骨碎补提取物对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化Cbfα-1表达的影响及意义

目的：体外实验研究中药骨碎补对大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化及对Cbfα-1表达的影响。方法采用中药干预培养细胞的方法,利用骨碎补单味药物与培养基联合培养大鼠骨髓间充质干细胞（ BMSCs ）,通过Ⅰ型胶原免疫组化染色检测其促BMSCs成骨分化能力,通过RT-PCR方法进行半定量分析Cbfα-1的表达,探讨中药骨碎补促成骨能力的机制。结果骨碎补药物各组Ⅰ型胶原免疫组化染色检测BMSCs成骨分化能力及RT-PCR检测Cbfα-1的表达均明显优于空白组及条件培养组（P＜0.01）,0.002 g/ml药物组优于0.02 g/ml及0.0002 g/ml药物组（P＜0.05）。结论中药骨碎补可促进BMSCs增殖及成骨分化,使Cbfα1的表达加强。     

离子导入骨碎补总黄酮对骨质疏松症患者腰椎骨密度影响临床研究

目的：离子导入骨碎补总黄酮对骨质疏松症患者腰椎骨密度及临床评价标准的影响。方法选取2011年3月-2012年3月来我院进行治疗并确诊的120例骨质疏松症患者,随机将其分为治疗组与对照组两组,每组60人,治疗组选择离子导入骨碎补总黄酮进行治疗,对照组选用口服药物治疗。应用疼痛视觉模拟评分法及腰椎骨密度检测法对骨质疏松症患者进行评价,在治疗3个月之后收集并分析骨质疏松症患者各组疼痛视觉模拟评分及腰椎骨密度及其变化,对比并进行临床分析。结果在经过3月的治疗后,离子导入骨碎补总黄酮患者的总有效率达到93.1％,对照组患者的有效率为61.3％,两组对比治疗效果差异有统计学意义。结论离子导入骨碎补总黄酮治疗骨质疏松症对于缓解骨质疏松症患者腰腿疼痛及提高腰椎骨密度有明显的疗效,因此应在临床实践中加以运用并推广,促进骨质疏松症患者的早日康复。     

伤湿丸质量标准的研究

目的建立伤湿丸的的定性定量方法,更好地控制产品的质量。方法用薄层色谱法对处方中黄毛耳草进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定骨碎补中柚皮苷的含量,以乙腈∶水（20∶80）为流动相,在283nm波长处检测。结果定性鉴别分离度好,专属性强。含量测定柚皮苷在2.02μg～101μg进样范围内具有良好的线性关系,相关系数r=1.000。平均加样回收率为97.0%,RSD为2.1%（n=6）。结论本方法简便、准确,重复性好,可用于伤湿丸的质量控制。     

骨碎补总黄酮对骨质疏松症患者牙槽骨的影响

目的: 研究骨碎补总黄酮对合并牙列缺损或缺失的骨质疏松症患者牙槽骨高度、厚度、骨密度及牙槽嵴顶宽度的影响。方法: 将符合纳入标准的46例患者随机分为实验组和对照组,每组23例,实验组服用强骨胶囊,对照组服用阿仑膦酸钠片;于药物治疗前及治疗后1、3、6个月时分别行锥形束CT（CBCT）检查,应用Anatomage invivo 5软件测量并观察牙槽骨高度、厚度、骨密度及牙槽嵴顶宽度的变化,采用SPSS17.0软件包进行统计学分析。结果: 对照组牙槽骨颊(唇)侧皮质骨的骨密度在药物治疗后1个月时较实验组显著升高（P<0.05）,实验组牙槽骨的颊（唇）侧皮质骨骨密度在药物治疗后3个月和6个月时均较对照组显著升高（P<0.05）。对照组牙槽嵴顶宽度和牙槽骨的颊（唇）侧皮质骨厚度在药物治疗后3个月较实验组显著升高（P<0.05）,在药物治疗后6个月时,2组间差异无统计学意义（P>0.05）。不同时点实验组和对照组在基骨的颊（唇）侧皮质骨、松质骨、腭（舌）侧皮质骨的厚度变化均无显著差异（P>0.05）。结论: 骨碎补总黄酮能显著增加骨质疏松症患者牙槽骨骨密度,在增加牙槽骨的颊（唇）侧皮质骨的骨密度上较阿仑膦酸钠存在优势;骨碎补总黄酮能增加骨质疏松症患者牙槽骨的颊（唇）侧皮质骨厚度,对牙槽嵴顶宽度、牙槽骨高度影响不大。     

