Axonal and myelin lesions inβ-mannosidosis: Ultrastructural characteristics

Summary Ultrastructural changes in central nervous system (CNS) white matter of three goats affected with-mannosidosis were analyzed to further define characteristics and pathogenesis of axonal and myelin abnormalities. The variations in myelin association and contents of axonal spheroids were delineated. The occurrence of spheroids in a 96/150-day fetus documented the early development of these axonal lesions. In regions of severe myelin deficits, the presence of apparently normal axons and a reduction in the number of oligodendrocytes were confirmed. Many remaining cells in myelin-deficient regions were characterized by dark, vacuolated cytoplasm. The occurrence of internodes with myelin sheaths adjacent to internodes without myelin sheaths suggested that an axonal defect is not primarily responsible for the absence of myelin sheaths. A mild myelin deficit in the spinal cord was indicated by the presence of unmyelinated axons. Except for occasional mild cytoplasmic vacuolation, the spinal cord glial cells appeared relatively normal. The findings presented here are consistent with the hypothesis that an oligodendrocyte defect, expressed by regional differences, is a major factor in the pathogenesis of myelin deficiency in-mannosidosis.Supported by NIH grant NS-16886 to MZJ and BRSG funds from the College of Osteopathic Medicine, Michigan State University, to KLL     

Endogenous dopamine release from tuberoinfundibular neurons: Does calmodulin play any role?

Summary The possible involvement of calmodulin in the process of endogenous dopamine (DA) release from arcuateperiventricular nuclei-median eminence fragments, containing tuberoinfundibular dopaminergic (TIDA) neurons, has been investigated in an in vitro incubation system. For this purpose the basal and K⁺-stimulated DA release was examined in the presence and in the absence of the different putative calmodulin antagonists, pimozide, trifluoperazine, penfluridol and N-(6-aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalene-sulfonamide (W-7).Trifluoperazine and pimozide in concentrations up to 100 M were both uneffective in blocking K⁺-evoked DA release. Penfluridol in doses of 5 and 10 M, did not prevent 35 mM K⁺-induced endogenous DA release. It was able to reduce K⁺-stimulated DA release only at the very large concentration of 100 M.W-7 added in vitro to the hypothalamic fragments, prevented endogenous DA release evoked by 35 mM K⁺ in a dose-dependent manner. W-5, a chlorine deficient analogue of W-7, that interacts only weakly with calmodulin, failed to modify K⁺-stimulated endogenous DA release in doses up to 200 M.All the putative calmodulin antagonists used in the present study did not induce any change of basal DA release.IN conclusion the fact that most of the agents, except W-7, known to antagonize calmodulin-dependent processes in many biological systems failed to interfere with the release of endogenous DA from TIDA neurons seems to suggest that calmodulin does not play a crucial role in the process of DA release and that the inhibitory effect of W-7 on endogenous DA release may be better attributed to other mechanisms different from its anticalmodulin action.     

Rapid hydroxylation of methtryptoline (1-methyltetrahydro-β-carboline) in rat: Identification of metabolites by chiral gas chromatography-mass spectrometry

Summary Racemic methtryptoline (1-methyltetrahydro--carboline) and 5-hydroxymethtryptoline-9-carboxylic acid (6-hydroxy-1-methyltetrahydro--carboline-1-carboxylic acid) were administered intraperitoneally to rats and the components of their urine was subsequently investigated by chiral gas chromatography-mass spectrometry. Methtryptoline rapidly became hydroxylated in the 5- and 6-position and excreted in urine. There was about a ninefold predominance of the S(–) enantiomer over the other in the 5-hydroxylated species, while the 6-hydroxylation produced a small excess of the R(+) enantiomer. About 75% of the injected dose of methtryptoline was recovered in the urine as 5- and 6-hydroxylated compounds during the first 24 h period, demonstrating that hydroxylation represents the major metabolic pathway. Treatment with 6-hydroxymethtryptoline-9-carboxylic acid led to a fivefold increase in the urinary excretion of 5-hydroxymethtryptoline during the first 24 h period with a predominance of the S(–)-enantiomer, indicating a much smaller conversion rate than from methtryptoline. It was concluded that hydroxylation of methtryptoline is a likely pathway for the natural formation of 5-hydroxymethtryptoline.     

