人脐血间充质干细胞的培养条件比较

目的摸索人脐血间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）的培养条件。方法根据不同采血量、首次换液时间、胎龄、不同培养基对样本分组，比较不同培养条件对脐血中的间充质干细胞原代生长的影响，以流式细胞仪对培养出的间充质干细胞进行细胞表面标志检测。结果在相同条件下，取10ml的脐血能较大程度培养出间充质干细胞；观察首次换液时间在培养后96h较为合适，延长换液时间有利于数量不占优势的单核细胞充分贴壁：早产胎儿的脐血培养出的间充质干细胞成功率较高；胎牛血清的质和量决定了培养成功与否。培养出的间充质干细胞不表达造血细胞系的标志（CD34、CD45、CD14）及内皮细胞的标志（CD106），强表达CD29、CD44、CD13。结论样本量、首次换液时间、胎龄、培养基的质和量对MSCs的成活、生长有关键作用。     

骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗塞的实验研究

目的研究自体骨髓间充质干细胞(MSC)经冠脉内注射治疗急性心肌梗死(AMI)的有效性和可行性。方法球囊阻塞法制成AMI模型。经冠脉注入标记的MSC,4周后核素心肌断层显像检测相对心肌梗死面积、心肌灌注评分和射血分数,经导管检测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、压力升高最大速率( dP/dt)和压力下降最大速率(-dP/dt)。免疫荧光法分析MSC的植入和分化。结果与对照组相比,细胞治疗组射血分数显著增加(P<0.05),心肌灌注评分和相对心肌梗死面积显著降低(P<0.01,P<0.05),LVSP、 dP/dt和-dP/dt显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01),LVEDP显著降低(P<0.05)。标记的MSC在心肌中阳性表达肌凝蛋白重链、连接蛋白43、平滑肌肌动蛋白和Ⅷ因子相关抗原。结论MSC在体内分化为心肌和血管组织,可改善AMI猪的心功能。     

再生柞蚕丝素蛋白对人骨髓间充质干细胞体外扩增的支持作用

大量的研究表明家蚕丝素蛋白具有良好的生物相容性。而对于柞蚕丝素蛋白在医用生物领域的研究报道在国内外尚较少。本研究选择再生柞蚕丝素蛋白为研究对象，观察了人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）在再生柞蚕丝素膜上的粘附、生长及表面抗原的变化。结果在1h观察再生柞蚕丝素对hBMSCs的粘附力几乎与胶原相同，明显优于家蚕丝素和聚苯乙烯培养板。MTT法检测结果显示在第4d hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上的增殖明显高于其他各组。电镜观察结果显示hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上能够很好的粘附、生长，细胞间能相互连接形成片状结构。流式细胞仪检测再生柞蚕丝素蛋白对hBMSCs表面抗原的表达亦无明显影响。本研究结果显示再生柞蚕丝素蛋白体外支持hBMSCs的粘附、生长，具有良好的细胞相容性。     

兔骨髓间充质干细胞来源的心肌(样)细胞的诱导分化研究

目的体外诱导骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向肌源性细胞分化,探索诱导后的MSCs移植于心肌梗死区的存活和分化情况。方法提取、分离、培养兔的MSCs。经5-氮胞苷诱导后,进行免疫组化,电镜观察。4',6二乙酞基-2-苯基吲哚(DAPI)标记MSCs,建立兔心肌梗死模型。实验动物随机分两组:实验组(n=10)在心梗区域注入经诱导后的MSCs;对照组(n=10)在心梗区域注入不含MSCs的培养液。移植4周后,进行病理标本观察和免疫组化检测。结果5-氮胞苷诱导MSCs4周,部分细胞表达肌钙蛋白T(troponin T),电镜观察到肌丝形成。MSCs在体外用DAPI标记,用荧光显微镜观察细胞发蓝色荧光。移植4周后,在实验组中用荧光显微镜观察可见梗死区组织标本中可见DAPI标记带蓝色荧光的供体细胞核,移植细胞表达troponin T。结论MSCs经5-氮胞苷诱导后可向心肌细胞转化。移植细胞可在心肌存活,并向心肌细胞(样)转化。     

终末糖基化产物对培养的人脐静脉内皮细胞粘附分子表达的影响

目的：探讨终末糖基化产物在糖尿病动脉粥样硬化（AS）形成中的作用机理。 方法： 分离正常人脐静脉内皮细胞（HUVECs），将终末糖基化终产物（AGE）修饰的人血清白蛋白（AGE-HSA）、人血清白蛋白（HSA）与HUVECs在体外共同培养，并用荧光单克隆抗体染色，流式细胞仪定量检测细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）的表达。 结果： 正常人HUVEC表达ICAM-1和VCAM-1。AGE-HSA能以时间和剂量依赖的方式上调ICAM-1、VCAM-1的表达（P<0.05），而HSA对HUVECs上述粘附分子的表达均无影响。 结论： AGE能上调HUVECs粘附分子的表达，从而促进AS时单核/巨噬细胞的浸润。     

以骨间前血管为蒂前臂骨膜骨瓣的临床应用

应用骨间前血管为蒂.桡、尺骨骨膜骨瓣移位治疗上肢骨不连或骨缺损38例,均获得成功。该术式与以桡、尺动脉为蒂的桡、尺骨骨膜骨瓣移位相比较,有不损伤前臂主要血管干、移位范围大、适应症较广和操作简便易推广等特点.     

