人白细胞介素—9cDNA的PCR扩增及其在大肠杆菌的表达

利用ＰＣＲ技术从人外周血Ｔ细胞ｃＤＮＡ文库中扩增出人ＩＬ－９的ｃＤＮＡ，将其连入大肠杆菌表达载体后，可大大肠杆菌高效表达出人重组ＩＬ－９融合蛋白，表达量占菌体蛋白的２５％左右，有明显的刺激正常人骨髓细胞集落形成的活性。     

NHERF-1介导雌激素调节PTEN蛋白表达的研究

目的：研究雌激素调节PTEN蛋白表达的分子机制。方法：利用蛋白质芯片筛选PTEN的结合蛋白，发现了NHERF-1与PTEN的相互作用；应用GST pull-down、over-lay和免疫共沉淀等方法确认了其二者的相互作用。通过瞬时转染、免疫印迹分析、RT-PCR、RNAi以及蛋白降解速度检测等方法检测NHERF-1对细胞内PTEN稳定性的影响。结果：发现了PTEN与NHERF-1的相互作用，该相互作用是通过PTEN羧基末端与NHERF-1的第一个PDZ结构域相结合而实现的。将PTEN羧基末端的4个氨基酸分别突变为丙氨酸，都会明显抑制二者的结合。利用免疫共沉淀确认了细胞内完整的PTEN与NHERF-1蛋白分子的相互作用。发现NHERF-1的表达可以提高细胞内PTEN的蛋白表达量，而其mRNA表达水平没有增加。利用环己酮抑制新蛋白合成后，检测到NHERF-1的表达可以抑制PTEN蛋白的降解速度；RNAi抑制内源性NHERF-1的表达导致IYFEN的蛋白表达量显著下降。雌激素可以明显增高NHERF-1与PTEN的蛋白表达，RNAi干扰NHERF-1表达后，雌激素不再调节PTEN的蛋白的表达。结论：PTEN与NHERF-1可以特异结合。NHERF-1与PTEN结合显著提高PTEN蛋白的稳定性；雌激素并不直接调节PTEN蛋白的表达而是通过诱导NHERF-1的表达，引起PTEN蛋白稳定性的增强而导致PTEN蛋白含量的提高。     

肿瘤标志的基础与临床应用(九)

10血中癌基因蛋白 随着肿瘤分子生物学的发展,人们把目光逐渐转向了癌基因。已经公认,癌基因的异常表达是肿瘤发生的起因。癌基因仅存在于细胞中,无法作为常规无创检查项目。随着检测技术的进步,学术界开始考虑血清癌基因表达蛋白作为肿瘤标志用于诊断的可能性。迄今为止,虽然已发现了近100个癌基因与肿瘤发生、发展有关,但仅有少数几种癌基因蛋白可在血清中检出。 10.1 ras基因蛋白:ras族基因编码     

妊娠相关血浆蛋白A水平与不稳定心绞痛患者冠状动脉狭窄病变形态的关系

[目的]探讨不稳定型心绞痛患者妊娠相关血浆蛋白(PAPP-A)水平与高敏C-反应蛋白(hs-CRP)及动脉粥样硬化斑块稳定性的关系.[方法]不稳定型心绞痛组患者42例,稳定型心绞痛组38例.冠状动脉造影前检测PAPP-A和hs-CRP,根据造影结果将冠状动脉病变分为复杂狭窄和光滑狭窄.[结果]稳定型心绞痛组有28例(74%)患者至少有1支血管狭窄≥70%,多于不稳定型心绞痛组的24例(57%),P＜0.05;不稳定型心绞痛组中33例(79%)有1处以上的复杂狭窄,多于稳定型心绞痛组(22例,58%,P＜0.05);PAPP-A与hs-CRP正相关(r=0.44,P＜0.001);不稳定型心绞痛组与稳定型心绞痛组相比,hs-CRP(4.40 mg/L±0.003 mg/L vs 0.48 mg/L±0.016mg/L,P＜0.001)和PAPP-A(18.40×10-3 U/L±0.002×10-3U/Lvs 7.79×10-3 U/L±0.001×10-3 U/L,P＜0.001),差异均有统计学意义;两组中有复杂狭窄者的PAPP-A和hs-CRP水平显著高于无复杂狭窄者.[结论]PAPP-A可作为评估冠状动脉斑块稳定性的血清学指标之一.     

骨形态发生蛋白的基础研究及临床应用

自1965年最早利用脱钙骨基质在肌肉内诱发异位成骨后,人们在纯化脱钙骨移植物活性成分的过程中发现了骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)家族。此后,随着基因工程技术的广泛应用,骨诱导和BMP的研究日趋活跃,对其理化和生物学特性做了更深入的研究,BMP已证明是正常胚胎时期骨、牙组织内部骨和成年骨修复中最重要的诱导分化因子。这组蛋白质的发现,无论对基础生物学研究,还是对于临床应用都具有重要的价值。     

胶原蛋白的市场前景

胶原蛋白是人体内含量最多、分布最广的蛋白质，是一种与组织和器官功能密切相关的功能性蛋白。胶原蛋白主要分布在人体的结缔组织中，对人体皮肤，血管，骨骼，筋腱和软骨的形成以及维持其韧性和弹性都十分重要。     

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子对口腔黏膜屏障保护作用的研究

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子是一种广泛存在于黏膜分泌液中的因子，具有抑制蛋白酶、抗微生物、促进组织修复等多种生物学功能，是黏膜表面防御屏障的重要组成成分。本文对近期有关其结构、功能的研究进行综述，并重点探讨它对口腔黏膜屏障保护作用。