局灶性脑缺血对细胞周期蛋白D1/CDK4基因表达的影响

目的观察脑缺血后细胞周期蛋白（cyclin）D1和它的酶CDK4基因表达，以及这种表达的改变是否影响神经细胞凋亡。方法成年雄性SD大鼠32只随机分为假手术组（n=4）和实验组（n=28），实验组再进一步分为7个亚组（再灌注2h，6h，12h，1d，3d，7d和14d，每组n=4）。应用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉阻塞／再灌注模型．TUNEL法检测神经细胞凋亡。原位杂交检测cyclinD1和CDK4mRNA的表达。结果CyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达与凋亡细胞的区域基本相同。再灌注2h脑组织即开始出现神经细胞凋亡，并于1d分别在皮层区和纹状体区达高峰（分别为72．80±4．66和87．75±0．85）。神经细胞cyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达分别于再灌注2h和6h开始逐渐增强，并于12h和1d达高峰（皮质区分别为94．50±2．75和85．75±3．73，纹状体区分别为88．25±5．06和89．80±2．93）。结论CyclinD1和CDK4选择性地在形态学完整或已经有改变的缺血侧神经元和少突胶质细胞内表达。CyclinD1／CD1（4mRNA表达可能是诱导细胞凋亡的重要因素之一。     

Ethanol-Induced Enhancement of Cocaine Bioactivation and Irreversible Protein Binding: Evidence Against a Role of Cytochrome P-450IIE1

Chronic ethanol consumption potentiates cocaine-induced liver injury in rodents. Since cocaine has to be bioactivated by a cytochrome P-450-dependent N-oxidative pathway to exert its hepatotoxic effects, we studied the role of the ethanol-inducible P-450IIE1 for cocaine metabolism. Male Sprague-Dawley rats were pretreated with either a liquid diet containing ethanol (30% of calories) for 4 weeks or injected with pyrazole (200 mg/kg/day, ip, for 3 days). Both agents induced microsomal p-nitrophenol hydroxylation which is a probe for the catalytic activity of P-450IIE1. However, only ethanol, but not pyrazole, increased both microsomal cocaine N-demethylase activity (by 47%) and the extent of irreversible binding of [3H]-cocaine to microsomal proteins (by 100%), which was taken as a quantitative endpoint for the formation of a reactive metabolite. Cocaine N-demethylation and irreversible protein binding of cocaine were not inhibited by P-450IIE1 isozyme-selective substrates, nor was the rate of cocaine metabolism and binding decreased by functionally active polyclonal anti-rat P-450IIE1 antibodies. Furthermore, pyrazole pretreatment sensitized cultured hepatocytes to the glutathione-dependent cytotoxic effects of nontoxic concentrations of cocaine. These results indicate that (a) cocaine is not a major substrate for the ethanol-inducible P-450IIE1, (b) the enhancing effects of ethanol on cocaine bioactivation may be due to induction of other P-450 isoforms, and (c) induction of P-450IIE1 may potentiate cocaine-induced hepatocellular toxicity in vitro independently of cocaine metabolism, e.g., by P-450IIE1-dependent oxidative stress.     

131I对甲状腺细胞凋亡的影响

由于每个患者特异性基因决定的个体辐射敏感性不同,使得每个接受131I治疗的患者对治疗的反应不一,因而疗效差异较大.针对不同的个体,采用不同的剂量治疗才可以提高131I治疗的效率,降低甲状腺功能减退症的发病率.通过目前的分子生物学技术,我们已经了解到一些基因的蛋白表达产物(Fas/FasL、Bcl-2等)与细胞凋亡和射线诱导凋亡的联系,使对凋亡基因表达产物的体外监测成为可能.也许通过对这些指标的监测,可以使我们在131I治疗过程中实现对不同的个体给予恰当的个体剂量.     

人T淋巴母细胞（Jurkat）移动性的研究

利用人Ｔ淋巴母细胞（Ｊｕｒｋａｔ）细胞系作为研究对象。企图探探索细胞外基质成份及肌醇磷脂细胞信息传递系统与细胞移动的关系。研究结果表明：当细胞被伏波醇酯（ＰＭＡ）处理过后，其粘连性与移动件对纤维连结蛋白（ＦＮ）底物的反应在已是高水平的基础上有更进一步提高的作用。与ＦＮ刊相反的是，未经ＰＭＡ处理处的Ｊｕｒｋａｔ细胞对层粘连蛋白（Ｌｍ）底物却无明显的粘连性及移动性增加的反应，尽管在ＰＭＡ处理过４小时内亦无任何的增强。但是，当ＰＭＡ作用于细胞２４一４８小时后则明显池增加其Ｌｍ底物的粘连性及移动性反应，表明了其明显的协同作用。分别用抗ＦＮ、抗Ｌｍ及蛋白激酶Ｃ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｒｉｎｅ（ＳＰ）时均起到特异性的抑制作用。可见，协同作用的产生是通过蛋白激酶Ｃ激活后的－段时间内，使细胞表面Ｌｍ受体密度增加而对底物Ｌｍ反应增强所致。     