Huntington's disease: biochemical prediction by determination of GABA synthesis of cultured fibroblasts

Summary GABA synthesis in skin fibroblasts from patients with Huntington's chorea was compared with that in a control group by means of the highly specific ³H-muscimol radioreceptor assay. A significantly increased rate of GABA synthesis was found in the group with Huntington's chorea in an early cell passage. The possible use of this method for early diagnosis of Huntington's chorea is considered.

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Zusammenfassung Die GABA-Synthese in Hautifbroblasten von Chorea Huntington-Patienten im Vergleich zu einer gesunden Kontrollgruppe wurde mittels des hochspezifischen ³H-Muscimol-Radiorezeptoren-Assays untersucht. Wir fanden eine signifikante 8fache Erhöhung der GABA-Synthese bei Chorea Huntington in einer frühen Zellpassage. Es wird erwogen, diese Methode zur Frühdiagnostik von Chorea Huntington einzusetzen.

     

河北汉族人群D7S21位点DNA多态性研究

目的探讨D7S2 1位点在河北汉族人群分布的多态性 ,为DNA指纹数据库的构建及其法医学应用提供基础资料。方法应用MVR PCR方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对 12 4名河北汉族人群无关个体D7S2 1位点进行了快速检测 ,并进行数字编码。结果每一个体平均得到 3 6个数字编码 ,未发现任何两个无关个体所有编码相同 ,两无关个体 3 6个编码相同的机率为 3 .4 8× 10 -18。三种重复单位a 型、t 型和o 型出现的机率分别为 4 8.5 %、4 9.5 %和 2 .1%。该位点杂合度为 0 .9876,非父排除率为 0 .974 6,多态性信息含量为 0 .9872。结论D7S2 1位点在河北汉族人群中具有高度的多态性 ,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法简便、快速 ,具有一定的实用价值     

O-C2 角、O-EA 角及 Oc-Ax 角对枕颈融合术后吞咽困难的预测作用

目的探讨 O-C2 角、O-EA 角及 Oc-Ax 角对于枕颈融合术后患者发生吞咽困难的预测作用。方法以 2010 年 4 月—2019 年 5 月 114 例行枕颈融合术且符合选择标准的患者作为研究对象。其中男 54 例，女 60 例；年龄 14～76 岁，平均 50.6 岁。术后随访时间 13～122 个月，中位时间 60.5 个月。收集患者术前以及末次随访时颈椎侧位 X 线片，测量 O-C2 角、O-EA 角、Oc-Ax 角和 nPAS，并计算手术前后差值（dO-C2 角、dO-EA 角、dOc-Ax 角和 dnPAS）。根据术后是否出现吞咽困难，将患者分为吞咽困难组和无吞咽困难组。比较两组患者一般资料（年龄、性别、固定节段以及合并类风湿性关节炎、寰枢椎脱位及联合前路减压术患者比例）、影像学指标，分析 114 例患者 dO-C2 角、dO-EA 角、dOc-Ax 角与 dnPAS 相关性，比较 3 种影像学指标对枕颈融合术后吞咽困难发生的预测价值。结果术后 31 例发生吞咽困难，发生率为 27.2%。吞咽困难组和无吞咽困难组患者年龄、固定节段以及合并类风湿性关节炎、寰枢椎脱位及联合前路减压术患者比例比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；性别比较差异有统计学意义（χ²=7.940，P=0.005）。114 例患者术前与末次随访时 O-C2 角和 Oc-Ax 角比较，差异无统计学意义（P>0.05）；O-EA 角和 nPAS 比较，差异有统计学意义（P<0.05）。吞咽困难组和无吞咽困难组患者术前 O-EA 角、Oc-Ax 角、nPAS 比较差异均无统计学意义（P>0.05），O-C2 角比较差异有统计学意义（t=2.470，P=0.016）；末次随访时上述指标比较差异均有统计学意义（P<0.05）。两组患者 dO-EA 角、dOc-Ax 角、dO-C2 角、dnPAS 比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。相关性分析显示，dO-C2 角、dO-EA 角、dOc-Ax 角均与 dnPAS 成正相关（P<0.05）。dO-C2 角≤−5°、术后 O-EA 角≤100°、术后 Oc-Ax 角≤65° 时均存在术后吞咽困难发生风险（P<0.05），其中 dO-C2 角≤−5° 时发生风险最大（OR=14.4）。 结论dO-C2 角、术后 O-EA 角、术后 Oc-Ax 角均可作为枕颈融合术后吞咽困难的预测指标，其中 dO-C2 角预测价值最大。     