牵张应力下骨碎补总黄酮对成骨细胞增殖及相关蛋白含量的影响

目的:观察骨碎补总黄酮对牵张应力下成骨细胞增殖及相关蛋白含量的影响。方法:对大鼠成骨样细胞系ROS1728作体外培养,取3代对数生长期成骨细胞,采用Flexcell细胞牵张系统构建成骨细胞牵张体系,使用骨碎补总黄酮含药血清进行干预24 h。应用MTT法绘制成骨细胞生长曲线;碱性磷酸酶染色法观察成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量及分布情况;采用碱性磷酸酶定量检测方法测定各组成骨细胞内ALP含量;采用ELISA法测定骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGFβ-1)的表达。结果:12 h及24 h骨碎补总黄酮各剂量组中成骨细胞数量及ALP、BMP-2、TGFβ-1含量均明显增加,与空白组比较,差异均有统计学意义(P0.05);同时,与骨碎补总黄酮低剂量组比较,骨碎补总黄酮中、高剂量组成骨细胞数目及ALP和BMP-2的含量增高,差异均有统计学意义(P0.05);骨碎补总黄酮各剂量组中TGFβ-1的含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:在牵张应力下,骨碎补总黄酮可明显促进成骨细胞增殖及相关蛋白的合成。     

骨碎补对膝骨性关节炎模型兔滑膜细胞凋亡机制的实验研究

目的:观察骨碎补对兔膝骨性关节炎滑膜细胞凋亡Fas、Fasl蛋白因子的影响。方法:将24只新西兰兔随机分为正常组、模型组、骨碎补治疗组、维固力(硫酸氨基葡萄糖)对照组,每组6只实验动物。采用左后肢伸直位管型石膏固定的方法造成膝骨性关节炎的动物模型,固定时间为6周。造模成功后,治疗组按1.5 g/(kg·d)剂量灌胃给予骨碎补,对照组按70 mg/(kg·d)剂量灌胃给予硫酸氨基葡萄糖,模型组和正常组按同等剂量胃饲给予生理盐水。治疗4周后,观察滑膜细胞形态学改变、滑膜细胞凋亡情况及Fas、Fasl蛋白表达水平。结果:骨碎补治疗组、硫酸氨基葡萄糖对照组TUNEL阳性标记的滑膜细胞数均较多,高于正常组(P0.01),却显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.01)骨碎补治疗组、硫酸氨基葡萄糖对照组均可以下调兔膝OA模型Fas、Fas L的表达,其蛋白表达水平明显高于正常组(P0.01),低于模型组(P0.01)。两组组间比较,差异有显著性,说明骨碎补下调Fas、Fas L的蛋白表达水平强于硫酸氨基葡萄糖。结论:骨碎补能抑制骨性关节炎滑膜细胞的过度凋亡且效用优于硫酸氨基葡萄糖。     

壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷对IL-1β诱导兔退变软骨细胞“caveolin-p38MAPK”信号通路的影响

