局部麻醉剂通过丝裂原活化蛋白激酶途径诱导人甲状腺癌细胞凋亡

目的探讨局部麻醉剂对人甲状腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法MTT法检测人甲状腺癌细胞经0 mM、1 mM、2 mM、4 mM、8 mM和16 mM的利多卡因及0 mM、0.2 mM、0.4 mM、0.8 mM、1.6 mM和3.2 mM的布比卡因分别干预24 h和48 h后的细胞活力流式细胞仪检测经4 mM和8 mM的利多卡因和0.8 mM和1.6 mM的布比卡因干预48 h后癌细胞的凋亡及线粒体膜电位;Western Blot检测凋亡相关因子及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径相关蛋白的表达;分别采用SP600125(JNK抑制剂)、PD98059(MEK抑制剂)、SB203580(p38 MAPK抑制剂)联合利多卡因或布比卡因对细胞进行处理,Western Blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果利多卡因和布比卡因干预24 h和48 h均可呈剂量依赖式抑制人甲状腺癌细胞的生长。利多卡因和布比卡因干预48 h可降低癌细胞线粒体膜电位,增加Caspase-3和Bax的表达,降低Bcl-2的表达激活p38和JNK,抑制ERK的活性。MAPK信号通路抑制剂可降低利多卡因和布比卡因诱导Caspase-3和Bax的表达,增加Bcl-2的表达。结论局部麻醉剂利多卡因和布比卡因可诱导人甲状腺癌细胞生存抑制和凋亡,其机制与MAPK通路激活有关。     

KRAS突变对肺损伤大鼠蛋白激酶信号途径的影响

目的 研究鼠类肉瘤病毒癌(KRAS)基因突变对肺损伤大鼠蛋白激酶信号途径的影响。方法 建立大鼠急性肺损伤模型。根据组织芯片KRAS蛋白表达分组,KRAS阴性组:KRAS蛋白表达H-score计分<3分),KRAS阳性组(KRAS蛋白表达H-score计分> 3分)。KRAS突变型组:突变型KRAS蛋白的表达H-score计分<3分,KRAS野生型组:突变型KRAS蛋白的表达H-score计分> 3分。采用免疫组化法检测10种肺损伤相关蛋白[磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K),KRAS,KRAS突变蛋白,NRAS,BRAF,丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK),细胞外信号调节激酶(ERK),磷酸化MEK1(p MEK1),磷酸化MEK2(p MEK2)和磷酸化ERK1/2(p ERK1/2)]的阳性表达,采用组织化学评分法(H-score)对蛋白表达情况进行定量并分组,比较各组KRAS下游蛋白及MEK2/ERK通路蛋白的表达情况。结果①与KRAS阴性组相比,KRAS阳性组该基因下游蛋白中BRAF、MEK、ERK表达显著上升(P <0. 05),而NRAS无显著差异(P> 0. 05);②与KRAS野生型相比,KRAS突变型基因下游蛋白中BRAF、MEK、ERK表达显著上升(P <0. 05),而NRAS无显著差异(P> 0. 05);③与KRAS阴性组相比,KRAS阳性组pMEK2,pERK1/2蛋白表达显著上升(P <0. 05),而p MEK1无显著差异(P> 0. 05)。结论 KRAS蛋白阳性大鼠肺损伤组织中,该蛋白下游蛋白BRAF、MEK和ERK(RAS/RAF/MEK/ERK信号通路的下游蛋白)在KRAS基因突变的肺损伤组织中的表达量显著增加,且MEK2/ERK通路蛋白MEK、p MEK2和ERK表达率也显著增加,提示KRAS蛋白通过调控其下游蛋白表达调控肺组织损伤,该过程可能与MEK2/ERK通路相关。     

功能互补式多途径延续护理对腹腔镜术后患者恢复的影响

目的探讨功能互补式多途径延续护理对腹腔镜术后患者恢复的影响。方法选取2016年9月至2019年2月在陕西省西安市临潼区人民医院进行腹腔镜手术的78例患者,根据随机数字表法分为对照组与功能组,每组39例。对照组在术后给予常规延续护理,功能组在术后给予功能互补式多途径延续护理,护理观察时间为3个月,记录患者术后恢复情况、并发症发生情况、社会支持评分、生活质量评分。结果功能组术后下床时间、术后肠道恢复时间与术后住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。功能组术后肺部感染、切口感染、腹腔脓肿、肠梗阻并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组护理3个月后的社会支持评分均高于护理前,差异有统计学意义(P0.05);功能组护理3个月后社会支持评分高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。功能组护理3个月后的角色功能、认知功能、情感功能、社会功能、躯体功能的生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论功能互补式多途径延续护理可促进腹腔镜术后患者康复,减少患者术后并发症的发生,也能改善患者的社会支持情况,从而提高患者的生活质量。     