骨髓间充质干细胞复合羟基磷灰石/磷酸三钙植骨材料的体外研究

目的研究兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)在羟基磷灰石/磷酸三钙(HA/TCP)植骨材料上的黏附增殖情况。方法抽取兔股骨骨髓,进行贴壁培养BMSCs。在成骨诱导液中诱导BMSCs,于7d用钙钴法检测碱性磷酸酶活性,10d进行茜素红矿化结节染色;在成脂诱导液中诱导BMSCs,于21d进行油红O染色。将BMSCs接种到HA/TCP植骨材料上,加入成骨诱导液,采用倒置显微镜、荧光显微镜及扫描电镜检测,并采用四氮唑蓝(MTT)比色法测定HA/TCP植骨材料上BMSCs的增殖情况。结果BMSCs在成骨诱导液中7d碱性磷酸酶呈强阳性,10d矿化结节染色呈橘红色;在成脂诱导液中,21d油红O染色呈阳性。BMSCs在HA/TCP植骨材料上孔隙周围及孔隙内生长良好并大量增殖。MTT分析结果显示,HA/TCP对BMSCs的体外增殖无抑制作用。结论BMSCs与HA/TCP植骨材料有良好的生物相容性。     

骨间前血管腕背支骨膜瓣移位修复骨不连的临床应用

报道用骨间前血管腕背支骨膜瓣移位修复骨不连、骨坏死的手术方法及疗效。方法：根据应用解剖学研究，设计以骨间前动脉腕背支为蒂的骨膜瓣，顺行移位修复尺、桡骨骨不连，逆行移位修复手舟骨、月骨不连与骨坏死。结果：临床应用19例，随访1年，在术后3～6月均达到骨愈合和骨坏死修复，关节活动功能明显改善。结论：骨间前血管腕背支为蒂的骨膜瓣移位术适合邻近骨不连、骨坏死修复。     

腰椎间关节及部分相关结构的神经支配

在20具成人腰骶部脊柱标本上,观察了腰椎间关节及部分相关结构的神经分布.腰椎间关节主要由腰神经后内侧支支配,为单源多节段分布模式。后内侧支的行程为双“S”形,可使神经缓冲牵拉免受损伤,它经过狭窄弯曲的骨纤维管时可能易受嵌压导致下背痛.     

肩锁关节及关节盘的相关解剖学特征

背景:目前临床上多数认为,肩部疾病如肩锁关节脱位、肩峰下撞击综合征等与肩锁关节的解剖形态有很大的关系,但国内外文献很少有关于肩锁关节的形态学数据支持,特别对于肩锁关节关节盘的解剖学研究。同时肩锁关节属于微动关节,参与肩关节的联合运动,现临床上有关肩锁关节脱位的手术方式繁多,较流行的手术方式多为刚性固定,并未保留其微动特点以及锁骨和肩胛骨的运动特点,其中关节盘的取舍目前国内外并无大样本多中心对照研究。目的:对肩锁关节及关节盘行相关解剖学研究,用于更好地指导肩部疾病的诊治。方法:对58具肩锁关节尸体标本(同济大学解剖教研室提供)进行形态学及组织结构研究,共获得58个肩峰、58个锁骨和36个关节盘(包括完全型和不完全型)。采用BIGLIANI肩峰形态分型、DEPALMA锁骨形态分型、EMURA肩锁关节盘分型,获得各肩峰与锁骨组合下关节盘出现的频率并行苏木精-伊红染色(上海市普陀区人民医院提供)。结果与结论:①在58个肩锁关节尸体中,肩锁关节盘type1型共15例,所占比例最高,为25.9%;type3a型共4例,所占比例最少,为6.9%。②Ⅰ型肩峰32个,所占比例最高,为55.2%;Ⅲ型肩峰3个,所占比例最低,为5.2%。③Ⅰ型锁骨27个,所占比例最高,为46.6%;Ⅲ型锁骨9个,所占比例最低,为15.5%。④以Ⅰ型及Ⅱ型肩峰与Ⅰ型锁骨组合所占比例较大,分别为24.1%和22.4%,以Ⅲ型肩峰对Ⅰ型锁骨所占比例最小,为0%。⑤而在Ⅰ型肩峰与Ⅰ型锁骨组合下type1型和type2b型关节盘所占比例最大,分别为35.7%和28.6%;Ⅱ型肩峰与Ⅰ型锁骨组合下type2a型和type1型关节盘所占比例最大,分别为38.5%和23.1%。⑥苏木精-伊红染色在组织切片中可以发现,关节盘中的细胞外基质清晰可辨,细胞形态饱满,含有丰富的细胞质,提示为软骨细胞,即形成纤维软骨的主要成分。此外,从关节囊顶端和底端两侧可见部分骨膜纤维层移行至关节盘内侧,考虑共同组成关节盘结构,即关节盘由近骨面的软骨细胞及远离骨面的纤维层共同构成。