Phenylhexyl isothiocyanate induces gene p16 demethylation by down-regulating DNA methyltransferases in U266 cells

目的 研究异硫氰酸苯己酯(PHI)对骨髓瘤U266细胞株P16基因的去甲基化作用并探讨其作用机制.方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测U266 细胞经过PHI 处理后DNA 甲基转移酶DNMT1、DNMT3a 和DNMT3b基因的mRNA 的表达变化,用甲基化特异性聚合酶链反应检测PHI 作用前后U266细胞株P16 基因甲基化状态的变化.结果 使用不同浓度的PHI处理U266细胞72 h后,U266细胞表达DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的水平明显降低并呈浓度依赖性.以不同浓度的PHI处理U266细胞10d后,P16基因的甲基化状态被逐渐逆转.结论 PHI 可能通过抑制DNA 甲基转移酶的表达水平诱导P16 基因产生去甲基化,使失活的抑癌基因重新激活,诱导瘤细胞凋亡.     

青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7血管生成和肿瘤浸润作用研究

目的:观察青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7血管生成及浸润转移的抑制作用.方法:建立人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型,给予不同剂量青蒿琥酯治疗并观察其对移植瘤的抑制作用;用免疫组化检测移植瘤组织细胞中VEGF、HIF-1α、uPA、E-cadherin蛋白表达和Western blot检测移植瘤组织细胞中HIF-lα、VEGF蛋白表达.结果:青蒿琥酯低、高剂量组抑瘤率分别为(24.39±10.20)％、(40.24±7.02)％;免疫组化结果显示,与生理盐水组比较,青蒿琥酯低、高剂量组VEGF、HIF-1α蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);uPA和E-cadherin蛋白在生理盐水组和青蒿琥酯低、高剂量组中的表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05),HIF-1 α/VEGF之间表达呈正相关(r =0.983,P=0.000);West-em blot结果显示,青蒿琥酯低、高剂量组中VEGF、HIF-1α蛋白下调,表达量低于生理盐水组,青蒿琥酯高剂量组的蛋白表达量最低.HIF-lα与VEGF蛋白表达之间存在一致性.结论:青蒿琥酯可显著抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抗肿瘤血管及抑制肿瘤侵袭相关.     

老年单纯收缩期高血压64例治疗随访观察

目的探讨苯磺酸左旋氨氯地平联合单硝酸异山梨酯治疗老年单纯收缩期高血压(ISH)的疗效。方法将64例ISH患者随机分为治疗组和对照组,对照组患者给予苯磺酸左旋氨氯地平治疗,而治疗组在给予此治疗的基础上再加用单硝酸酯异山梨酯联合治疗。经过3⁵年的治疗后,随访观察并对比两组患者的血压控制情况。结果两组患者治疗后收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和脉压(PP)与治疗前相比较均明显下降,有统计学差异(P<0.05);与对照组比较,治疗组治疗后收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和脉压(PP)明显低于对照组,具有统计学差异(P<0.05)。结论苯磺酸左旋氨氯地平联合单硝酸异山梨酯治疗老年单纯收缩期高血压与单纯应用苯磺酸左旋氨氯地平相比治疗效果显著,在临床值得推广。     

催醒宁在大鼠离体灌流肝脏中的生物转化

用离体大鼠肝脏灌流方法,研究了胆碱酯酶抑制剂CXN的生物转化过程。径HPLC分离纯化及光谱分析,鉴定了CXN的六个脂溶性代谢产物的化学结构。产物Ⅰ为CXN原形,其余均为氧化产物。其中产物Ⅲ尚保留部分抑酶活力,而产物Ⅱ,Ⅴ及Ⅵ对小鼠全脑胆碱酯酶的抑酶活力明显下降。另外还观察到,代谢产物Ⅱ及Ⅴ对小鼠的急性毒性也明显减小。     

准种的研究现状

准种(quasispecies)是目前病毒研究领域的热点之一。虽然准种是从RNA病毒开始被认识到的,但目前已发现多种病原体亦存在准种现象,且由于准种的存在可能与患者慢性持续性感染、耐药和免疫预防有密切关系,所以本文就准种的概念和研究方法,以及准种与临床的关系作一综述。     