肾康宁对肾小球肾炎治疗作用的实验及临床研究

目的:观察中药肾康宁对家兔实验性肾炎黏附分子及细胞因子表达的影响,以及临床肾小球肾炎治疗前后尿蛋白的变化.方法:检测牛血清白蛋白所致急性实验性肾炎动物肾组织ICAM-1表达、血清IL-6水平的变化,以及临床肾小球肾炎肾康宁治疗前后血清IL-6水平、尿蛋白的变化.结果:肾康宁能明显降低实验动物血清IL-6含量,降低急性实验性肾炎模型中ICAM-1阳性细胞表达率,同时减轻肾小球基底膜(GBM)增厚及炎症细胞浸润,阻止毛细血管内微血栓的形成;在临床肾小球肾炎中,肾康宁能减少肾小球肾炎患者血清IL-6水平及24 h尿蛋白含量.结论:肾康宁通过降低细胞因子IL-6水平和黏附分子ICAM-1的表达,从而抑制免疫细胞的趋化、浸润、活化和增殖、减少免疫复合物的沉积,使肾小球炎症反应减轻,有效缓解家兔急性实验性和临床肾小球肾炎,使肾功能得以改善.     

胶质瘤中LGI 1的突变及微卫星不稳定性研究

目的 为了检测人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞系LGI 1基因编码区中有无碱基突变及微卫星不稳定性(MSI)和杂合性缺失(LOH).方法 收集30例胶质瘤标本,2例脑膜瘤、2例瘤旁及2例颅脑损伤内减压脑组织标本及体外培养5个脑胶质瘤细胞系.提取组织标本及培养细胞基因组DNA.设计特异性引物分别扩增LGI 1各外显子序列,采用SSCP银染分析;扩增LGI 1微卫星序列,凝胶电泳银染分析;发现异常泳动条带进行DNA序列分析.结果 ①PCR-SSCP分析琼脂糖凝胶电泳检测有1例Ⅱ级胶质瘤标本未检测到第1 a外显子处扩增产物以及Ⅱ、Ⅲ级各1例胶质瘤标本均未检测到第8 c外显子处扩增产物.未在30例胶质瘤标本和4个脑胶质瘤细胞系中检测到电泳条带异常,在细胞系TJ905第5外显子处检测到电泳条带异常,经DNA测序分析证实确有突变.②在30例胶质瘤标本及5个细胞系中均未检测到MSI和LOH.结论 基因突变及MSI和LOH可能不是LGI 1在胶质瘤恶性进展过程中失活的主要原因.     

Apaf-1与MODS时的细胞凋亡

细胞凋亡是一种以凋亡小体的形成为特点的,不引起周围组织的炎性反应的活体内单个细胞死亡的形态学改变,它是依赖能量的细胞内死亡程序活化而致的细胞自杀.已知细胞凋亡的途径有3条途径:死亡受体途径、线粒体途径、内质网途径.线粒体在凋亡信号传导通路中起重要作用,研究提示死亡受体和内质网通路的信号最终都汇集在线粒体通路中.线粒体介导的细胞内凋亡通路的信号传导级联反应均以Apaf-1为靶子而调节凋亡体.     

慢性神经病理性痛大鼠背根神经节P2Y2受体mRNA的表达

目的评价背根神经节（DRG）P2Y2受体mRNA的表达在大鼠慢性神经病理性痛中的作用。方法SPF级大鼠24只,体重150～200g,雌雄不拘,随机分为2组：假手术组（S组）和慢性神经痛组（N组）,每组12只。N组结扎左侧坐骨神经建立大鼠慢性压迫性损伤（CCI）模型,S组只暴露,不结扎左侧坐骨神经。2组分别于CCI前1d、CCI后1、4、7、10、14 d进行行为学观察,测定大鼠双后肢热痛阈和机械痛阈,并分别于CCI后7、14 d各取6只大鼠断颈处死,取双侧L（4-6）背根神经节,RT-PCR法测定P2Y2受体mRNA的表达。结果两组CCI后4 d热痛阈、机械痛阈明显降低（P〈0.05）,持续至CCI后14 d;N组左侧DRG P2Y2受体mRNA表达较右侧明显下调,CCI后14 d较CCI后7 d下调（P〈0.05）;与S组右侧比较,N组DRG P2Y2受体mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论背根神经节P2Y2受体mRNA的表达下调参与了大鼠慢性神经病理性痛的形成。     

Lithium and 5-HT1A receptor sensitivity: a neuroendocrine study in healthy volunteers

The effect of lithium administration (800 mg daily for 7 days) on the neuroendocrine and temperature responses to the 5-HT_1A receptor agonist, gepirone, was studied in eight healthy male volunteers. Gepirone (20 mg orally) significantly increased plasma levels of prolactin, growth hormone, corticotropin and cortisol, and lowered oral temperature. None of these responses was significantly altered by lithium treatment. The results suggest that the ability of short-term lithium treatment to increase 5-HT-mediated neuroendocrine responses in humans is unlikely to be related to changes in the sensitivity of pre- or post-synaptic 5-HT_1A receptors.     

小儿糜烂性口腔炎病毒病因及干扰素对病毒的抑制作用

本文研究了小儿糜烂性口腔炎的病毒病因,用人胚肾细胞及Hep—2细胞分离病毒,26例患儿有21例阳性(80.7％),从中取五株病毒进行鉴定,细胞病变特点属疱疹病毒,且均可被抗HSV—I抗体中和,结果表明HSV—I是本病的主要病原。体外实验证明,白细胞干扰素对新分离的HSV—I有较强的抑制病变作用,2.4～2.9Iu/ml白细胞干扰素即可抑制病毒的50％CPE。临床上试用干扰素局部治疗必获得显著的疗效。