趋化因子受体CCR6及CCR7在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的:探讨趋化因子受体CCR6、CCR7及其配体CCL20、CCL19/CCL21在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及其与临床病理特征的相关性.方法:以50例LSCC患者的肿瘤组织、癌旁组织、颈清扫淋巴结、外周血为研究对象,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time qRT-PCR)技术、免疫组织化学技术及流式细胞术检测趋化因子受体CCR6、CCR7及其配体(CCL20、CCL19/CCL21)的表达.结果:real-time qRT-PCR检测发现LSCC肿瘤组织中CCR6、CCR7及CCL19/CCL21 mRNA的表达量低于癌旁组织(P<0.05),CCL20 mRNA的表达量高于癌旁组织(P<0.05);免疫组织化学检测发现LSCC肿瘤组织及转移淋巴结均有CCR6和CCR7的表达,且伴颈淋巴结转移的LSCC组织CCR6、CCR7的表达高于不伴颈淋巴结转移组织,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测发现,LSCC患者外周血CD4+CCR6+T细胞占外周血单个核细胞的比例显著高于正常对照组(P<0.05),而CD4+CCR7+T细胞的比例则显著低于正常对照组(P<0.05).结论:趋化因子受体CCR6、CCR7在LSCC组织、转移淋巴结及外周血中表达,与LSCC的发展、浸润、颈部淋巴结转移有关.     

脓毒症患者KIM-1、EOT-3、CXCL10水平与急性肾损伤的相关性探究

目的 探究脓毒症患者肾损伤分子-1(KIM-1)、嗜酸性粒细胞趋化因子-3(EOT-3)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)水平与急性肾损伤的相关性。方法 选取2018年5月—2021年6月收治的190例脓毒症,根据有无合并急性肾损伤分为观察组90例(急性肾损伤)和对照组100例(无急性肾损伤)。比较2组临床资料及KIM-1、EOT-3、CXCL10、血肌酐(SCr)、尿素(BUN)水平,分析脓毒症患者并发急性肾损伤的影响因素及脓毒症并发急性肾损伤患者KIM-1、EOT-3、CXCL10水平与SCr、BUN的相关性,比较不同预后脓毒症并发急性肾损伤患者入院当日及入院第3、7日KIM-1、EOT-3、CXCL10水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价KIM-1、EOT-3、CXCL10水平对脓毒症并发急性肾损伤患者预后的预测价值。结果 观察组SCr、BUN、KIM-1、EOT-3、CXCL10水平均高于对照组(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示SCr、BUN、KIM-1、EOT-3、CXCL10为脓毒症患者并发急性肾损伤的独立危险因素(P<0.01)。...     

嘎日迪-13对局灶性脑缺血大鼠NSE、TNF-α、IL-6表达的影响

目的探讨血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)在大鼠脑缺血损伤后的作用及嘎日迪-13对其影响。方法取雄性SD大鼠360只,将大鼠随机分为脑缺血模型组、假手术组及嘎日迪-13大、中、小剂量(0.24、0.12、0.06 g/kg)组,每组又随机分为缺血1、6、12、24、72、120 h的6个时相组,采用改良Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ELISA法检测血清中NSE、TNF-α、IL-6水平。结果NSE、TNF-α、IL-6在假手术组表达少;而在模型组脑缺血损伤1 h后开始上升,NSE于12 h达高峰,TNF-α、IL-6在24 h达高峰,之后逐渐下降(P0.01);嘎日迪-13各剂量治疗组能显著降低神经功能评分,NSE、TNF-α、IL-6表达量明显受到抑制(P0.01、0.05)。结论嘎日迪-13对大鼠脑缺血损伤具有明显的保护作用,提示嘎日迪-13可能是通过减轻脑缺血损伤后神经元的损伤,调节炎症因子相互之间的作用,减轻脑组织损伤,从而发挥对脑缺血损伤的治疗作用。     

Critical Amino Acid Residues for Nicotine 5＇ -Hydroxylation in Human CYP2A Enzymes