新型冠状病毒肺炎疑似或确诊患者气管导管拔除注意事项

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒感染所致的乙类传染病,可进展为多器官功能衰竭[1]。其特点是传染性强,主要通过呼吸道飞沫和密切接触传播,长时间暴露于相对封闭的高浓度气溶胶环境也是其可能的传播途径[1],目前尚无治疗COVID-19的特效药[2]。有创机械通气是重型、尤其是危重型COVID-19患者的重要支持治疗之一。部分COVID-19疑似或确诊患者因合并外科疾病需行手术治疗。全麻手术结束,拔除气管导管时,医护人员暴露并发生感染的风险极高。     

如何有效杜绝HIV经口腔诊疗的传播

艾滋病的传播,主要是经血液、性及母婴垂直三条传播。我们高度重视血液途径传播HIV,严厉打击了非法采供血,所以经输血感染HIV已基本得到控制。针对吸毒人群共用注射器的现象,我们正积极推行清洁针具交换和美沙酮替代治疗,且有了长足的进步。长期以来,我们虽强调正规医院的感染管理工作,但许多小门诊（所）、尤其是一些口腔诊所的消毒技术规范工作并没有引起高度重视和严格监管,如果给一位HIV阳性的患者洗牙或补牙的机头灭菌不彻底,那么就存在通过机头上残存的血液将HIV传播给其他患者的潜在危险。     

应用Tet-On基因表达系统实现Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达

目的:应用Tet-On基因表达系统构建可调控性真核表达质粒,实现Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达.方法:采用DNA重组技术构建真核表达质粒pTRE-Tight-CFP-CD11b和pTRE-Tight-YFP-CD18(CD11b和CD18是Mac-1的两个亚基),通过脂质体介导共转染CHO细胞,用荧光显微镜观察转染后阳性细胞;应用RT-PCR和荧光强度分析观察不同浓度(0、0.01、0.1、0.5、1、2 μg/ml)强力霉素(Dox)对细胞内CD11b和CD18表达水平的影响;检测PMA(1 μg/ml)刺激前后CHO-Mac-1-FP细胞与其配基ICAM-1黏附活性的变化.结果:酶切鉴定和测序证实,已成功构建真核表达质粒pTRE-Tight-CFP-CD11b和pTRE-Tight-YFP-CD18,在荧光显微镜下观察到转染成功的CHO细胞发出青色荧光和黄色荧光.通过荧光显微镜观察到随着培养液中Dox浓度的增加,CHO细胞内的荧光强度相应增强,同时CD11b和CD18在mRNA水平的表达也随Dox浓度的增加而增加.PMA刺激后,CHO-Mac-1-FP细胞与其配基ICAM-1黏附率增高(2 h和4 h时最高,此后逐渐下降).结论:本研究成功实现了Mac-1-FP在CHO细胞中的可调控性表达并具有野生型Mac-1的黏附活性,为进一步开展单分子光谱(SMS)和荧光共振能量转移(FRET)技术研究活细胞内Mac-1分子的2个亚基的二聚化、群集、构象及与配基亲和力变化创造条件.     

川楝子醇提物通过线粒体途径诱导白血病CEM细胞的凋亡

背景:苦寒中药川楝子具有小毒,对生长环境要求不高,在实体瘤中能显著抑制肿瘤细胞的增殖,但在血液肿瘤中报道较少,基于前期研究结果,并结合中医"以毒攻毒"理论探讨其主要成分川楝素抗急性淋巴细胞白血病的作用机制.目的:探究川楝子醇提物抑制白血病CEM细胞增殖的作用机制.方法:人急性T淋巴细胞白血病CEM细胞培养至对数生长期,...     

m6A甲基化与代谢性疾病调控

背景:m6A甲基化修饰已逐渐成为生命科学与运动医学的研究热点与新方向,且诸多研究已证实m6A甲基化修饰与各类疾病关系密切,并在代谢类疾病的诊断和治疗中发挥关键作用,但其机制尚未阐明.目的:探讨m6A甲基化与各类代谢性疾病的关系,综述m6A及相关的酶在代谢性疾病调控中的最新研究进展,并对其具体分子机制进行详细概述,旨在为...     

细胞学检验与临床

0．04g／dl甲苯胺蓝用于宫颈刮片染色检查及临床意义;人外周血T淋巴细胞自噬现象的观察;重症肌无力患者外周血单核细胞凋亡调控基因表达的研究。