卵巢癌细胞外泌体抑制外周单个核细胞源性树突状细胞成熟的机制研究

目的 探究卵巢癌细胞源性外泌体对人外周血树突状细胞(DCs)成熟的影响。方法 从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠从中分选出CD14⁺的细胞;采用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素-4(rhIL-4)联合刺激的办法诱导CD14⁺/PBMC分化为未成熟树突状细胞(iDCs),光镜确认细胞形态;超速离心提取卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体(A2780cis-外泌体),蛋白质印迹法检测其特征性蛋白标志物,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测外泌体粒径分布;iDCs与A2780cis-外泌体共培养后给予重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导,流式细胞术检测CD83⁺/HLA-DR⁺/CD1a⁺细胞比例变化。结果 超速离心提取的卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体,TEM下可检测到直径约为60 nm的“杯盏状”外泌体颗粒。蛋白质印迹法结果显示A2780cis细胞各蛋白表达均为1,A2780cis-外泌体中CD9、CD8...     

ATP7A蛋白在晚期食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨ATP7A在晚期食管鳞癌(ESCC)组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化方法检测49例未行手术或放疗、仅以顺铂为主一线化疗的晚期食管鳞癌组织中ATP7A的表达,并分析ATP7A表达与晚期食管鳞癌临床病理特征及预后的关系。结果 49例晚期食管鳞癌组织中,44.90%(22/49)的晚期食管鳞癌细胞质内可见ATP7A阳性免疫反应,而癌旁基质中未见ATP7A阳性免疫反应。ATP7A表达与组织学分级、顺铂化疗疗效有关(χ²=4.135,P=0.021;χ²=3.958;P=0.028)。Kaplan-Meier分析显示,ATP7A阳性晚期食管鳞癌患者总生存(OS)率低于ATP7A阴性患者(P=0.037)。Cox回归模型分析显示,组织学分级和ATP7A是晚期食管鳞癌患者接受顺铂化疗后OS的独立影响因素(P=0.039,P=0.043)。结论 ATP7A的表达水平是影响晚期食管鳞癌组织学分级、顺铂化疗疗效及预后的重要因素,提示ATP7A可能参与了食管鳞癌的发生、发展,可能是顺铂化疗的耐药标志物和铂类化疗患者生存的预后因素。     

MiR-885对结直肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响

摘 要：［目的］ 探究miR-885对结直肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响。［方法］利用qRT-PCR 验证在耐药和敏感结直肠癌蜡块组织中miR-885的相对表达量;运用质粒转染方法沉默结直肠癌细胞系HCT116中miR-885基因,按照miR-885表达水平分为2组：miR-NC和miR-885 inhibitor组,并且利用qRT-PCR验证转染效率。将细胞分成4组,分别是阴性对照组(NC)、阴性对照加奥沙利铂组（L-OHP）、miR-NC加奥沙利铂组（L-OHP/miR-NC）和miR-885 inhibitor加奥沙利铂组（L-OHP/miR-885 inhibitor）。利用CCK-8法检测HCT116细胞活性;Transwell检测HCT116细胞的侵袭能力;流式细胞术检测HCT116细胞的细胞周期。［结果］ 相比于癌旁正常组织（1.31±0.36）,耐药组织（2.75±0.82）中miR-885的表达量增加,而敏感组织（0.31±0.14）中miR-885的表达量降低。在miR-885组中miR-885表达水平（0.02±0.01）相对于miR-NC组（0.80±0.19）呈显著降低(P<0.05）。与L-OHP/miR-NC组（0.77±0.14）相比,L-OHP/miR-885 inhibitor组（0.48±0.23）细胞活性降低（P<0.05）。与L-OHP/miR-NC组（169±25）相比,L-OHP/miR-885 inhibitor组（28±9）细胞的侵袭数量减少（P<0.05）。与NC组G0/G1期（42.27±3.33）相比,L-OHP组（3.33±0.41）细胞比例降低（P<0.001）,与NC组S期（32.19±2.29）相比,L-OHP组（53.29±3.04）细胞比例增多(P<0.05),与NC组（16.32±2.29）G2/M期相比,L-OHP组（4.83±0.76）细胞比例减少(P<0.05)。同时,与L-OHP/miR-NC组（5.07±0.31）G0/G1期相比,L-OHP/miR-885 inhibitor组（45.59±1.95）细胞比例增加（P<0.001）,与L-OHP/miR-NC组（42.71±2.58）S期相比,L-OHP/miR-885 inhibitor组（12.72±1.60）细胞比例降低（P<0.001）,与L-OHP/miR-NC组(18.19±1.30)G2/M期相比,L-OHP/miR-885 inhibitor组（2.55±0.51）细胞比例减少（P<0.01）。［结论］ 沉默miR-885能够增强结直肠癌细胞HCT116对奥沙利铂化疗敏感性,miR-885可能成为结直肠癌治疗的新靶点。     

PARP抑制剂用于铂敏感复发卵巢癌患者维持治疗的血液学毒性概述

卵巢癌是威胁女性健康和生命的重大疾病之一。近年来,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂[poly (ADP-ribose)polymerase inhibitors,PARPi]作为一类新型的靶向治疗药物为卵巢癌患者带来获益,并被国内外多项临床指南、规范推荐用于铂敏感复发卵巢癌患者的维持治疗及术后的维持治疗。但与此同时带来的安全性问题,尤其是血液学毒性值得关注。从作用机制、药代动力学出发,对比目前已上市的3种PARPi的特征及其血液学毒性差异,以期为复发性卵巢癌患者临床用药提供参考。     