部分腓骨短肌腱联合双 intra-fix 挤压螺钉固定解剖重建距腓前韧带

目的探讨部分腓骨短肌腱联合双 intra-fix 挤压螺钉固定解剖重建距腓前韧带的疗效。方法回顾分析 2015 年 9 月—2019 年 10 月收治且符合选择标准的 46 例距腓前韧带断裂患者临床资料，均采用部分腓骨短肌腱联合双 intra-fix 挤压螺钉固定解剖重建距腓前韧带。男 22 例，女 24 例；年龄 16～52 岁，平均 28.1 岁。40 例存在踝关节扭伤史，1 例重物砸伤，5 例摔伤。左侧 17 例，右侧 29 例。病程 3 个月～10 年，中位病程 20.3 个月。记录患者手术前后踝关节疼痛视觉模拟评分（VAS）、美国矫形足踝协会（AOFAS）踝-后足评分、踝关节内翻角度、健患侧距骨前移差异（松弛、相似、紧张）；其中 23 例患者增加自评预后测量系统（PROMIS）评分，包括疼痛影响力（pain interference，PI）、物理功能（physical function，PF）评分。结果手术时间 39～179 min，平均 65.8 min。术后切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访，随访时间 12～30 个月，平均 23 个月。术后 6 个月及末次随访时 VAS 评分、AOFAS 踝-后足评分、PROMIS 的 PI 及 PF 评分、健患侧距骨前移差异、踝关节内翻角度均较术前明显改善，差异有统计学意义（P<0.05）；术后 6 个月与末次随访时 VAS 评分、PROMIS 的 PI 评分、AOFAS 踝-后足评分差异均无统计学意义（P>0.05），但 PROMIS 的 PF 评分、健患侧距骨前移差异、踝关节内翻角度差异有统计学意义（P<0.05）。 结论部分腓骨短肌腱联合双 intra-fix 挤压螺钉固定解剖重建距腓前韧带具有切口小、取腱便捷、移植物固定牢固等优点，术后患者恢复快，临床疗效满意。     

带血管骨移植术治疗股骨头坏死的研究进展

目的对带血管骨移植术治疗股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）的研究进展进行综述，以期为临床治疗 ONFH 提供参考。方法通过广泛检索国内外文献，对带血管骨移植术治疗 ONFH 的作用机制、术式及疗效、适应证及并发症进行总结归纳。结果带血管骨移植术是临床常用的保髋术式，通过带血管骨组织替代坏死骨组织，重建血循环系统，促进坏死区愈合，为 ONFH 骨坏死区域提供生物力学支撑，预防关节面塌陷。主要术式包括带蒂髂骨瓣移植、带蒂大转子骨瓣移植以及带血管腓骨移植，临床应用均获得一定疗效，且不同术式适用于不同类型患者，需根据患者全身状况、ONFH 发病诱因、坏死分期及程度等综合评估选择。结论带血管骨移植术治疗中青年 ONFH 疗效确切，能显著改善髋关节功能，极大程度控制疾病进一步发展，有效延缓甚至避免了人工髋关节置换，是一种值得推广的保髋术式。     

