抗诱变和诱变同步快速试验方法的研究

本文依据SOS反应原噬菌体诱导法的基本原理对同步进行抗诱和诱变变试验的方法做了多种研究,取得了满意的结果。     

EMS对穿梭质粒pZ189诱变作用的初步研究

Shuttle vector plasmid pZ189 was used as a molecular tool and the SupF inserted in the plasmid was worked as a target gene for mutagenesis study. The host cells (E. coli MBM 7070) with pZ189 were treated with ethylmethane sulfonate (EMS) and plated on the selective media containing X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside) and IPTG (isopropyl-beta-D-thiogalactoside). The SupF and the LacZ amber mutant carried by the host cells complemented each other and thus made the colonies blue on the selective media. However the colonies derived from the SupF mutants changed the colour from blue to white. The mutant frequencies in a series of experiments with different concentrations of EMS were estimated. Furthermore, the DNA isolated from 5 SupF mutants was digested with restruiction enzyme Hha I. It suggests that the 214 bp Hha I fragments containing mutant SupF could be distinguished from their wild type counterparts by temperature-gradient gel electrophoresis under optimal conditions.     

阿司匹林,对乙酰氨基酚和布洛芬对整体大鼠着床前胚泡的微核诱导作用

采用一种灵敏,准确,简便的致突变研究方法,收集ig阿司匹林(Asp)对乙酰氨基酚(Par)及布洛芬(Ibu)的妊娠d 4大鼠胚泡进行微核试验,结果表明,孕后d3给Asp为微核产生高峰期;Asp>0.5g·kg~(-1),Par>0.25g·kg~(-1)时呈显著的胚泡微核诱导作用,而Ibu0.5g·kg~(-1)则无此效应,Asp各组微核呈依剂量增加,三药对同体孕鼠骨髓均无显著微核诱导作用,结果提示Asp和Par具遗传毒性,并证实整体大鼠着床前胚泡对某些化学物质的染色体断裂作用较骨髓细胞更为敏感。     

甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定vero细胞DNA体外复制的保真度

利用在猴肾ｖｅｒｏ细胞抽提物中建立的ＤＮＡ体外复制系统，对穿梭质粒ｐＺ１８９ＤＮＡ进行有效的复制后，将复制产物转化至Ｅ．ｃｏｌｉＭＢＭ７０７０，观察ｐＺ１８９质粒ＤＮＡ中突变靶基因ｓｕｐＦｔＲＮＡ基因突变的情况．在烷化剂甲基硝基亚硝基胍（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ′－ｎｉｔｒｏ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）诱发的遗传不稳定（ｇｅｎｅｔｉｃｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ）ｖｅｒｏ细胞胞浆抽提物中进行ｐＺ１８９质粒ＤＮＡ复制，发现经过体外复制的ｐＺ１８９质粒中ｓｕｐＦｔＲＮＡ基因突变率高出对照组５－８倍（Ｐ＜０．０５），证实该细胞ＤＮＡ复制系统的复制保真度明显降低     

小单孢菌M－90诱变方法的研究

以高温、ＬｉＣｌ、ＬｉＣｌ＋ＵＶ、甲胺＋ＵＶ、吖啶橙等理化诱变剂对玫瑰降红色小单孢菌Ｍ－９０进行诱变育种。高温、ＬｉＣｌ＋ＵＶ、甲胺＋ＵＶ、吖啶橙处理后都得到了高产菌株。其中以高温、ＬｉＣｌ＋ＵＶ效果最好。经过复筛与传代，得到了具有遗传稳定性的高产菌株，且发酵液中非活性组分较出发菌株减少。     

鲨烯的体外和体内抗诱变作用

鲨烯是生物体内从乙酰辅酶Ａ合成胆固醇的中间代谢物，鲨烯在鲨鱼肝内含量较高。鲨鱼是极少患癌症的脊椎动物，据认为与其体内的防癌抗癌物质如鲨烯及软骨多糖有关。对鲨烯的防癌抗癌作用我们曾作过综述［１］，现报道鲨烯在沙门氏菌致突变试验和小鼠骨髓微核试验的抗诱变...     

防老剂MB作业工人尿诱变活力监护

上海某厂MB防老剂作业工人的流行病学调查结果指出,MB作业工人恶性肿瘤死亡率显著增高,说明可能与职业因素有关。Ames试验结果,该厂MB产品为阳性(TA_(98)加S-9),精制品为阴性,表明MB产品中混有致突变性杂质。对MB作业工人进行尿诱变活力监护,显示MB接触者尿的诱变活力明显增高,与MB产品中混有致突变性杂质是相符合的。MB作业工人恶性肿瘤死亡率增高,就很可能与此致突变性杂质有关。本文研究表明,环境中如有潜在致突变物或致癌物存在,在引起机体不可逆的病理改变前,就有可能通过尿诱变活力监护引起注意,这对癌症的早期预防是有其重要的实际应用价值。     

滇池水的蚕豆根尖细胞微核率及其诱变因素

本文就滇池水体对蚕豆根尖细胞微核率的影响进行了研究,结果显示放鸭区水体中含有使蚕豆根尖细胞微核率增高的诱变物。对水体中诱变物的来源作了初探,提示与Cd、Cr、Pb、As、F等诱变物无联系,可能来自养鸭场鸭粪的污染。     

利用亚硝酸诱变原生质体筛选L-亮氨酸高产菌株的研究

本实验以L-亮氨酸产生菌黄色短杆菌CFN-19为出发菌株。我们首先对CFN-19菌株制备原生质体,原生质体制备率为95.1%,再生率为25%,然后对原生质体进行亚硝酸、利福平、氯化锂复合诱变处理,从再生菌株中筛选出一株高产菌株H_(6-66),产酸量由原来的23.1mg/ml提高到32.6mg/ml,提高率达41%.同时又对H_(6-66)菌株进行遗传稳定性考察,考察结果H_(6-66)菌株是高产稳定菌株。