非小细胞肺癌顺铂耐药相关基因生物信息学研究

目的：通过分析非小细胞肺癌顺铂敏感株及耐药株的基因芯片表达数据,筛选差异基因及关键通路,构建蛋白相互作用网络,探讨关键集群功能。方法:从GEO数据库获得基因芯片表达数据,利用GEO2R工具筛选差异基因,通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络,经DAVID富集得到相关特征基因与信号通路信息。结果：通过芯片分析共获得481个差异表达基因,相比于敏感细胞株,顺铂获得性耐药细胞株中有418个上调基因和63个下调基因。差异基因功能主要富集在piRNA代谢、DNA甲基化修饰、细胞有丝分裂及细胞周期进程等信号通路。蛋白复合物预测得到主要功能集群6个,分别与细胞趋化性、细胞角化性、piRNA代谢过程、细胞因子受体相互作用、细胞因子分泌调节及染色质沉默相关生物进程相关。结论:本研究利用生物信息学方法,发现顺铂耐药细胞株特征基因及信号通路,其中SAA1、KRT5、TDRD9、BCL2A1、CSF1R和HIST1H1A等显著上调基因及其功能集团可能是非小细胞肺癌顺铂耐药的潜在分子机制,为临床精准治疗提供新的理论依据。     

阿帕替尼通过抑制HMGA2增强顺铂对胃癌的抗瘤作用

目的：探讨阿帕替尼（apatinib,APA）联合顺铂（cisplatin,DDP）对胃癌（gastric carcinoma,GC）细胞增殖、侵袭和迁移 能力的影响及其分子机制。方法：收集2016年1月到2019年6月武威市人民医院手术切除的50例GC患者的癌及癌旁组织标 本,以及GC细胞系MGC803和SGC7901, 用qPCR检测组织中HMGA2和细胞中增殖、迁移及侵袭相关mRNA的表达水平。采 用脂质体转染技术, 将pcHMGA2转染MGC803和SGC7901细胞,经分别用不同浓度的DDP和APA处理,分为NC、pcHMGA2、 pcHMGA2+DDP及pcHMGA2+DDP+APA组, 用Western blotting检测GC细胞中HMGA2蛋白的表达水平,MTT、Transwell小室 法分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果：HMGA2 mRNA在GC组织中表达水平高于癌旁组织（P<0.05）,且高表达组 GC患者的生存率显著降低（P<0.01）。DDP 显著抑制 MGC803 和 SGC7901 细胞的增殖、侵袭和迁移能力（均P<0.01）; DDP+APA组MGC803和SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于DDP组（均P<0.01）;APA显著增强DDP对GC细胞 HMGA2表达的抑制作用（均P<0.01）;APA通过下调HMGA2表达增强DDP对GC的抗肿瘤性。结论：APA能促进DDP对GC的 抗瘤作用,其分子机制可能是增强DDP对HMGA2表达的抑制作用有关。     

多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案与多西他赛联合氟尿嘧啶、洛铂方案治疗胃癌的疗效比较

目的:比较多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案与多西他赛联合氟尿嘧啶、洛铂方案治疗晚期不可手术胃癌患者的疗效和不良反应。方法:回顾性分析2015年2月至2018年6月126例晚期不可手术的胃癌患者。洛铂组55例:多西他赛+氟尿嘧啶+洛铂,顺铂组71例:多西他赛+氟尿嘧啶+顺铂。洛铂组和顺铂组均21天为一个疗程,连续治疗四个疗程。结果:洛铂组患者客观有效率为50.91%,顺铂组为35.21%,差异无统计学意义（P＞0.05）。洛铂组患者疾病控制率达到83.64%,顺铂组为67.61%,差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者在恶心、呕吐、白细胞减少和四肢麻木方面发生率明显低于顺铂组,差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者血小板减少发生率高于顺铂组,差异有统计学意义（P＜0.05）。洛铂组患者严重不良反应的发生率为21.82%,顺铂组为39.44%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:将多西他赛联合氟尿嘧啶、顺铂方案中的顺铂以洛铂替代,取得了更好的疾病控制率,而患者的不良反应更轻,严重不良反应的发生率也更低,值得临床进一步研究。     

红参发酵产物联合长春瑞滨及顺铂化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌患者的疗效

目的探讨红参发酵产物联合长春瑞滨及顺铂化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌患者的疗效。方法将104例晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组及对照组,每组52例。对照组患者给予单纯长春瑞滨^+顺铂化疗方案,治疗组患者在对照组基础上联合应用红参发酵产物。分别在治疗前后采用疲劳症状量表(FSI)、肺癌治疗功能评价量表(FACT-L)评价两组患者疲劳症状及生活质量,并比较治疗前后两组患者血清肿瘤标志物水平、免疫功能指标水平、药物不良反应及生存情况。结果治疗前,两组患者FSI各维度评分及总分,FACT-L各维度评分及总分,细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、自然杀伤(NK)细胞、CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。治疗后,对照组患者FSI各维度评分及总分均高于治疗前及治疗组;治疗组患者生理状态、情绪状态、对疾病关注度评分及总分均高于治疗前,且生理状态、社会家庭状态、情绪状态、功能状态、对疾病关注度评分及总分均高于对照组;两组患者CEA、CYFRA21-1及NSE水平均较治疗前下降,且治疗组患者均低于对照组患者;治疗组患者NK细胞、CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平均较治疗前上升,且均高于对照组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗组患者血液学不良反应发生例数少于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论红参发酵产物联合长春瑞滨及顺铂化疗方案能够有效提高晚期非小细胞肺癌患者的免疫功能及生活质量,降低血清肿瘤标志物水平,并减轻血液学不良反应。