外源基因在大肠杆菌中表达效率的影响因素

人们运用基因工程技术已在大肠杆菌中成功地表达了许多重要的生物活性蛋白基因。但不同外源蛋白基因在大肠杆菌中的表达效率差异很大。本文综述了影响外源基因表达效率的一些常见因素,特别是对影响酬译起始的因素给予了更多的关注,同时总结了一些提高外源基因在大肠杆菌中表达效率的行之有效的方法。     

XGD-1对人外周血T淋巴细胞增殖和IL-2R表达的影响

目的 探讨XGD—l的免疫抑制作用及其作用机理。方法 不同浓度的XGD—l作用于植物血凝索(PHA)和刀豆索A(ConA)诱导的正常人外周血T淋巴细胞，共同培养48h和72h，用改良MTT法观察XGD—l对人T淋巴细胞增殖的影响，用流式细胞术检测XGD—l对T淋巴细胞表面IL—2R表达的影响；同时观察联合应用CsA和XGD—l对细胞增殖及IL—2R表达的影响。结果 XGD—l对PHA和ConA诱导的正常人外周血T淋巴细胞增殖有明显的抑制作用，其作用与药物浓度有关，在一定剂量范围内，抑制作用随XGD—l剂量的递增而加强；XGD—l对PHA和ConA激活的T淋巴细胞表面IL-2R的表达有显著抑制作用，阳性率从正常对照活化细胞的47．67％降为25．03％；联合应用CsA，上述抑制作用增强。结论 XGD-l具有免疫抑制作用，能降低IL-2R表达，可能是其免疫抑制作用的重要机理之一。     

胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达及临床意义

胰腺癌发病隐匿，恶性程度高，早期认断困难，并且对各种辅助治疗敏感性不高，生存率低，是预后差的恶性肿瘤之一。为探讨胰腺癌生物学行为与nm23和PCNA表达的关系，本实验应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测41例胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达情况，并探讨二的表达与病理学分级，临床分期之间的关系。[第一段]     

神经损伤诱导脊髓运动神经元nNOS表达的种属差异

臂丛神经根撕脱后，脊髓前角运动神经元由于丧失骨骼肌和髓鞘胶质细胞提供的神经营养而出现不可逆的死亡。以往的研究发现：大鼠和小鼠运动神经元死亡的严重程度具有显著的差异，其原因还不是很明确。我们前期的研究发现，成年SD大鼠神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)基因的表达与运动神经元的死亡成     

论“恐伤”心理的基因定势表达

本文在基因定势表达研究概况基础上，列举0MIM上部分与恐惧等心理因素定势的基因与疾病，进而探讨心理、基因定势表达与精神病的关系。     

趋化因子mRNA在急性坏死性胰腺炎肺组织中的表达

重症急性胰腺炎 (SAP)的发生及其引发的急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)、多器官功能障碍综合征 (MODS)与多种细胞因子等炎性介质的作用有关〔1〕。本文通过急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠模型 ,应用RT PCR技术检测肺组织单核细胞趋化性蛋白 1(monocytechemotacticprotein 1,MCP 1)mRNA表达 ,旨在探讨MCP 1在ANP肺损伤中的作用。1.材料和方法 :(1)动物分组及ANP模型的建立 :雄性Wistar大鼠 33只 ,体重 2 5 0～ 30 0g。随机分为正常对照组 (6只 )和ANP不同时间点各组 (1h组 6只 ,4、12及 2 4h组各 7只 )。参照Aho等〔2〕的方法制备A…     

大鼠肝硬化形成过程中胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA的表达及其意义

目的观察大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体mRNA在胃黏膜微循环血管上的表达 ,探讨内皮素及其受体对肝硬化门静脉高压大鼠胃黏膜微循环的调节机制。方法应用mRNA原位杂交确定内皮素A受体的部位 ,并进行半定量分析。结果大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中门静脉及外周血浆内皮素水平随门静脉压力升高而降低。胃黏膜内皮素A受体mR NA主要在黏膜基底部的微循环前微动脉和后微静脉血管壁表达 ,其中动脉表达明显强于静脉。其表达与门静脉压力呈正相关 (r =0 86 9,P <0 0 5 ) ,与门静脉及外周血内皮素水平呈负相关 (r =-0 797、- 0 74 1,P <0 0 5 )。结论大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中外周及门静脉血浆内皮素水平进行性降低 ;胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA表达量增加 ,呈现上调趋势 ;内皮素及其受体mR NA表达变化可能与胃黏膜微循环功能障碍有关。     

骨髓细胞移植上调血管内皮生长因子及其受体的表达并改善缺血心脏功能

目的：通过骨髓细胞移植对心肌梗死大鼠模型血管内皮生长因子及其受体表达的影响，探讨骨髓细胞移植改善缺血心脏功能的可能机制。方法：利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型，然后行异体骨髓细胞移植；分别于术后1d，3d，7d，14d和28d取材；利用免疫荧光和RT—PCR技术分析细胞移植对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk一1)表达的影响和移植细胞的分化情况；通过免疫组化计算血管数量；应用血流动力学检测大鼠心脏功能在术后各时间点的变化。结果：VEGF和Flk-1在移植组动物的心肌梗死区残存细胞、梗死周边区细胞以及部分移植细胞内表达。移植组VEGF和Flk-1的mRNA表达明显高于对照组。分别于术后3d和14d达到高峰，以后逐渐减弱。术后7d，14d和28d移植组血管数量较同期对照组明显增加，移植组心脏功能较对照组明显改善。术后14d可在部分移植细胞中检测到心肌细胞或血管内皮细胞特异性蛋白的表达。结论：骨髓细胞移植通过上调移植细胞及受者内源性VEGF和Flk—1的表达，促进血管新生，进而改善缺血心脏功能。     

应用抑制消减杂交和cDNA表达谱芯片筛选肝星形细胞持续活化的相关基因

目的：利用抑制消减杂交（suppression subtractive hybridization,SSH）和cDNA表达谱芯片筛选早期活化的肝星状细胞与大鼠正常肝脏组织、轻度肝纤维化组织、重度肝纤维化组织中差异表达的基因.方法：从SSH构建的大鼠轻度和重度肝纤维化中两个差异cDNA文库中挑选1 000条上调显著的基因,与正常大鼠4 136条基因克隆制作成一张芯片,筛选持续期活化的肝星状细胞相关基因.结果：获得与HSC持续活化相关的上调基因633条,下调基因715条,其中血清和糖皮质激素调节蛋白激酶（SGK）在正常大鼠基因克隆和2、8周SSH上调差异基因中均呈上调信号.结论：联合应用SSH和cDNA表达谱芯片是筛选和鉴定不同样本中差异表达基因的快速、经济和有效方法;SGK可能作为多种细胞信号传导通路和细胞磷酸化级联反应的一个功能性交汇点,参与了肝星状细胞的早期活化和信号传导.