UHPLC-DAD法同时测定精制冠心片中6种成分含量

摘 要 目的：建立同时测定精制冠心片中芍药苷、迷迭香酸、丹酚酸B、藁本内酯、隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量的UHPLC DAD检测方法。方法: 采用Dikma Endevaorsil C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,柱温：30℃,流速：0.3 ml·min^-1,流动相为乙腈 0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为230,270,288,321 nm。结果: 芍药苷、迷迭香酸、丹酚酸B、藁本内酯、隐丹参酮、丹参酮ⅡA分别在0.0010～0.010 2μg（r=0.999 8）,0.005 7～0.056 9μg（r=1.000 0）,0.005 3～0.052 7μg（r=1.000 0,0.002 1～0.020 6 μg（r=1.000 0）,0.001 1～0.011 2 μg（r=1.000 0）,0.001 4～0.014 4 μg（r=0.999 8）范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.78%(RSD=0.50%),97.99%(RSD=0.76%),98.44%(RSD=0.85%),99.12%(RSD=0.66%),98.82%(RSD=0.81%),97.80%(RSD=0.80%)。结论:该方法简便、快速、准确,可用于精制冠心片的质量控制。     

HPLC测定留兰香中橙皮苷和迷迭香酸的含量

目的:建立留兰香药材中橙皮苷、迷迭香酸的HPLC含量测定方法。方法:采用戴安高效液相色谱仪,对供试品溶液的制备方法、流动相等分析条件进行了优化筛选,并对分析方法的线性范围、重复性、加样回收率等进行考察,建立分别测定橙皮苷、迷迭香酸的留兰香药材质量控制方法。结果:采用Inertsil ODS-3 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸溶液(18∶82)等度洗脱,流速1.0 m L·min-1,测定留兰香中橙皮苷和迷迭香酸的检测波长分别为283,330 nm,柱温分别为30,35℃。回归方程橙皮苷为Y=27.61X+0.040 2(r=0.999 9,0.008 434~1.687μg),平均加样回收率为96.43%(RSD 1.4%);迷迭香酸为Y=51.44X-0.172 3(r=0.999 9,0.018 91~1.891μg),平均加样回收率为99.99%(RSD1.7%)。结论:该方法简便准确、分离度好、重复性好,可用于留兰香中橙皮苷和迷迭香酸的含量测定。     

迷迭香酸通过诱导凋亡及抑制NF-κB信号通路发挥抗肝癌作用的机制研究

目的:探讨迷迭香酸对小鼠肝癌H22移植瘤生长的抑制作用及分子机制。方法:建立雄性昆明种小鼠肝癌H22皮下移植瘤模型,荷瘤小鼠随机分为如下4组(n=10):阴性对照组、迷迭香酸钠25,50mg/kg组、阿霉素组(ADM,5mg/kg),连续给药10天(ip)。测量实体瘤体积,计算药物抑瘤率;进行外周血白细胞分类计数;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法测定肿瘤组织中NF-κB的mRNA表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中Caspase-3、bcl-2、Bax及NF-κB p65、NF-κB p50、p-IκB-α蛋白表达水平。结果:迷迭香酸钠25、50mg/kg剂量组肿瘤生长变缓,抑瘤率分别为45.67%,52.82%。外周血白细胞及淋巴细胞数目较对照组明显上升。迷迭香酸钠25,50mg/kg组小鼠体重与对照组无明显差异。迷迭香酸钠50mg/kg组肿瘤组织发生明显细胞凋亡,Bax,Caspsase-3蛋白表达显著升高,bcl-2表达显著降低,同时NF-κB的mRNA表达及p-IκB-α蛋白表达显著减少,NF-κB信号通路受到抑制。结论:迷迭香酸钠能通过诱导凋亡、抑制NF-κB通路活性而在H22荷瘤小鼠体内发挥显著的抗肝癌作用,迷迭香酸钠具有良好抗肝癌活性,展现出低毒优点,有望成为抗肝癌新药。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和网络药理学探讨丝穗金粟兰水提物抗炎镇痛药效物质及作用机制

目的 利用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）分析丝穗金粟兰Chloranthus fortune水提物的主要成分,并结合网络药理学的方法对其抗炎镇痛药效物质及作用机制进行预测分析。方法 结合ChemSpider数据库、mz Cloud平台及现有文献研究,对目标化合物二级质谱特征碎片离子进行比对确认,鉴定丝穗金粟兰水提物的化学成分;通过FAFDrug4数据库筛选丝穗金粟兰水提物的活性成分,运用Pharmmapper平台和Uniprot数据库预测丝穗金粟兰的成分靶点,GeneCards平台获得相关疾病靶点,利用Venny平台获得成分和疾病的交集靶点;通过String数据库和Cytoscape3.7.0软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络,并筛选核心靶点,利用David数据库对潜在的核心靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析,并构建“活性成分-靶点-...     