Objective： We have continued previous work in which we demonstrated that #117 and #372 amino acids contributed to the high activities of human CYP2A13 in catalyzing 4-methylnitrosamino-1-（3-pyridyl）-1-butanone（NNK） and aflatoxin BI（AFB1） carcinogenic activation. The present study was designed to identify other potential amino acid residues that contribute to the different catalytic characteristics of two CYP2A enzymes, CYP2A6 and CYP2A13, in nicotine metabolism and provide insights of the substrate and related amino acid residues interactions. Methods： A series of reciprocally substituted mutants of CYP2A6lle^300→ Phe, CYP2A6Gly^301aAla, CYP2A6Ser^369 → Gly, CYP2A13Phe^300→ Ile, CYP2A13Ala^301 → Gly and CYP2A13Gly^369 → Set were generated by site-directed mutagenesis/baculovirus-Sf9 insect cells expression. Comparative kinetic analysis of nicotine 5＇hydroxylatin by wild type and mutant CYP2A proteins was performed. Results：All amino acid residue substitutions at 300, 301 and 369 caused significant kinetic property changes in nicotine metabolism. While CYP2A6Ile^300→ Phe and CYP2A6Gly^301→Ala mutations had notable catalytic efficiency increases compared to that for the wild type CYP2A6, CYP2A13Phe^300→Ile and CYP2A13Ala^301→Gly replacement introduced remarkable catalytic efficiency decreases. In addition, all these catalytic efficiency alterations were caused by Vmax variations rather than Km changes. Substitution of #369 residue significantly affected both Km and Vmax values. CYP2A6Ser^369 → Gly increase the catalytic efficiency via a significant Km decrease versus Vmax enhancement, while the opposite effects were seen with CYP2A13Gly^369 → Ser. Conclusion：#300, #301 and #369 residues in human CYP2A6/13 play important roles in nicotine 5＇ -oxidation. Switching #300 or #301 residues did not affect the CYP2A protein affinities toward nicotine, although these amino acids are located in the active center. Set369 to Gly substitution indirectly affected nicotine binding by     

CXCL12/CXCR4生物学轴在中枢神经系统的研究进展

趋化因子是一类由细胞分泌的结构相似、具有定向趋化作用的小分子蛋白质。目前有关趋化因子在免疫系统的作用研究较多,但是有关趋化因子及其受体的结构与功能在中枢神经系统的作用研究较少。CXCL12/CX-CR4生物学轴是指由趋化因子CXCL12与其特异性受体CXCR4相互作用而构成的一个与细胞间信息传递、细胞迁移有密切关系的偶联分子对。本研究就该生物学轴在中枢神经系统的作用及研究进展作一综述。     

PIK3CA基因与肿瘤发生发展的研究进展

PIK3CA是新近发现的一种体细胞突变的癌基因,其可能通过参与PI3K/AKT细胞信号转导途径调节细胞的生长和凋亡。目前关于癌基因PIK3CA与肿瘤的关系及其致瘤机制都成为人们研究肿瘤的一个热点。本文将就PIK3CA与肿瘤发生发展的关系及其致肿瘤机制的研究现状进行综述。1 PIK3CA基因及其蛋白1.1 PIK3CA PIK3CA基因是由Volinia等[1]1994年利用原位杂交技术检测到的,其定位于3q26·3,长34 kb,包含20个外显子,编码1 068种氨基酸,该组氨基酸产生一组长124 kD的蛋白。PIK3CA编码I类磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylino-sitol     

稳定敲低SIGIRR的人肾小管上皮细胞的构建及其初步功能的研究

目的：建立稳定敲低单免疫球蛋白白介素1相关受体(SIGIRR)基因的人肾小管上皮细胞株(HKC),并初步研究其功能。方法针对SIGIRR基因的有效靶点设计shRNA序列,与 GV248-GFP-Puro 慢病毒载体连接产生重组体( GV248-GFP-Puro-shSIGIRR)。将测序验证正确的重组体与包装质粒(pMDL、pRev、pVSVG)共转染293T细胞进行病毒包装,收集病毒并感染HKC细胞。实时荧光定量PCR( qRT-PCR)和Western blot法分析检测HKC细胞中SIGIRR干涉效率。应用白细胞介素-1β( IL-1β)刺激成功敲低SIGIRR的HKC细胞及对照细胞, Western blot法检测其下游核转录因子NF-κB(p65)的磷酸化水平,qRT-PCR分析单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、正常 T细胞表达和分泌的活化调节蛋白( RANTES) mRNA水平。结果成功构建重组慢病毒载体GV248-GFP-Puro-shSIGIRR。 qRT-PCR 和 Western blot 法均证实在HKC细胞中成功敲低SIGIRR的表达。此外, IL-1β刺激后,与对照细胞相比,敲低SIGIRR的HKC细胞( HKC/shSIGIRR)的p65磷酸化水平上调, MCP-1和 RANTES mR-NA表达水平升高。结论 HKC的炎症反应中,SIGIRR蛋白对Toll样受体/白介素1受体(TLR/IL-1R)通路起“刹车”作用。该研究为狼疮性肾炎的治疗提供了新的潜在的靶点。     

