);并能降低AA大鼠血清中NO,IL-1β,TNF-α含量(P＜0.01,P＜0.05).结论:黔棘茎楤木可能是通过影响炎性介质的释放和NO的生成而发挥抗炎作用的.     

飞天蜈蚣七对肝纤维化大鼠醛固酮的影响

目的:探讨飞天蜈蚣七对肝纤维化大鼠醛固酮(ALD)的影响。方法:实验分为正常对照组、肝纤维化组、飞天蜈蚣七组。用复合因素制备肝纤维化模型,飞天蜈蚣七组每日按100mg·kg~(-1)制成1ml溶液灌胃,观察其治疗肝纤维化的作用。结果:①VG染色,网状纤维染色可见飞天蜈蚣七组肝纤维化程度明显降低(P<0.01)。②肝纤维化组血清,肝组织ALD水平较正常对照组明显升高(P<0.05);飞天蜈蚣七组与正常对照组相比,血清、肝组织ALD均升高(P<0.05)。结论:飞天蜈蚣七对肝纤维化有改善作用,ALD在血清和肝组织均升高,可能是由于其拮抗ALD受体,导致ALD代偿性增加所致。     

太白楤木对CCl4诱导肝纤维化大鼠的干预作用

通过40%CCl₄橄榄油剂3 mL·kg^-1腹腔注射,2次/周,连续8周诱导的肝纤维化大鼠模型,观察太白楤木对CCl₄诱导的肝纤维化模型大鼠肝组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA表达水平及Bcl-2,Bax蛋白表达水平的影响。取雄性SD大鼠60只,将选取的60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,太白楤木高、中、低剂量组(10,7.5,5.0 mL·kg^-1)和秋水仙碱组。HE及Masson染色观察肝组织病理学改变;RT-PCR检测VEGF,TGF-β1 mRNA表达水平;Western blot检测Bcl-2,Bax蛋白表达水平。实验研究发现:模型组可见明显的肝细胞变性、坏死,大量胶原纤维组织增生,部分可见假小叶形成;太白楤木各剂量组及秋水仙碱组肝细胞变性坏死减轻,胶原纤维组织增生减少,未见明显假小叶形成。与模型组相比,太白楤木各剂量组及秋水仙碱组VEGF mRNA表达均有不同程度减低(P<0.05),太白楤木高、中剂量组TGF-β1 mRNA表达减低(P<0.05);太白楤木高、中剂量组VEGF mRNA表达较秋水仙碱组减低(P<0.01);太白楤木高剂量组TGF-β1 mRNA表达较秋水仙碱组减低(P<0.05)。与模型组相比,太白楤木各剂量组及秋水仙碱组Bcl-2蛋白表达均减低(P<0.05),Bax蛋白表达则升高(P<0.05)。太白楤木具有良好的抗肝纤维化作用,可能是通过抑制VEGF,TGF-β1等细胞因子的表达,同时上调肝组织中Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白的表达,以调节肝组织胶原纤维代谢,进而改善肝脏纤维化的程度。     

辽东木化学成分及其生物活性研究进展

辽东楤木为药食两用植物,具有多种化学成分及生物活性。文章就化学成分及生物活性两方面综述了辽东楤木的研究现状,为其进一步开发利用提供参考。     

栽培食用土当归根的化学成分研究

从栽培食用土当归根的乙醚部位分离得到8个化合物,经UV、IR、1H-NMR、13CNMR等鉴定为:栲利烯酸(kaur-16-en-19-oic acid)(Ⅰ)、十六烷酸(docosanoic)(Ⅱ)、二十二烷酸(hexadecanoic acid)(Ⅲ)、豆甾醇(stigmasterol)(Ⅳ)、16-甲酰基-15-烯-栲利烯酸(16-formyl-kaur-15-en-19-oic acid)(Ⅴ)、7-酮基海松酸(7-oxo-ent-pimara-8(14),15-dien-19-0ic acid)(Ⅵ)、17-羟基-15-烯-栲利烯酸(17-Hydroxy-ent-kaur-15-en-19-0ic acid)(Ⅶ)、β-谷甾醇(sitosterol)(Ⅷ),其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ均为首次从该属植物中分离得到.     

太白Chong木根皮中两个新的齐墩果酸皂甙

从新种太白Chong木（Aralia taibaiensis Z.Z.Wang et H.C.Zheng)根皮中分离得到两个新的齐墩果酸皂甙和一个已知化合物，齐墩果酸－28－O－β-D-吡喃葡萄糖甙（1），经理化性质和光谱数据分析，鉴定两个新化合物结构为：3－O－β-D－吡喃葡萄糖甙（2）和3－O－β－D吡喃葡萄糖醛酸癸酯－齐墩果酸－28－O－β－D－吡喃葡萄糖甙（3），分别命名为太白Chong木皂甙IV和太白Chong木皂甙V。     

辽东楤木不同部位中齐墩果酸的含量测定

用薄层扫描法测定了辽东楤木根皮,茎皮和叶3个部位中齐墩果酸含量,结果分别为5.59%,3.67%和1.05%。回收率99.56%。