锌指蛋白 A20 对兔腰椎间盘退变影响的实验研究

目的探讨锌指蛋白 A20 对兔腰椎间盘退变的影响。方法取 3 月龄新西兰大白兔 26 只，体质量 2.0～2.5 kg，经腹细针穿刺法制备 L_3、4、L_4、5、L_5、6 椎间盘退变模型，其中 24 只术后 4 周 MRI 检查明确造模成功，随机分为 4 组（n=6），于目标椎间盘中分别注射锌指蛋白 A20 过表达腺病毒（过表达 A20 组）、空载体腺病毒（空载体组）、PBS 液（对照组）、锌指蛋白 A20干扰腺病毒（干扰 A20 组）。于注射前 1 d 及注射后 1、2、3、6 d 行生物反应综合评分；注射后 2、4、8 周，各组行 MRI 检查并测量 T2 弛豫时间（T2 信号值）后，取材行阿利辛蓝染色观察椎间盘髓核细胞退变情况，免疫组织化学染色检测锌指蛋白 A20 以及椎间盘退变相关指标（Ⅱ型胶原、蛋白聚糖）的表达，Western blot 检测锌指蛋白 A20、NF-κB 结合蛋白［P65、磷酸化 P65（phosphate P65，P-P65）、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖］、自噬相关蛋白［LC3 （LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）、P62］以及炎症因子（TNF-α、IL-1β）的表达。 结果各组注射后各时间点生物反应综合评分均明显低于注射前 1 d（P<0.05）；注射后 6 d 干扰 A20 组评分明显低于其他组（P<0.05），其他组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。MRI 检测提示，注射后 2、4、8 周过表达 A20 组 T2 信号值均最高（P<0.05），2、4 周时干扰 A20 组最低（P<0.05），其余组间差异均无统计学意义（P>0.05）。阿利辛蓝染色显示，注射后 4 周过表达 A20 组蛋白聚糖含量最高（P<0.05）、干扰 A20 组最低（P<0.05）；8 周时过表达 A20 组蛋白聚糖含量显著高于其他组（P<0.05），其他组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学染色示，锌指蛋白 A20、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达过表达 A20 组最高（P<0.05），干扰 A20 组上述蛋白表达最低（P<0.05）。Western blot 检测示锌指蛋白 A20、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、LC3 （LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）蛋白相对表达量过表达 A20 组最高、干扰 A20 组最低，而 P-P65、TNF-α、IL-1β、P62 蛋白相对表达量过表达 A20 组最低、干扰 A20 组最高，与其他组比较差异均有统计学意义（P<0.05）；各组 P65 蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P>0.05）。 结论锌指蛋白 A20 能通过抑制炎症反应，有效延缓兔腰椎间盘退变的进程。     

股骨远端去旋转截骨联合内侧髌股韧带重建术治疗复发性髌骨脱位的早期疗效

目的探讨股骨远端去旋转截骨（derotational distal femoral osteotomy，DDFO）联合内侧髌股韧带（medial patellofemoral ligament，MPFL）重建术治疗股骨前倾角（femoral anteversion angle，FAA）过大（≥30°）的复发性髌骨脱位的早期疗效。方法2017 年 6 月—2019 年 8 月，收治 17 例 FAA≥30° 的复发性髌骨脱位患者，均行 DDFO 联合 MPFL 重建术治疗。男 5 例，女 12 例，年龄 14～22 岁，平均 17.7 岁。髌骨脱位 2～8 次，平均 3.6 次。病程 2～7 年，平均 4.6 年。膝关节恐惧试验均为阳性。术前疼痛视觉模拟评分（VAS）以及 Lysholm 评分、Tegner 评分、Kujala 评分分别为（4.2±1.1）、（47.8±8.1）、（3.6±1.1）、（56.8±5.7）分，影像学测量 FAA、股骨远端外侧机械角（mechanical lateral distal femoral angle，mLDFA）、外侧髌骨移位值（lateral patella displacement，LPD）、胫骨结节-股骨滑车间距（tibial tuberosity-trochlear groove distance，TT-TG）分别为（34.9±3.4）°、（85.8±3.0）°、（13.7±3.8）mm、（23.1±2.1）mm。结果患者切口均Ⅰ期愈合，无膝关节僵硬、感染及髌骨再次脱位等并发症发生。患者均获随访，随访时间 13～25 个月，平均 17.7 个月。影像学复查显示，1 例截骨不愈合，经二次手术翻修加强固定后愈合；其余患者截骨均于术后 3～4 个月完全愈合。末次随访时，膝关节恐惧试验均为阴性；FAA、mLDFA、LPD 以及 TT-TG 分别为（15.6±2.7）°、（83.0±2.1）°、（5.0±2.6）mm、（20.5±2.5）mm，VAS 评分、Lysholm 评分、Tegner 评分以及 Kujala 评分分别为（2.4±1.4）、（93.4±7.8）、（6.8±1.5）、（89.0±8.0）分，上述指标与术前比较差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论DDFO 联合 MPFL 重建术治疗 FAA 过大（≥30°）的复发性髌骨脱位可获得良好早期疗效，膝关节疼痛明显减轻、功能明显改善。