液相色谱法测定强力救心滴丸中蟾酥的华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量

目的:测定强力救心滴丸中蟾酥的主要成分华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量。方法:样品经甲醇超声处理提取,采用高效液相色谱法测定,色谱柱为 Alltima C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);柱温:40℃;流速:1mL·min~(-1);流动相:乙腈-0.5%磷酸二氢钾(pH=3.2)(50:50);检测波长:296nm。结果:华蟾酥毒基在0.25-1.51μg 范围内、酯蟾毒配基在0.26-1.55μg 范围内具有良好线性关系。华蟾酥毒基平均加样回收率为99.6%,RSD=2.1%(n=5);酯蟾毒配基平均加样回收率为98.2%,RSD=1.4%(n=5)。结论:该法准确、可靠,可用于强力救心滴丸中蟾酥的酯蟾毒配基和华蟾酥毒基含量测定。     

托吡酯治疗慢性偏头痛的临床疗效观察

目的观察托吡酯治疗慢性偏头痛的临床疗效。方法选取我院2009年10月至2013年2月诊治的慢性偏头痛患者120例,随机分为两组,每组60例,治疗组予托吡酯治疗,对照组予氟桂利嗪治疗,治疗3个月,统计两组的治疗总有效率。结果两组的总有效率分别为78.33%和70.00%。托吡酯治疗组优于氟桂利嗪治疗组(P<0.05)。结论托吡酯治疗慢性偏头痛安全有效。     

麝香保心丸联合硝酸异山梨酯注射液治疗不稳定型心绞痛90例临床护理

目的探讨麝香保心丸联合硝酸异山梨酯注射液治疗不稳定型心绞痛疗效及护理方法。方法将90例不稳定型心绞痛患者随机分为治疗组和对照组各45例,治疗组静脉滴注硝酸异山梨酯注射液同时口服麝香保心丸,对照组只静脉滴注硝酸异山梨酯注射液,均连续应用14d,观察两组临床症状,心电图及血流变学变化情况。结果治疗组心绞痛改善情况,心电图改善情况,血流变学变化情况均优于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论麝香保心丸联合硝酸异山梨酯注射液治疗不稳定型心绞痛能减轻心绞痛,改善心电图及血流变学指标,配合精心护理,疗效优于静脉滴注硝酸异山梨酯注射液。     

HPLC同时测定独活中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯含量

目的建立同时测定中药独活中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯含量的HPLC方法。方法药材样品加乙醚用索氏提取6h,水浴挥干,甲醇定容;采用MerckC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1mol/L硫酸铵溶液(70:30),用硫酸溶液(1→5)调节pH为3.0,流速为1.0mL/min,检测波长为322nm。结果理论板数以蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯计算均不低于5000,两物质的色谱峰分离度>1.5,对称因子均在0.95～1.05。蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯的线性范围分别为20.2～161.9和5.1～41.2mol/L,平均回收率为99.2%和98.8%,RSD为1.56%和2.16%。结论本实验建立的色谱方法敏感、准确、重现性好,可用于中药材独活的质量控制。     

三种阿尔茨海默症治疗药物促体外培养小鼠皮层神经元活性的比较

目的 :观察并比较 3种阿尔茨海默症治疗药物盐酸美金刚胺、美曲磷酯及白藜芦醇对体外培养小鼠皮层神经元活性的影响 ,为寻找作用机理更优的先导化合物提供理论依据。方法 :采用体外培养皮层神经元细胞的方法 ,解剖分离 15d胚胎小鼠皮层神经细胞 ,接种于 96孔板 ,4 8h后加药并培养72h ,相差显微镜及免疫组织细胞化学方法进行形态学观察 ,并以MTT法观察 3种药物对小鼠皮层神经元活性的影响。结果 :盐酸美金刚胺显著促进小鼠皮层神经元活性 ,并呈现出一定的量效关系 ;美曲磷酯 10pmol·L-1,0 .1,1,10nmol·L-1剂量组对皮层神经元细胞活性没有影响 ,而美曲磷酯 0 .1,1μmol·L-1剂量组显著抑制皮层神经元细胞活性 ;0 .1nmol·L-1白藜芦醇显著促进皮层神经元细胞活性 ,而白藜芦醇 0 .1,1,10 μmol·L-1剂量组显著抑制皮层神经元细胞活性。结论 :盐酸美金刚胺促小鼠皮层神经元活性较高 ,故以其为先导化合物设计药效更高的阿尔茨海默症治疗药物的方案是可行的。