迷迭香酸在大鼠离体小肠中的吸收机制研究

目的 考察迷迭香酸在大鼠离体小肠中的吸收机制。方法 Ussing Chamber分析0.5、1、2、4 mg/mL迷迭香酸在肠黏膜中的透过情况,探讨P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对该成分肠黏膜透过的影响,以及不同辅料(泊洛沙姆188、聚氧乙烯35蓖麻油、吐温80)对其小肠吸收的促进作用。结果 迷迭香酸在大鼠十二指肠、空肠、回肠中的吸收速率与其质量浓度呈线性关系(r>0.90),加入维拉帕米后吸收提高(P<0.05)。3 mg/mL泊洛沙姆188、3 mg/mL聚氧乙烯35蓖麻油增加迷迭香酸在空肠、回肠中的吸收(P<0.05)。结论 迷迭香酸在大鼠离体小肠中的吸收机制为被动扩散,其肠黏膜吸收过程受P-糖蛋白转运体影响,泊洛沙姆188、聚氧乙烯35蓖麻油可促进其吸收。     

9个产地夏枯草主要化学成分的比较分析

目的 对9个产地夏枯草的主要化学成分进行测定,并进行主成分分析和聚类分析.方法 用分光光度计法测定夏枯草多糖和总黄酮含量,HPLC法测定迷迭香酸含量.结果 9个产地夏枯草多糖含量在6.81%~12.49%,总黄酮含量在3.29%~5.82%,迷迭香酸含量在1.0%~3.3%.夏枯草的主成分为多糖,聚类结果显示地理位置相近的聚为一类.结论 9个产地夏枯草的主要化学成分含量比较,差异具有统计学意义,建议夏枯草质量评价应结合多糖含量.     

野生与栽培夏枯草不同生长期3种酚酸成分含量动态研究

目的通过研究野生与栽培夏枯草全草不同生长期的指纹图谱及3种酚酸成分含量动态变化规律,确定夏枯草全草的最佳采收期,研究全草的药用价值,并对野生与栽培夏枯草进行差异性比较。方法采用UPLC法测定野生与栽培夏枯草全草的指纹图谱及迷迭香酸、异迷迭香酸苷和咖啡酸的含量。结果夏枯草全草不同生长时期3种酚酸成分的含量差异较大;野生夏枯草与栽培夏枯草指纹图谱存在一定差异,3种酚酸成分含量差异不明显。结论夏枯草全草的最佳采收期在6月中上旬,野生与栽培夏枯草全草均具有一定的入药价值。     

迷迭香酸对前列腺癌细胞生物行为学的影响

目的初步探讨迷迭香酸对人前列腺癌细胞DU-145恶性生物行为学的影响。方法培养前列腺癌细胞DU-145,利用MTT方法检测药物对癌细胞存活率和生长状态的影响;用流式细胞仪分析细胞总体的凋亡情况;采用细胞划痕试验和利用Transwell小室检测不同浓度的药物处理一定时间后前列腺癌细胞DU-145的运动、迁移、侵袭能力的变化;通过Western blot法检测迷迭香酸作用前列腺癌细胞DU-145后丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路P38,ERK、JNK蛋白表达量的情况。结果MTT结果显示迷迭香酸呈浓度梯度抑制前列腺癌细胞DU-145的生长;迷迭香酸能够抑制前列腺癌细胞DU-145的运动、迁移、侵袭;通过Western blot方法检测表明,迷迭香酸增加磷酸化的P38和JNK蛋白表达,降低磷酸化的ERK蛋白量表达。结论迷迭香酸可以抑制前列腺癌细胞DU-145的存活率,促进癌细胞凋亡,抑制其迁移能力,其机理可能与调节MAPK通路有关。     

酒丹参标准汤剂的质量评价

目的:建立酒丹参标准汤剂的质量控制方法,为酒丹参配方颗粒及其他酒丹参相关产品的质量评价提供参考。方法:收集具有代表性的酒丹参饮片15批,制备酒丹参标准汤剂,建立HPLC指纹图谱,测定5种酚酸类(丹参素钠、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B)成分含量;采用已知对照品为参照,对指纹图谱主要色谱峰进行归属,明确酒丹参标准汤剂中的主要化学成分;计算出膏率,5种丹酚酸类成分转移率和溶液p H,建立综合评价指标来评价酒丹参标准汤剂制备工艺的稳定性。结果:酒丹参标准汤剂的主要成分为酚酸类成分,5种酚酸类(丹参素钠、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B)成分质量分数分别为0. 21%～0. 37%,0. 03%～0. 10%,0. 08%～0. 18%,0. 07%～0. 13%,2. 68%～4. 34%,转移率分别为71. 8%～85. 4%,50. 0%～71. 4%,68. 2%～81. 0%,66. 7%～84. 6%,67. 5%～79. 6%;出膏率45. 1%～55. 3%; p H 5. 91～6. 05; 15批酒丹参标准汤剂HPLC指纹图谱与对照图谱相比,相似度均 0. 98,图谱显示有12个共有峰,其中7个指认为丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B。结论:建立的系统评价酒丹参标准汤剂的质量方法稳定可行,为酒丹参水煎剂相关制剂的质量控制提供参考。     

薄荷标准汤剂的指纹图谱及成分分析

目的:建立薄荷标准汤剂的指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,对其化学成分进行分析,并建立迷迭香酸的含量测定方法。方法:测定10批不同产地薄荷饮片水煎液制成的标准汤剂的HPLC指纹图谱,色谱条件为采用Kromasil 100-5-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0. 2%甲酸水溶液梯度洗脱,柱温30℃,流速1 mL·min~(-1),检测波长330 nm。将10批指纹图谱导入"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012. 130723版),进行色谱峰匹配,采用平均数法生成对照图谱,并对10批指纹图谱进行相似度评价。结果:建立了薄荷饮片标准汤剂的指纹图谱,标定出13个共有峰;对10批不同产地薄荷饮片标准汤剂的指纹图谱进行相似度评价,相似度均达到0. 90以上;同时采用飞行时间质谱法对指纹图谱中的主要化学成分进行归属,并对其中9个共有峰进行了指认,使用该方法可同时测定迷迭香酸的含量。结论:该研究方法简单、准确、快速、重复性好、可行性强,能有效地对薄荷标准汤剂的质量进行快速评价,同时也为薄荷配方颗粒的质量评价奠定了基础。