香兰素衍生物BVAN08对人脑胶质瘤细胞的放射增敏作用及机制研究

目的 研究香兰素衍生物6-溴异香兰素(BVAN08)对人脑胶质瘤细胞的增殖影响、放射增敏作用和相关机制,为开发新的放射增敏抗癌药物提供实验依据。方法 采用MTT法、克隆形成率法检测BVAN08对U-251细胞增殖活性和⁶⁰Coγ射线敏感性的影响(照射剂量率为2.3 Gy/min);光学显微镜观察BVAN08作用后细胞形态学变化;透射电镜检测细胞自吞噬死亡;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Western blot检测DNA修复蛋白DNA-PKcs的表达变化。结果 6-溴异香兰素BVAN08对U-251细胞增殖有显著抑制作用(t=1.83～3.07,P＜0.05),在10～100 μmol/L浓度范围内呈剂量和作用时间依赖性,药物作用48和72 h的IC50分别为55.3 和52.7 μmol/L。60 μmol/L BVAN08作用4 h后,U-251细胞产生明显的G₂/M期阻滞, 12 h达到峰值,G₂/M阻滞达到63.3 %,并开始同时出现细胞凋亡和自吞噬死亡。BVAN08对U-251细胞有明显的放射增敏作用,而且在照射前12 h给药的增敏效果最好,20 μmol/L浓度对2 Gy照射杀伤U-251细胞的增强比为3.14。Western blot检测表明BVAN08能显著抑制DNA-PKcs的表达。结论 香兰素衍生物BVAN08具有明显抑制人脑胶质瘤U-251细胞增殖和辐射增敏作用、并同时诱发凋亡和自吞噬死亡。BVAN08对U-251细胞的辐射增敏作用可能与G₂/M期阻滞和DNA双链断裂修复关键蛋白DNA-PKcs表达的抑制敏感性有关。     

高效液相色谱法同时测定食品中的甲基香兰素和乙基香兰素

香兰素包括甲基香兰素（vanillin）和乙基香兰素（ethylvanillin），是食品中重要的香味添加剂，在糖果、糕点、饮料等食品中广泛使用。但是，大剂量使用香兰素对人体健康有害。1994年联合国粮农组织与世界卫生组织（FAO／WHO）规定甲基香兰素每日每公斤体重允许摄入量（ADI）为0～10mg／kg，1995年规定乙基香兰素的ADI为0—3mg／kg。在2000年欧盟专家委员会称，经多年的实验研究发现，大剂量使用香兰素可以导致头晕、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至能够损伤肝、肾，对人体有较大危害，决定重新制定香兰素使用标准，进一步降低允许剂量。     

乳制品中香兰素和乙基香兰素的溶剂萃取—气相色谱分析法

目的 建立溶剂萃取-气相色谱法分析乳制品中香兰素和乙基香兰素的检测方法.方法 研究改进乳制品中香兰素和乙基香兰素的溶剂萃取操作方法和气相色谱法分析条件及检测方法.结果 香兰素和乙基香兰素检测结果的线性关系良好,线性方程分别为:Y=8.494 81e-1×X-3.268 92,r =0.998 6和y=9.947 50 e-1xX-2.65543,r =0.999 3;检测限低,香兰素和乙基香兰素的的检出限分别为2.24和3.13 mg/kg;重现性好,相对标准偏差在0.43％～8.13％之间;加标回收率在82％ ～ 93％之间.结论 溶剂萃取-气相色谱法分析乳制品中香兰素和乙基香兰素具有准确性好、精密度高等优点,用该方法分析了18批次乳制品中的香兰素和乙基香兰素,得到了满意的结果.