石见穿配方颗粒的特征图谱和含量测定

目的 建立石见穿配方颗粒HPLC特征图谱及含量测定的方法,为其质量控制提供依据。方法 采用OSAKA SODA CAPCELL PAK C18 MGⅡ色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.0μm）,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 ml/min,检测波长240 nm（特征图谱）、330 nm（含量测定）。结果 建立了石见穿配方颗粒的特征图谱,标定了5个共有特征峰,采用对照品指认了其中的4个色谱峰。13批石见穿配方颗粒样品中有10批特征图谱的相似度大于0.9。10批石见穿配方颗粒中迷迭香酸的含量测定范围为0.67～0.81 mg/g。结论 建立的HPLC特征图谱及含量测定方法操作简便、可靠,为石见穿配方颗粒的质量控制和临床合理应用提供了科学依据。     

多指标综合加权评分法优选复方夏枯草洗剂提取工艺研究

[目的] 优选复方夏枯草洗剂的提取工艺。[方法] 采用L₉（3⁴）正交设计,以迷迭香酸、丹酚酸B的含量及出膏率的综合评分为指标,考察料液比、提取时间、提取次数对提取效果的影响,优选复方夏枯草洗剂的最佳提取工艺。[结果] 根据综合评分的结果,优选出最佳提取工艺为加8倍水,提取3次,每次0.5 h。[结论] 该工艺准确可靠,可行性好。     

基于中心复合序贯设计法丹参川芎嗪注射液水沉工艺优化

目的基于质量源于设计(QbD)理念和序贯设计法优化丹参川芎嗪注射液前处理过程中的水沉工艺。方法研究联用了鱼刺图法及基于全局式序贯设计的中心复合实验法作为优化方法,在基础实验设计中关键参数维度的轴向方向增加实验点,再进行新的多元线性回归拟合,最终得到了水沉工艺的设计空间并对其进行了验证,同时给出了较为稳健且全面的操作空间。结果根据设计空间,推荐操作空间为水沉体系pH值为3.1～3.4时,加水倍量3.25～5.00,静置时间为7～17 h,静置温度为7℃。结论首次在中药制药过程工艺优化中引入序贯设计法。相较于样本量巨大的均匀空间网格设计、正交设计等实验设计方法而言,序贯设计在实现与前者同样的样本对可行域覆盖程度的基础上,能够有效降低工艺优化实验的工作量,避免样本与人力物力的浪费,同时保证较高的模型预测性能。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS与网络药理学探讨夏枯草茎叶抗炎有效成分及其作用机制

目的 基于超高效液相色谱–四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）、网络药理学、分子对接及分子动力学模拟探究夏枯草茎叶总酚抗炎有效成分及其作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对夏枯草茎叶水提物中成分进行分析;使用Swiss Target Prediction、GeneCards和OMIM数据库筛选夏枯草抗炎作用对应的靶点;使用STRING数据库和Cytoscape软件构建关键靶点蛋白相互作用（PPI）网络;通过Metascape数据库对关键靶点进行基因本体论（GO）功能与京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析;通过TCMSP、PDB数据库对已鉴定的成分与核心靶点进行分子对接;采用amber18软件包,取对接结合能前3位的对接复合物分别进行200 ns的分子动力学模拟。结果 共鉴定出异迷迭香酸苷、紫草酸、染料木素、槲皮素和丹参酚酸Y等22个化合物,其中酚酸类16种,黄酮类6种。基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到502个潜在抗炎靶点,PPI分析发现肿瘤蛋白（TP53）、信号传导和转录激活蛋白3(STAT3)、转录因子AP-1(JUN)、...     

迷迭香酸对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响及机制

目的 探讨迷迭香酸(RA)对胃癌细胞SGC-7901生长、增殖、凋亡的影响及机制。方法 CCK8检测不同浓度RA对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,筛选合适剂量;BrdU检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测氧化应激标志物;荧光探针检测活性氧(ROS);流式检测线粒体膜电位的变化;Western印迹检测线粒体损伤标志物(Bax/Bcl-2、Cleaved cas3/cas3)及Nrf2/HO-1通路(p-Nrf2/Nrf2、NQO1、HO-1)相关蛋白表达。结果 与对照组相比,RA浓度为10μmol/L时,RA对细胞生长的抑制作用较小,不具有显著差异。浓度为20μmol/L RA对细胞生长的抑制作用增加,差异显著(P<0.05)。CCK8实验结果将RA浓度分为4个组(RA 0、10、20、40μmol/L);与对照组(RA 0μmol/L)相比,除RA 10μmol/L剂量组差异无统计学意义外,20、40μmol/L剂量组Brdu阳性细胞百分数、线粒体膜电位均显著降低,细胞凋亡率、氧化应激标志物含量[低密度脂蛋白(LDL)、丙二醛(MDA)]、...     

