沉默N-cadherin对人牙髓干细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨沉默N-cadherin对人牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）增殖和迁移能力的影响,为基于DPSCs的牙髓再生提供实验依据。方法采用N-cadherin sh RNA慢病毒转染DPSCs,q RT-PCR、Western blot检测N-cadherin的表达水平,验证沉默效率。实验分为阴性对照组（sh RNA-NC）和N-cadherin sh RNA沉默组。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移能力。结果N-cadherin sh RNA可显著降低DPSCs的N-cadherin m RNA和蛋白的表达水平（P<0.001）。N-cadherin sh RNA组细胞增殖活性分别在细胞接种的第3、4天高于sh RNA-NC组,第6～8天低于sh RNA-NC组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;在第3天时,N-cadherin sh RNA组处于S期和G2期的细胞比例大于sh RNA-NC组（P<0.05）;在第6天时,N-cadherin sh RNA...     

酸性成纤维细胞生长因子在宫颈癌中的表达及其信号传导途径

目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)在宫颈癌发生发展中的作用及其信号传导机制.方法应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)对36例宫颈癌组织aFGF 及其受体FGFR1的表达进行了分析;并以不同浓度的aFGF 和酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂genistein诱导宫颈癌细胞株HeLa细胞,[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定蛋白激酶C(PKC)及细胞外信号调节激酶(ERK)的活性.结果 aFGF mRNA 和FGFR1 mRNA在宫颈癌组织中的半定量检测结果分别为(1.233±0.064)和(1.168±0.103),与正常宫颈组织相比,差异有显著性(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05);随着aFGF浓度的增加,HeLa细胞PKC及ERK 活性随之升高,与aFGF浓度呈剂量依赖效应;genistein抑制细胞内PKC及ERK 活性,与genistein 浓度亦呈剂量依赖效应.结论提示aFGF 与宫颈癌的发生、发展、浸润呈正相关,其受体具有TPK活性,TPK激活后可进一步激活PKC和ERK,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子.     

基于线粒体功能的蒙药调控肿瘤微环境的研究设想

肿瘤的发生、发展是一个复杂的过程,生命科学如此发展也没有完全了解它的发生发展规律。近年来,随着对细胞功能的深入研究,细胞小器官在肿瘤发生、发展中的作用日益受到人们的关注。细胞小器官中细胞赖以生存的能量来源器官是线粒体。线粒体在细胞内能量代谢、自由基产生、衰老、凋亡等生命活动中起重要作用。肿瘤细胞线粒体的基因突变、呼吸链缺陷、线粒体膜的改变、能量代谢异常等因素均会影响肿瘤组织局部或整体微环境的功能,从而增强肿瘤发生和转移。许多研究表明,传统蒙药能够影响线粒体功能改变组织微环境的作用。现在现代医学也试图改变肿瘤微环境来达到治疗肿瘤的目的,不过因多种因素结果不是理想。我们利用传统蒙药的调控局部或整体微环境线粒体功能的作用做了治疗肿瘤的新的研究设想。     

医学诺贝尔之路(1908):两重防线、“魔弹”及其他

还记得第一届诺贝尔医学奖获得者贝林吗?是的,我们今天还要再次提起他。毫无疑问,1901年的那次获奖给贝林带来了崇高的名誉和丰厚的收入,不过在后人看来,贝林人格上不大不小的污点也因那次获奖而挥之不去——整个事情都与另一位天才科学家有关,他就是德国人保罗·埃尔利希(Paul Ehrlich,又译作欧利希、埃利希)。埃尔利希是一个才华横溢的犹太人,生于1854年3月14日(与贝林的生日恰好相差一天),1878年获得医学博士学位。此后,埃尔利希作为弗雷里希教授的助手从事染料和组织染色的研究。在研究中,埃尔利希将染料分为酸性、碱性和中性,相对应地,血液细胞的颗粒也被分为同样的三类,今天临床上仍在沿用的嗜酸性粒细胞、     

嗜酸性粒细胞浸润性鼻黏膜炎症SUMO特异性蛋白酶3表达降低促进替代激活巨噬细胞极化

目的 探讨SUMO特异性蛋白酶3(SENP 3)在嗜酸性粒细胞浸润性鼻黏膜炎症中对巨噬细胞极化产生的影响.方法 嗜酸性粒细胞浸润性鼻黏膜炎症患者鼻黏膜组织中CD68、CD206、SENP3免疫荧光染色共定位.用白细胞介素-4(IL-4)和IL-13刺激SENP3基因敲除小鼠和对照小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM),体外诱...     

腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞感染及促增殖作用的实验研究

目的　观察复制缺陷型重组腺病毒载体介导酸性成纤维生长因子 (aFGF)对体外培养的兔角膜内皮细胞 (RCEC)的感染效率和促增殖作用。方法　 2 93A细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒 ,选用细胞半数感染剂量 (TCID50 )法测定病毒滴度。体外培养RCEC ,用携带报告基因 (LacZ)的重组腺病毒 (Ad LacZ)感染RCEC ,二甲基甲酰胺 (X gal)染色估计瞬时感染效率 ,将含aFGF的重组腺病毒 (Ad aFGF)感染RCEC ,RT PCR、Westernblot分别检测aFGF转录及蛋白质表达情况 ,噻唑盐 (MTT)法检测转基因细胞增殖情况。结果　病毒滴度为 2× 10 8pfu/ml;重组腺病毒感染RCEC 2 4h后即可检测到外源基因表达 ,当感染倍数 (MOI)值等于 2 0时 ,Ad LacZ对RCEC的感染效率为 10 0 % ,感染Ad aFGF对RCEC增殖有促进作用 (F =2 17.10 7,P <0 .0 5 )。结论　复制缺陷型重组腺病毒载体介导的外源基因在RCEC中可有效表达 ,感染Ad aFGF对RCEC增殖具有促进作用。     

电针对帕金森病大鼠室管膜下区细胞增殖和胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的:观察电针对帕金森病(PD)大鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(6只)、模型组(6只)和电针组(6只)。右侧前脑内侧束注射六羟基多巴胺制备PD模型。电针组于造模1周开始高频(100Hz)电针"合谷"太冲"穴,每次30min,每日1次,连续电针21d。以酪氨酸羟化酶(TH)、抗增殖细胞核抗原(PCNA)以及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫组化阳性分别显示SVZ多巴胺能神经末梢、分裂细胞和神经干细胞。结果:正常对照组右侧纹状体有较强的TH表达,而模型组和电针组的表达均几乎为零;模型组右侧SVZ的PCNA免疫反应阳性细胞数和表达量均显著低于正常对照组(P<0.01),电针组较模型组均显著增高(P<0.01);模型组右侧SVZ的GFAP表达水平显著低于正常对照组(P<0.01),电针组较模型组显著增高(P<0.05)。结论:电针可不通过增加TH表达而逆转PD大鼠损伤侧SVZ的PCNA和GFAP表达减少,提示其改善PD临床症状的可能机制。     

肿瘤骨转移前微环境形成机制研究进展

肿瘤转移前微环境的形成,是转移病灶形成的重要基础,机制复杂,为预防及治疗肿瘤转移增加了困难。肿瘤发生骨转移较为常见,在骨组织中亦存在预转移前微环境,其中主要包括原发肿瘤来源成分、肿瘤细胞动员的骨髓细胞及骨基质等。本文就肿瘤发生骨转移前微环境形成的机制及过程做一综述,为肿瘤的预防和治疗提供参考。     

非小细胞肺癌中医辨证分型与肿瘤免疫微环境的关系

目的 基于Opal多重染色技术探讨非小细胞肺癌肿瘤微环境与中医寒热证、气虚证、痰湿证、阴虚证、热毒证、血瘀证的关系。方法 收集ⅢB期及以上非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）初治患者的肿瘤组织样本,采用多重免疫荧光染色法检测肿瘤免疫微环境中10个指标（CD3、CD4、CD8、CD68、CD163、FOXP3、LAG3、TIM3、PD-1、PDL1）的蛋白表达情况,分析其与临床特征及中医证型的关系。结果 本研究共纳入69例患者,其中61例患者记录了中医寒热证型,56例患者记录了中医气虚证、痰湿证、阴虚证、热毒证、血瘀证证型,其中伴有气虚证、痰湿证的患者居多。分析临床特征与中医辨证分型、肿瘤免疫微环境的关系发现,Ⅳ期患者中,CD8+T细胞表达的比例最高;男性患者中痰湿证的比例比女性高,PD-L1的表达比例最高;非L858R敏感突变患者中痰湿证居多,EGFR突变中TIM3表达比例最高（P<0.05）。中医辨证分型与肿瘤免疫微环境的分析结果提示,热证患者中CD4+T细胞及CD8+T细胞表达水平更高,阴虚证与肿瘤区域中CD8+T细胞的表达负相关,...     

从痰论治肿瘤微环境与肿瘤转移相关作用机制

痰是体内津液代谢失常的病理产物,善于走行和流窜;化痰法是中医治疗肿瘤的主要治法之一;肿瘤微环境的作用与中医"痰"的概念有相通之处,现代药理研究也发现,半夏、浙贝母等多种化痰类中药作用于肿瘤组织能有效调节细胞黏附分子的表达、改善异常的新生血管、逆转肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)过程,从而抑制肿瘤转移。