13C苯丙氨酸呼气试验检测健康成人苯丙氨酸代谢

目的　绘制正常成年人L - [1- 13 C]苯丙氨酸呼气试验时相曲线 ,初步探索年龄和性别因素对13 C苯丙氨酸呼气试验检测苯丙氨酸代谢的影响。方法　 12名健康成年人按性别和年龄分组 ( <4 0岁和 >4 0岁组 )进行比较。每位受试者口服给予 10 0mgL - [1- 13 C]苯丙氨酸 ,应用气体同位素比值质谱仪测量服药前和服药后至 36 0min各时间点13 C丰度。结果　健康成年人口服L - [1- 13 C]苯丙氨酸呼气试验13 C排除速率时相曲线呈单峰 ,峰值位于服药后 10～ 30min ,苯丙氨酸脱羧代谢动力学参数在不同年龄和性别间差异均无显著意义(P >0 .0 5 )。结论　所有受试者13 C排除速率时相曲线呈单峰 ;年龄和性别因素可能不会显著影响体内苯丙氨酸代谢结果     

炎症细胞因子在嵌合抗原受体-T细胞治疗中的监测价值

目的探讨恶性血液病患者接受嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后, 12种炎症细胞因子表达水平对细胞因子释放综合征(CRS)的早期发现和指导治疗的重要意义。方法选择2017年至2020年南京医科大学第一附属医院采用CAR-T细胞免疫治疗的住院患者12例, 包括男性6例, 女性6例, 年龄53.0(49.8, 62.5)岁。12例CAR-T细胞免疫治疗患者细胞回输后, 采用流式细胞微球技术在不同时间点检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12P70、IL-17A、干扰素(IFN)-α、IFN-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平, 对比分析同期的C反应蛋白(CRP)、D二聚体(D-D)、血清铁蛋白(SF)和乳酸脱氢酶(LDH)。根据CRS诊断标准进行分级(包括0、1、2和3级), 比较4组间的差异。采用Spearman相关系数对炎症细胞因子表达水平和CRS分级进行相关性分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线, 确定炎症细胞因子预测CRS的敏感度、特异度。结果 12例患者CAR-T细胞回输后分别在第1、4、7、11天进行CRS...     

血清CXCR4和HMGB1水平在预测急性大出血患者输血相关性急性肺损伤预后中的价值研究

目的 研究血清趋化因子受体4(CXCR4)与高迁移率蛋白B1(HMGB1)水平在预测急性大出血患者输血相关疾病肺损伤(TRALI)患者预后中的价值。方法 回顾性将2019年1月至2022年1月间洪湖市中医医院收治的因急性大出血输血引发TRALI的63例患者纳为观察组,同期大出血输血未并发TRALI的60例患者纳为对照组。并根据观察组48 h内生存情况将其分为死亡组(n=11)与存活组(n=52)。检测并比较观察组与对照组、观察组不同预后患者血清CXCR4及HMGB1水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCR4及HMGB1水平在预测TRALI患者预后中的价值。结果 观察组患者血清CXCR4及HMGB1水平为(276.54±35.15) ng/L、(92.46±19.52)μg/L,均高于对照组[(183.64±20.79) ng/L、(56.89±16.44)μg/L],差异均有统计学意义(P <0.05)。TRALI死亡组患者血清CXCR4及HMGB1水平为(382.66±37.15) ng/L、(133.02±17.52)μg/L,均高于存活组[(254.09±21...