基于TMT蛋白组学探讨迷迭香酸抗大鼠高尿酸血症的作用机制

目的 结合TMT蛋白组学技术,探讨迷迭香酸抗大鼠高尿酸血症的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、苯溴马隆组、迷迭香酸（50、100 mg/kg）组,除对照组给予蒸馏水外,其他各组大鼠均饮用10%果糖水建立高尿酸血症模型。连续给药4周后,检测血清尿酸水平,黄嘌呤氧化酶（XOD）与腺苷脱氨酶水平（ADA）活性,苏木素–伊红（HE）染色观察回肠组织病理变化,实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测回肠组织尿酸转运体三磷酸腺苷结合转运蛋白G2（ABCG2）、葡萄糖转运体9（GLUT9）mRNA的表达,TMT蛋白组学检测大鼠回肠组织蛋白的表达。结果 与模型组比较,迷迭香酸可显著降低大鼠血清尿酸水平,降低XOD与ADA活性（P＜0.05、0.01、0.001）,以及回肠组织内的GLUT9 mRNA的表达（P＜0.05）。TMT蛋白组测序共筛选出2 975个差异蛋白（log₂FC＞1.5,P＜0.05）,通路分析显示迷迭香酸主要调节Th1/2/17细胞分化等通路。结论 迷迭香酸发挥抗大鼠高尿酸血症的作用机制可能与抑制ADA和XOD的活性,调节肠道GLUT9 mRNA表达和Th1/2/17细胞分化通路有关。     

迷迭香酸对5/6肾切除大鼠尿毒素、尿蛋白及血清丙二醛和超氧化物歧化酶的影响

目的 观察迷迭香酸对5/6肾切除大鼠肾功能以及对大鼠尿蛋白和血清丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响.方法 制作大鼠慢性肾功能不全模型,实验分组为正常对照组,模型对照组,迷迭香酸组.根据手术后2周血肌酐值随机分组,每组6只.以迷迭香酸作为干预因素,应用丽春红S法等方法测定迷迭香酸对5/6肾切除大鼠尿蛋白、尿肌酐和血肌酐、血清MDA和S0D影响.结果 (1)与对照组及模型组比较,迷迭香酸组血肌酐及内生肌酐清除率均升高(F=38.912、19.968,P＜0.01,P＜0.05);(2)迷迭香酸对慢性肾功能不全大鼠的24h尿蛋白有明显改善作用(F=16.288,P＜0.01);(3)迷迭香酸对大鼠MDA及SOD无明显影响(P均＞0.05).结论 迷迭香酸可以降低尿蛋白量及血肌酐值,提高内生肌酐清除率,延缓肾脏衰竭.但对大鼠MDA及SOD无明显影响.     

高效液相色谱法测定不同产地夏枯草中咖啡酸和迷迭香酸的含量

目的比较不同产地夏枯草中咖啡酸和迷迭香酸的含量。方法采用高效液相色谱法,Waters SunFire C18色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）,甲醇-0．1％甲酸梯度洗脱,流速1．0mL／min,检测波长330nm。结果咖啡酸在0．0992～0．4960gg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999）,平均回收率为99．75％,RSD=2．27％（n=5）;迷迭香酸在0．8288～4．1440gg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9998）,平均回收率为101．37％,RSD=1．19％（n=5）;不同产地夏枯草中咖啡酸与迷迭香酸的含量分别在0．02％-0．05％,0．09％-0．20％之间。结论不同产地夏枯草中咖啡酸和迷迭香酸含量差异很大,使用夏枯草时要注意产地差异。     

迷迭香酸基于AKT/mTOR通路促进抑郁模型大鼠海马神经元再生

目的 探讨迷迭香酸是否基于AKT/mTOR通路促进大鼠海马神经元再生。方法 构建SD大鼠抑郁模型,腹腔注射迷迭香酸或盐酸帕罗西汀28天。应激结束观察各组大鼠行为学指标改变。检测大鼠海马神经生长因子(NGF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达差异及BrdU、NSE的比例。建立皮质酮诱导原代海马神经元细胞损伤模型,通过MK-2206阻断AKT通路,检测给予迷迭香酸后神经元存活率,测定各组AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 迷迭香酸组大鼠的行为学指标得到显著改善。NGF、NSE的表达显著升高,BrdU与NSE的比例增加。迷迭香酸能够明显改善皮质酮损伤导致的神经元再生,阻断AKT/mTOR后,可拮抗其对神经元的保护作用。结论 迷迭香酸可通过AKT/mTOR通路促进神经元再生,保护海马神经元,发挥抗抑郁作用。     

基于高通量测序中江丹参“发汗”过程中优势微生物群落与主要药效成分相关性研究

目的 探究中江丹参Salvia miltiorrhiza“发汗”过程中主要微生物群落及变化特征,以及优势微生物群落与主要药效成分之间的关系,以科学阐释传统“发汗”加工方式对中江丹参品质的影响。方法 采用高通量测序技术对“发汗”过程中江丹参的微生物多样性进行研究,结合化学品质分析,将优势微生物群落丰度与“发汗”丹参主要药效成分含量相关联,以期进一步判定“发汗”过程中影响中江丹参药材品质的主要微生物群落。结果 21个中江丹参“发汗”样品共检出221个真菌菌属,677个细菌菌属。“发汗”过程中始终存在的优势真菌有小戴卫霉属Davidiella、轮枝菌属Verticillium;优势细菌有绿菌门未归类菌属Chloroplast＿unclassified和根瘤菌属未归类菌属Mitochondria＿unclassified 2个未归类菌属,已知细菌有节细菌属Arthrobacter、链霉菌属Streptomyces等。同时,相关性研究表明,真菌小戴卫霉属与样品中紫草酸含量呈显著负相关;子囊菌门未归类霉属Ascomycota＿unclassified与丹参酮ⅡA含量呈显著正相关。细菌绿菌门未归类菌...