目的观察壮骨健膝方含药血清中药物成分骨碎补柚皮苷(简称柚皮苷)对IL-1β诱导退变软骨细胞中"caveolin-p38MAPK"通路相关信号因子小窝蛋白-1(caveolin-1)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化核转录因子-2(p-ATF-2)、IL-1β及TNF-α等的影响,进一步探讨该方保护关节软骨的机制。方法 (1)通过高效液相-飞行时间质谱联用(HPLC-TOF/MS)技术分析并获得壮骨健膝方含药血清中的原组方药物成分柚皮苷;(2)取4周龄新西兰兔双侧膝关节软骨,建立兔关节软骨细胞体外培养体系,取第二代软骨细胞用于后续实验。MTT法检测柚皮苷对软骨细胞增殖的影响;免疫组化方法检测柚皮苷对IL-1β诱导后的软骨细胞中Ⅱ型胶原表达的影响;Western blot法检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、pp38与p-ATF-2蛋白表达的影响;RT-PCR检测柚皮苷对IL-1β诱导后软骨细胞中IL-1β及TNF-αmRNA表达的影响。结果 (1)柚皮苷标准品溶液及壮骨健膝方含药血清离子流图中柚皮苷的出峰时间均为23.5 min,分子量均在581.0~581.5 m/z之间;(2)柚皮苷能促进软骨细胞的增殖,抑制IL-1β对软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响;(3)与模型组比较,柚皮苷能降低IL-1β诱导后软骨细胞中caveolin-1、p-p38、p-ATF-2等蛋白及IL-1β、TNF-αmRNA的表达(P<0.05),并接近正常组水平。结论壮骨健膝方含药血清中原组方药物成分柚皮苷不仅能够促进软骨细胞的增殖,还可保护软骨细胞的功能,其机制可能与柚皮苷降低诱导退变软骨细胞中caveolin-1、p-p38与p-ATF-2的表达,抑制"caveolin-p38MAPK"通路的活动,进而减少通路下游IL-1β及TNF-αmRNA表达有关。     

骨碎补辅助治疗老年骨质疏松症疗效及对骨代谢影响的观察

目的：观察骨碎补辅助治疗老年原发性低转换型骨质疏松症的疗效及对骨代谢的影响。方法：选择老年原发性低转换型骨质疏松症58例,随机分为观察组30例和对照组28例。对照组给予钙尔奇D600mg,每天1粒;观察组在对照组治疗的基础上,给予单味骨碎补15g泡人500ml水中代茶饮。两组疗程均为6个月。比较两组治疗前后骨钙素（BGP）及I型胶原羧基端肽（ICTP）水平变化、中医症候积分改善情况及总疗效。结果：治疗后,两组BGP水平均非常显著升高（P〈0．01）,观察组BGP水平显著高于对照组（P〈0．05）;观察组ICTP水平显著低于治疗前（P〈0．05）,且显著低于对照组（P〈0．05）;对照组ICTP水平治疗前后差异不显著（P〉0．05）。观察组总有效率显著高于对照组（P〈0．05）。结论：骨碎补辅助治疗老年低转换型骨质疏松症疗效较好,对骨的生成和吸收有调节作用。     

骨碎补外用对实验性豚鼠白癜风的影响*

[目的]探讨骨碎补外用对实验性白癜风豚鼠模型的治疗作用,为中国药典增补其"外用消风祛斑"的功能提供药效学参考依据。[方法]采用过氧化氢化学脱色法制备实验性白癜风豚鼠模型,观察受试药物对豚鼠皮肤黑色素形成及血液中酪氨酸酶(TYR)、胆碱酯酶(CHE)和单胺氧化酶(MAO)的影响。[结果]骨碎补外用能够使实验性白癜风模型有良好的治疗作用,与模型组相比,皮肤黑色素分布含量增加,血液中TYR活力增加、CHE活力增加、MAO活力降低。[结论]骨碎补外用对白癜风豚鼠模型有治疗作用。     

骨碎补外用功能主治研究进展

本文以中医基础理论为指导,系统总结整理历代本草文献有关骨碎补外用功能主治的记载,全面综述与骨碎补外用功能主治相关的化学成分、药理作用、临床应用研究进展。为《中国药典》修订骨碎补外用功能主治标准提供详实的文献依据,为开展骨碎补中医外治研究提供参考。